鼻康片对变应性鼻炎患者外周血T细胞亚群及细胞因子的影响

张田喻国冻邢杨任少达

·实验研究·

鼻康片对变应性鼻炎患者外周血T细胞亚群及细胞因子的影响

张田1喻国冻1邢杨1任少达2

目的探讨鼻康片对变应性鼻炎患者外周血T细胞亚群及细胞因子的影响。方法前瞻性收集我院收治的变应性鼻炎患者100例，根据完全随机数字表原则，将患者分为观察组和对照组，每组各50例。观察组给予鼻康片联合氯雷他定片治疗，对照组仅给予氯雷他定片治疗。观察两组患者治疗前后外周血Th1、Th2、Th17和Treg细胞、IL-2、IL-4、IFN-γ、过敏性鼻结膜炎生活质量(RQLQ)。结果两组患者治疗前Th1、Th17、Treg、IL-2和RQLQ等差异均无统计学意义(P＞0.05)。与对照组比较，观察组患者治疗后Th1显著升高 (14.38±1.89 vs.11.48±1.44%,P=0.000)；Th17显著降低 (1.34±0.28 vs.1.61±0.29%,P=0.000)；Treg显著升高(3.48±0.75 vs.2.72±0.52%,P=0.000)；IL-2显著升高(45.38±9.83 vs.34.38±10.83 pg/ml,P=0.000)；RQLQ评分显著降低(17.38±5.84 vs.20.32±6.48,P=0.019)。两组患者治疗前后Th2、IL-4和IFN-γ均无统计学意义(P＞0.05)。结论鼻康片有助于纠正变应性鼻炎患者外周血T细胞亚群失衡，改善患者生存质量。

变应性鼻炎；T细胞亚群；细胞因子；鼻康片

变应性鼻炎是一种慢性炎症性疾病，主要由Ⅰ型变态反应介导，与免疫球蛋白E水平升高有关[1，2]。随着研究的进展，目前越来越多的研究证实多种免疫细胞参与了变应性鼻炎的发病过程。2014年我国学者研究显示变应性鼻炎模型小鼠Th1、Th2平衡功能失调[3]。随着研究的进一步深入，学者进一步发现变应性鼻炎患者外周血中Th17/Treg细胞一样存在功能失调[4，5]。目前研究已肯定Th1、Th2、Th17和Treg在变应性鼻炎患者中的作用。鼻康片具有清热解毒、疏风消肿和利咽通窍等功能，适用于各种急慢性鼻炎、鼻窦炎、变应性鼻炎等。2013年我国学者黄水仙在变应性鼻炎模型小鼠中发现鼻康片有助于纠正小鼠Th1、Th2平衡失调，进而改善小鼠症状[6]。然而，目前关于鼻康片对变应性鼻炎患者外周血Th1、Th2、Th17和Treg细胞的影响和临床疗效尚不清楚，因此有必要进行进一步研究。

资料与方法

1 一般资料

自2014年1月～2016年6月，收集我院收治的变应性鼻炎患者，纳入标准：①变应性鼻炎“根据2004年中华医学会耳鼻咽喉科分会兰州会议制定的变应性鼻炎的诊治原则和推荐方案”[7]：①具有鼻痒、喷嚏、鼻分泌物和鼻塞4项症状中至少3项；②鼻腔黏膜苍白、水肿、充血、肿胀等，发作时鼻分泌物涂片或结膜刮片嗜酸性粒细胞检查阳性或变应性皮肤试验阳性，变应原点刺液由丹麦ALK公司提供，包括粉尘螨、屋尘螨、热带螨、猫毛、狗毛、花粉(鸡足草、酥油草、梯牧草、毒麦、牧场草、悬铃树、白杨、柳树、榆树)、德国小蠊、艾草、豚草、真菌、牛奶、花生、苹果和虾。所有患者均接受上述检查；②年龄在18～65岁之间；③同意参与本研究。排除标准：①系统性红斑狼疮等免疫系统性疾病；②肺部疾病；③肝肾等脏器功能不全；④既往心肌梗死等重大心血管疾病；⑤甲状腺功能不全；⑥免疫抑制；⑦半年内曾使用免疫调节剂；⑧恶性肿瘤；⑨其他重大疾病。研究期间，根据纳入标准和排除标准，共纳入变应性鼻炎患者100例，根据完全随机数字表原则，将患者按1∶1随机分为观察组和对照组，每组各50例。观察组男性23例，女性27例，年龄范围为18～64岁，平均为42.57±9.92岁，身体体重指数范围为19.8～32.8kg/m2，平均身体体重指数为24.84±3.27kg/ m2，病程范围为3～28月，平均为15.49±4.39月；对照组男性21例，女性29例，年龄范围为19～65岁，平均为42.88±10.28岁，身体体重指数范围为19.4～ 32.9kg/m2，平均身体体重指数为25.07±3.48kg/m2，病程范围为4～31月，平均为15.88±4.41月；两组患者就诊时性别、年龄、身体体重指数和病程等差异均无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。本研究中所有患者均知情同意并签署知情同意书，本研究通过医院伦理委员会批准。

2 治疗方法

观察组给予鼻康片（贵州安康制药有限公司，批号：Z20027541，0.35g/片，4片/次，3次/日，疗程为2周）联合氯雷他定(开瑞坦，上海先灵葆雅制药有限公司，批号：国药准字：H10970410，10mg/次，1次/日，总疗程为2周)治疗。对照组仅给予氯雷他定治疗，方法同观察组。脱落标准：①研究期间上呼吸道感染；②研究期间失访、不配合治疗、放弃治疗或转院；③因其他疾病需要合并用药。研究期间，无患者脱落，无合并用药。

3 观察指标

包括两组患者治疗前后外周血Th1、Th2、Th17和Treg细胞、IL-2、IL-4、IFN-γ、过敏性鼻结膜炎生活质量(RQLQ)。①外周血Th1、Th2、Th17和Treg细胞检测：使用美国Beckman coulter公司生产的Epics XL型流式细胞仪检测患者静脉血中Th1、Th2、Th17和Treg细胞，简要步骤：清晨空腹条件下，抽取肘静脉血5ml，3000r/min离心后取上层血清加入乙二胺四乙酸二钠试管中，抽取100μl血清与相对应的鼠抗人单克隆抗体混匀，避光反应30min后即刻进行流式细胞仪检测。②IL-2、IL-4、IFN-γ检测：使用江苏菲亚生物科技有限公司提供的Elisa试剂盒检测患者血清中IL-2、IL-4、IFN-γ；③RQLQ检测：根据RQLQ评分[8]，由同一医师对患者进行评分。

4 统计方法

采用SPSS 22.0软件进行统计分析，P＜0.05表示差异均有统计学意义。两组患者Th1等计量资料之间的差异采用独立样本t检验进行统计分析；两组患者性别等计数资料之间的差异采用卡方检验进行统计分析。

结果

1 两组患者Th1和Th2细胞水平比较

两组患者治疗前Th1差异无统计学意义（P＞0.05）。与对照组比较，观察组患者治疗后Th1显著升高（14.38±1.89 vs 11.48±1.44%，P=0.000)。两组患者治疗前后Th2差异均无统计学意义（P＞0.05），见表1。

表1 两组患者Th1和Th2细胞水平比较

2 两组患者Th17和Treg细胞水平比较

两组患者治疗前Th17和Treg差异均无统计学意义(P＞0.05)。与对照组比较，治疗后Th17显著降低(1.34±0.28 vs.1.61±0.29%，P=0.000)；Treg显著升高（3.48±0.75 vs.2.72±0.52%，P=0.000)，见表2。

表2 两组患者Th17和Treg细胞水平比较

3 两组患者IL-2、IL-4、IFN-γ水平比较

两组患者治疗前后IL-4和IFN-γ差异均无统计学意义(P＞0.05)。两组患者治疗前IL-2差异无统计学意义(P＞0.05)。与对照组比较，治疗后IL-2显著升高（45.38±9.83 vs.34.38±10.83pg/ml，P=0.000），见表3。

表3 两组患者IL-2、IL-4、IFN-γ水平比较

4 两组患者RQLQ比较

两组患者治疗前RQLQ评分差异无统计学意义(25.82±8.49 vs.24.26±7.51，P=0.333)。与对照组比较，治疗后RQLQ评分显著降低（17.38±5.84 vs.20.32±6.48，P=0.019)，见图1。

图1 两组患者RQLQ比较

讨论

变应性鼻炎是一种变态反应性疾病，目前已经公认Th1、Th2、Th17和Treg细胞及其细胞因子在变应性鼻炎的发生和发展中起到关键作用[9]。鼻康片具有清热解毒、疏风消肿和利咽通窍等功能，在动物研究中显示鼻康片可以调节变应性鼻炎动物模型小鼠Th1和Th2，促进其恢复正常[6]。然而目前缺乏临床研究，因此我们设计了本研究观察鼻康片对变应性鼻炎患者RQLQ评分的影响，并分析其对外周血T细胞亚群和细胞因子的影响，为鼻康片对变应性鼻炎患者临床疗效和具体机制进行探讨。本研究显示鼻康片可以显著提高患者Th1、Treg和IL-2水平，降低Th17和RQLQ评分(P＜0.05)。RQLQ是专门针对变应性鼻炎的评分，其得分越低，表明患者临床症状改善越明显，生活质量越高，有Juniper[8]1997年提出。结合本研究表明鼻康片有助于改善变应性鼻炎患者生存质量。目前，研究已证实变应性鼻炎患者Th1/Th2降低，主要原因是Th1水平明显下降，而Th2水平无明显变化，进而表现为Th2占优势[10]。Th2可分泌IL-4等细胞因子，是变应性鼻炎患者中关键炎性因子之一[11，12]。另外，IL-4可以促进IgE的增加，而目前研究同样已证实IgE增加在变应性鼻炎中的作用[13，14]。结合本研究可表明鼻康片可以提高Th1水平，使Th1和Th2细胞免疫向Th1漂移，进而减少IL-4和IgE的生成，最终改善患者生活质量。然而本研究中IL-4水平经治疗后均明显下降，但两组差异并无统计学意义(P＞0.05)，具体原因尚不清楚。而Th17分泌的IL-17可以通过激活促炎因子、增强Th2细胞功能[15]。另外IL-17还可以通过促进中性粒细胞的增殖和增强树突状细胞的功能，从而介导变应性鼻炎的发生，在儿童变应性鼻炎的患者中，可以发现Th17水平升高明显[16]。结合本研究表明鼻康片可以通过降低变应性鼻炎患者Th17水平，从而达到改善患者临床症状的目的。而Treg细胞是一种负调节性T细胞，可以通过分泌IL-10等介导机体的免疫耐受和抑制，IL-10可以抑制IgE等炎性因子的产生，是炎性细胞和炎性因子的抑制剂[17-19]。结合本研究表明鼻康片可以通过提高变应性鼻炎患者Treg细胞，进而抑制局部变态反应。鼻康片改善变应性鼻炎患者免疫功能，降低局部变态性反应的机制尚不清楚。但2014年沈琴等[20]在干燥性鼻炎患者中同样表明鼻康片可以较好地改善患者临床症状。

综上所述，鼻康片有助于纠正变应性鼻炎患者外周血T细胞亚群失衡，改善患者生存质量。

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20 沈琴,李勇,曹晓林,等.鼻康片联合生理海水鼻喷雾剂治疗干燥性鼻炎的疗效观察 [J].中国中西医结合耳鼻咽喉科杂志,2014,22(05):336-338.

（收稿:2017-05-04 修回：2017-05-24）

The effect of Bikang tablets on T lymphocyte subsets and cytokines in peripheral blood of patients with allergic rhinitis

ZHANG Tian,YU Guodong,XING Yang,REN Shaoda
Department of Otolaryngology,Affiliated Hospital of Guizhou Medical University,Guiyang,Guizhou, 550002,China

ObjectiveTo investigate the effect of Bikang tablets on T lymphocyte subsets and cytokines in peripheral blood of patients with allergic rhinitis.Methods100 cases of patients with allergic rhinitis admitted to our hospital were prospectively collected in this study.According to the principle of complete random number table,the patients were divided into the observation group and the control group with 50 cases in each group.The observation group were given Bikang tablets combined with Loratadin, while the control group only

the treatment of Loratadine.Th1,Th2,Th17 and Treg,IL-2,IL-4,IFN-γ in peripheral bloodand Rhinoconjunctivitis quality of life questionnaire (RQLQ)of both group before and after the treatment were observed.ResultsThere were no significant differences between the two groups in Th1,Th17,Treg,IL-2 and RQLQ before the treatment between the two groups(P＞0.05).However,when compared with the control group,patients in the observation group got a significantly higher level of Th1 after the treatment(14.38±1.89 vs.11.48±1.44%,P=0.000);a lower level of Th17 (1.34±0.28 vs.1.61±0.29%,P=0.000);an elevated level of Treg(3.48±0.75 vs.2.72±0.52%,P=0.000);an increase in IL-2(45.38±9.83 vs.34.38±10.83 pg/ml,P=0.000);and a decrease in RQLQ(17.38±5.84 vs.20.32±6.48,P=0.019).There were no statistical differences between the two groups in Th2,IL-4 and IFN-γ before and after the treatment(P＞0.05).ConclusionBikang tablets is helpful to correct the imbalance of T lymphocyte subsets in peripheral blood of patients with allergic rhinitis,and to improve the quality of life.

allergic rhinitis;T cell subsets;cytokines;Bikang tablets

10.16542/j.cnki.issn.1007-4856.2017.03.006

1 贵州医科大学附属医院耳鼻咽喉科（贵阳，550002）

2 山东省聊城市人民医院普通外科

张田，副主任医师.Email:zhangtian061210@163.com