重症手足口病患儿NSE S100β蛋白 sVCAM-1和神经肽Y的变化及临床意义

王海军 成怡冰 宋春兰 崔亚杰 陈 芳 李 鹏

1)郑州儿童医院 郑州 450000 2)郑州儿童急危重症疾病实验室 郑州 450000

重症手足口病患儿NSE S100β蛋白 sVCAM-1和神经肽Y的变化及临床意义

王海军1)成怡冰1，2)宋春兰1)崔亚杰1)陈 芳1)李 鹏1)

1)郑州儿童医院 郑州 450000 2)郑州儿童急危重症疾病实验室 郑州 450000

目的 探讨重症手足口病患儿脑脊液及血清中S100β蛋白、神经元烯醇化酶(NSE)、可溶性血管内皮细胞载附分子(sVCAM-1)和神经肽Y(YNP-Y)水平变化及临床意义。方法 60例重症手足口病患儿根据诊断分为重型组(20例)和危重型组(40例)，并选取同期我院诊治的无中枢神经系感染的普通型手足口患儿为对照组(30例)。电化学发光法检测各组患儿NSE、S100β蛋白水平，ELISA检测血清和脑脊液SVCAM-1的含量，采用放射免疫分析法测定NPY的含量。结果 与对照组相比，重症手足口病患儿脑脊液和血清中NSE、S100β蛋白、sVCAM-1和神经肽Y水平显著增高(P<0.05)；与重型HFMD组相比，危重型HFMD组患儿血清和脑脊液中NSE、S100β蛋白、sVCAM-1和神经肽Y水平明显增高，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 重症手足口病患儿脑脊液和血清中NSE、S100β蛋白、sVCAM-1和神经肽Y水平的变化与病情轻重有关，可用于反映脑损害的程度，还可评估其预后，对患儿损伤程度小，值得临床推广。

重症手足口病；S100β蛋白；神经元烯醇化酶；可溶性血管内皮细胞黏附分子；神经肽Y

手足口病(hand-foot-mouth disease，HFMD)是我国儿童常见的急性传染病，主要是由肠道病毒(EV71和CA16)感染引起。轻症病例1周左右可自愈。部分重症病例临床进展迅速，特别是EV71感染病例，因神经系统受累及由此引起的脑干脑炎、神经源性肺水肿、肺出血等是本病致死或致残的主要原因[1-3]。寻找一种快速判断病情严重程度、指导评估预后且临床简单的检测指标，对降低重症患儿病死率和致残率有重要意义。血清和脑脊液S100β蛋白、神经元烯醇化酶、可溶性血管内皮细胞黏附分子、神经肽Y水平变化是反映神经细胞损伤的生物学标志物[4-6]。本研究观察重症手足口病患儿脑脊液和血清NSE、S100β蛋白、sVCAM-1和神经肽Y的变化，探索重症HFMD患儿早期脑损伤相关指标变化及与临床预后的关系，现介绍如下。

1 资料与方法

1．1 临床资料 根据国家卫生部颁布的《手足口病诊疗指南(2010年版)》手足口病诊断标准[1]，收集2014-04—2015-11在我院诊治的手足口病患儿90例。其中普通型30例，重症病例60例(重型40例和危重型20例)。HFMD诊断标准：(1)重型：伴神经系统受累表现，如精神差、嗜睡、易惊、谵妄；头痛、呕吐；肢体抖动，肌阵挛、眼球震颤、共济失调、眼球运动障碍；无力或急性弛缓性麻痹；惊厥；体征可见脑膜刺激征，腱反射减弱或消失。(2)危重型：危重型HMFD诊断标准：频繁抽搐、昏迷、脑疝；呼吸困难、发绀、血性泡沫痰、肺部啰音等；休克等循环功能不全表现。(3)不伴中枢神经系感染的普通型手足口患儿为对照组(30例)。所有患儿大便标本均送郑州市金水区疾病控制中心，进行肠道病毒PCR病原学检测，其中EV71阳性89例。60例重症患儿男32例，女28例，年龄6月～4岁5月，平均15.34个月。同时收集30例无中枢神经系统症状的轻型手足口病患儿，男16例，女14例，年龄8个月～4岁6个月，平均17.69个月。经我院伦理委员会审评通过，获受试家属知情同意后入组。3组患儿年龄、性别差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1．2 方法 患儿入院后24 h内空腹抽取静脉血3 mL，用肝素抗凝，并腰椎穿刺采集脑脊液2 mL。电化学发光法检测血清中S100β蛋白和NSE的含量(试剂盒购自德国罗氏诊断有限公司产品)，双抗体夹心酶联免疫吸附试验法测定血清和脑脊液SVCAM-1的含量(试剂盒购自上海拜力生物科技有限公司)，采用放射免疫分析法测定NPY的含量(试剂盒购自北京科美东雅生物技术有限公司)，所有血标本采集有固定专人进行。检验工作均由我院检验科专人严格按照说明书进行。

2 结果

重症HFMD患儿血清和脑脊液中各指标水平显著高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1、表2。危重型HFMD患儿血清和脑脊液NSE、S100-β、sVCAM-1和NPY水平明显高于重型组和对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，重型组患儿血清和脑脊液中NSE、S100-β、sVCAM-1和NPY水平较对照组增高，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表3、表4。

表1 2组血清各检测指标比较±s)

表2 2组脑脊液各检测指标比较±s)

表3 危重型和重型HFMD患儿血清各项指标比较±s)

表4 危重型和重型HFMD患儿脑脊液各项指标比较

3 讨论

手足口病(HFMD)是由肠道病毒引起的儿童常见传染病，近年发展为波及世界范围的传染病[7-8]。重症病例多为新型肠道病毒71型(EV71)感染所致，EV71具有高度噬神经性，通过逆向轴浆运输机制侵犯中枢神经系统，直接侵犯或释放炎症因子等引起神经细胞损伤，特别是脑干等部位为该病毒攻击靶点[9]。多数学者认为，神经细胞损害为HFMD发病的关键环节，脑干脑炎引起中枢性交感神经兴奋，继发神经性肺水肿、肺出血，以及心肺功能衰竭，最终导致患儿死亡，少数经抢救存活病人遗留有中枢性低通气障碍综合征、肢体瘫痪等神经系统后遗症[2-3，6，8-9]。Chang等[3]报道，手足口病并发脑干脑炎患儿的病死率为4.8%，神经系统后遗症的发生率为14.3%。目前是我国儿童致死率及致残率最高的急性传染病[1-2，8]。如何早期诊断重症手足口病合并神经损伤及损伤严重程度，减少病死率、降低致残率，是临床迫切需要解决的问题。

NSE和S100β蛋白作为神经元损伤敏感性和特异性高的生物学标记物，在多数研究中得到证实[4，10-11]。NSE主要存在于脑神经细胞核神经内分泌细胞的胞质内。正常情况下体液中的NSE含量极低，当神经细胞受损时，大量的NSE可通过受损的包膜及血脑屏障进入脑脊液和血循环中[12]。研究证实，急性脑损伤时脑脊液和血清NSE水平均显著增加，对疾病的严重程度和预后评估有重要价值[12-13]。S-100β是一种神经组织蛋白，特异性地存在于中枢神经系统和周围神经系统的神经胶质细胞中[4，14]。国外有学者认为，S-100β是迄今为止最能反映脑损伤程度的特异性蛋白，其水平越高，脑损伤程度越重，预后越差[4]。脑组织损伤后脑脊液和血清中S-100β浓度升高已经在动物实验和临床研究中得到证实，并作为脑损伤的早期诊断、动态监测病情、判断预后的有用指标[4]。本研究结果显示，重症HFMD组患儿血清和脑脊液中S100β蛋白、NSE水平显著高于对照组，重症HFMD患儿中危重型HFMD患儿血清和脑脊液中S100β蛋白、NSE浓度水平较重型HFMD组明显增高，病情越重S100β蛋白、NSE水平越高，提示血清和脑脊液中S100β蛋白、NSE可作为评估重症HFMD患儿伴神经系统损伤的指标。

可溶性血管细胞间黏附分子(sVCAM-1)是介导炎症细胞黏附、迁移的重要因子[6，15]。病毒性脑炎时，由于病毒侵入机体及脑组织，激活T淋巴细胞，活化的细胞及炎症因子的刺激，诱导内皮细胞ICAM-1的释放，从而导致血sVCAM-1增高[6，15]。本研究结果表明，重症手足口病患儿脑脊液和血清sVCAM-1显著高于对照组，增高水平与HFMD病情危重程度明显相关，与报道基本一致[6]。提示脑脊液和血清sVCAM-1水平变化可作为评估HFMD患儿神经损伤及病情严重程度的指标之一。

NPY属胰多肽家族成员，广泛存在于哺乳动物中枢和外周神经系统，是体内含量最丰富的神经肽之一[16]。近年来，不断有报道指出，在脑炎、缺血缺氧性脑病、脑出血、癫痫等脑损伤疾病研究中均发现NPY水平的增高[16-18]。赵莉等[19]发现，NPY在脑炎早期就明显增高，且NPY总体水平与颅脑损伤程度密切相关。本研究结果显示，手足口病患儿脑脊液和血清NPY显著高于对照组，随着病情加重，NPY水平明显增高。体内NPY增高是多方面共同作用的结果，病毒性脑炎急性期机体处于应激状态，交感神经-儿茶酚胺系统异常激活，导致NPY水平增高；同时，病毒感染侵犯中枢神经系统，直接或间接激活机体免疫反应，多种生物活性分子释放，对即系产生免疫性损伤、血管炎性变化、激活血小板释放NPY等；此外，脑水肿、颅高压等颅内结构变化，使体内应激性激素水平增高，进一步加重NPY水平增高[15，17-19]。

综上所述，重症手足口病患儿脑脊液及血清中S100β蛋白、NSE、sVCAM-1以及NPY变化与病情轻重相关，对判断病情有重要的临床价值。

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(收稿201-01-19)

Clinical significance of the levels of Sl00B protein，NSE，sVCAM-l and NPY in children with severe hand-foot-and-mouth disease

Wang Haijun*，Cheng Yibing，Song Chunlan，Cui Yajie，Chen Fang，Li Peng

*Children’s Hospital of Zhengzhou，Zhengzhou 450000，China

Objective To observe clinical significance of the levels of s100β protein，neuron specific enzyme (NSE)，soluble vascular endothelial cell (sVCAM-1) and neuropeptide Y (YNP-Y) in serum and cerebrospinal fluid (CSF) in children with severe hand-foot-and-mouth disease (HFMD)．Methods Sixty patients with severe HFMD were enrolled in this study and were divided into severe group (20 cases) and critical group (40 cases) according to the diagnosis criteria．At the same time thirty ordinary HFMD patients without central nervous system infection were selected as the control group．The levels of NSE and S100β protein in each group were detected by the electrochemical luminescence，the concentration of SVCAM-1 was detected by ELISA and the level of NPY was determined by the radioimmunoassay．All results were statistically analyzed by using V16．0 SPSS software．Results Compared with those in the control group，the levels of NSE，S100β，sVCAM-1 and NPY in both serum and CSF were significantly elevated in severe and critical groups．Furthermore，the critical HFMD group had the higher levels of NSE，S100β，sVCAM-1 and NPY in serum and CSF than the severe HFMD group．All the differences were statistically significant (P<0.05)．Conclusion The levels of NSE，S100β，sVCAM-1 and NPY in children with severe hand-foot-and-mouth disease may be related to the severe condition of disease and may evaluate the prognosis，which should be popularized in clinic．

Severe hand-foot-and-mouth disease；S100β protein；Neuron specific enzyme；Soluble vascular endothelial cell adhesion molecule；Neuropeptide Y

R512.5

A

1673-5110(2017)10-0029-04