蛋白芯片技术联合结核菌素试验对痰阴肺结核病快速诊断的价值研究

刘汉群

(英德市慢性病防治医院结核科，广东 英德 513000 )

目前，结核病是一种感染性疾病，且在全球内均具有威胁性。其中所有结核病患者中痰结核分枝杆菌涂片阴性肺结核患者所占比例最高[1]。临床上快速、准确诊断结核病有利于病情的及时诊断和治疗。目前，常用的临床诊断方式分别为蛋白芯片技术、PPD试验，本次我院特选取近一年来就诊痰菌涂阴性肺结核患者临床资料加以探究分析，最终结果汇报如下：

1 资料与方法

1.1 临床资料

经数字表法随机选取2014-03—2015-03间到英德市慢性病防治医院就诊痰菌涂阴性肺结核患者150例，按照随机数字表的方法分为对照组A、对照组B和观察组，每组50例。对照组A患者50例包括男27例，女23例，患者患病年龄19～68岁，平均患病年龄(45.9±6.7)岁；对照组B患者50例包括男28例，女22例，患者患病年龄20～68岁，平均患病年龄(45.8±6.9)岁；观察组50例包括男26例，女24例，患者患病年龄19～67岁，平均患病年龄(44.9±6.5)岁。两组入选的患者入选前均经患者及其家属同意，并签订《知情同意书》，上报我院医学伦理委员会获得批准，同时两组患者在临床资料方面有可比性，差异无统计学意义(P<0.05)。

1.2 方法

对照组A：所有患者使用结核蛋白芯片进行临床诊断，采取患者静脉血，然后进行血清分离处理。使用结核芯片系统以及蛋白芯片阅读仪( 生产厂家：南京大渊生物技术工程有限公司)，操作过程严格按照说明书指示进行：加入 4滴 A 试剂于芯片盒窗口内,完全浸湿膜后,室温放置 1 min ,加入待检测的血清 100 μl,完全渗入后再滴加6滴 B试剂，渗入后，再滴加10滴 C试剂，渗入后，最后再滴加6滴 D试剂 。待反应结束后 30 min 内,放置蛋白检测芯片于芯片阅读仪，加以检测分析。并按照仪器厂家的说明设置参数后对检查结果进行自动判别。使用结核生物蛋白芯片试剂盒(南京大渊生物技术工程有限责任公司提供)16kDa、38 kDa以及LAM3种特异性抗原进行检测，仍有一种抗体检测结果为阳性，则最终结果为阳性；如果3种抗体均为阴性，则最终结果判定为阴性。对照组B：所有患者临床诊断方式为PPD皮试:采用卫生部药品生物制品鉴定所生产的结核蛋白芯片诊断联合PPD试验，PPD试验即使用比例为1:2500的PPD 稀释液，在患者左前臂下 1/3掌侧位置处注入 0.1 mL，在注入后72小时之内测量局部硬结，平均直径在25mm以上则表示检查结果为阳性。观察组：联合如上两种检查方式。

1.3 观察指标

观察和比较三组检查的阳性检出率、灵敏度和特异度。

1.4 统计学方法

采用SPSS11.0软件进行统计学处理。计数资料采用例数和百分比(%)表示，组间比较采用χ2检验,以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组阳性患者疾病的阳性检出率

对照组A、对照组B和观察组阳性检出率分别为54.00%、52.00%、80.00%，观察组的阳性检出率显著高于其他两组的阳性检出率，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1：

表1 两组阳性患者疾病的阳性检出率

2.2 特异度和灵敏度的统计与比较

对照组A灵敏度为64.29%，特异度为87.50%；对照组B灵敏度为61.90%，特异度为75.00%；观察组灵敏度95.24%，特异度87.50%；观察组的灵敏度明显高于对照组A、对照组B(P<0.05)，但观察组的特异度与对照组A、对照组B相比无明显差异(P>0.05)。详见表2。

表2 三组检测特异度和灵敏度比较

注：对照组A与观察组灵敏度比较(χ2=10.620，P=0.001)，特异度比较(χ2=0.000，P=1.000)。对照组B与观察组灵敏度比较(χ2=11.949，P=0.001)，特异度比较(χ2=0.000，P=1.000)。

3 讨论

肺结核患者临床诊断的最常用的检查手段为PPD结核菌素试验，这种检测方法操作简单，是婴幼儿和青少年患者临床诊断的常用方式[2-3]。 PPD皮试检查结果为阴性表明排除了各种免疫抑制的因素外 ,患者机体没有受到结核杆菌的自然感染或者人工感染，且一般情况下能够作为确诊患者未感染结核病的诊断依据[4-6]，但是对于早期结核病患者而言，其敏感性较低。因此目前临床上一直在寻找更为敏感的检验方式,特别是对菌阴肺结核。

蛋白质芯片是最近几年内新兴的一种结核诊断方式，和基因芯片的作用相类似。蛋白质芯片的作用途径是通过将蛋白质点到固相物质上,然后和想要检测的患病组织或细胞等进行“杂交”,最后通过相关的自动化设备分析，得出最终结果[7-9]。这一技术极大地提高了结核抗体检测的灵敏度、特异性,具有简捷、速度快、大量和成本较低等检测优势。联合结核蛋白芯片和PPD皮试检测可互相补充 ,进一步提高临床诊断的敏感度,为肺结核诊断提供可靠依据。

对于肺结核病患者而言，早期诊断和治疗是十分关键的。本次研究发现，联合检验的灵敏度明显高于结核蛋白芯片检验和PPD实验，但是其特异度与两项检验单独检测无明显差异，本次探究分析结果和李丹[10]等学者探究的最终结果相一致，充分的说明了联合试验的方式更有利于痰菌涂阴性肺结核快速诊断，阳性检出率和检查的灵敏度均比较高。联合使用两种诊断方式，虽然增加了检查用时和费用，但是诊断结果的参考价值相对更高，临床诊断可靠性更高，既满足快速诊断的要求又能保证诊断结果的可靠性。

综上所述，蛋白芯片技术联合PPD试验对痰菌涂阴性肺结核快速诊断的效果非常显著，相对于单一蛋白芯片技术临床诊断的效果更为显著，应推广联合检查诊断的其临床应用范围。

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