红细胞脆性、MCV、MCH、HbA2在诊断地中海贫血中的应用

何柯新，王会敏，麦静雯，邱萍英，徐鹏，张烨梓，洪剑浩，林裕龙

（1广州医科大学附属脑科医院／广州市惠爱医院，广东 广州510370；2广州中医药大学第二附属医院／广东省中医院，广东 广州510120）

红细胞脆性、MCV、MCH、HbA2在诊断地中海贫血中的应用

何柯新1，王会敏2，麦静雯1，邱萍英1，徐鹏1，张烨梓1，洪剑浩1，林裕龙1

（1广州医科大学附属脑科医院／广州市惠爱医院，广东 广州510370；2广州中医药大学第二附属医院／广东省中医院，广东 广州510120）

目的探讨红细胞脆性、MCV、MCH、HbA2在诊断地中海贫血中的应用价值。方法采用回顾性分析的方法，分析同时进行地中海贫血筛查及基因诊断的930例患者的检查结果，并将其分为对照组、贫血组、α－地贫组和β－地贫组。结果地贫组与贫血组在MCV和MCH方面差异无统计学意义 （P＞0.05），在红细胞脆性方面差异有统计学意义 （P＜0.05）；ROC曲线下的面积中，α－地贫组中所有参数的面积均未达到90%，β－地贫组中红细胞脆性和HbA2的面积均达到90%，而MCV和MCH的面积较小；红细胞脆性、MCV、MCH、HbA2在α－地贫组中的最佳诊断截断值分别为：50.50、71.65、23.25、2.65，在β－地贫中的最佳诊断截断值分别为48.50、71.05、23.10、3.55。结论红细胞脆性、MCV、MCH、HbA2四个参数在诊断地中海贫血方面有一定的作用，多个参数综合考虑可为临床诊断地中海贫血提供更准确的参考依据。

地中海贫血；红细胞脆性；MCV；MCH；HbA2

地中海贫血是基因突变或缺失导致珠蛋白链合成障碍，进而造成α和β链比例失衡所引起的遗传性溶血性贫血［1］，在广东、广西及海南省较为常见［2］。基因诊断是目前诊断地贫的金标准，但技术要求高，费用昂贵，不适宜做常规检测方法广泛应用于临床筛查、诊断［3］。血红蛋白电泳结合红细胞参数的运用克服了这些弊端，为临床患者提供了简便快速的筛查方法。本研究收集2012年至2015年同时进行地贫筛查和地贫基因诊断的患者930例，结合红细胞相关参数进行分析，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取2012年8月到2015年12月来我院做地贫筛查同时做地贫基因的患者930例，其中男性294例，女性636例；年龄1～91岁，中位年龄31岁。

1.2 仪器BioRad Variant II血红蛋白电泳仪，日本 Sysmex XE－5000全自动血细胞分析仪，BS－800生化分析仪。

1.3 检测方法①红细胞参数测定：抽取静脉血2 mL于EDTAK2抗凝真空采血管，用XE－5000进行血常规CBC模式的检测，上机前使用XE配套质控品进行质控检测。②血红蛋白电泳：将EDTA－K2抗凝血颠倒混匀后直接放在Bio－Rad Variant II血红蛋白电泳仪上进行检测，每批试验均用厂家配套质控品做质控，严格按照操作说明进行操作。③基因检测：枸橼酸钠抗凝管采血2 mL，使用深圳亚能生物技术有限公司提供的试剂进行DNA提取和基因诊断，α－地贫采用跨越断裂点的PCR技术检测3种缺失，β－地贫采用PCR－膜反向点杂交技术检测17种基因位点突变。严格按照仪器说明书进行操作。④红细胞脆性检测：将EDTA－K2抗凝血用生理盐水配制成5%的红细胞悬液，在BS－800生化分析仪上进行红细胞脆性检测，采用武汉市长立生物有限责任公司提供的红细胞脆性测定试剂盒。

1.4 分组将所有样本分为正常对照组 （未涉及到致贫血的因素）、贫血组 （排除基因诊断为地贫患者，排除有诸如缺铁、缺乏叶酸、怀孕、肾病等因素的贫血患者）及经过基因诊断确诊的α－地贫组和β－地贫组。

1.5 统计学处理用SPSS 19.0统计软件，数据以±s表示，组间比较行多个独立样本的非参数检验，P＜0.05为差异有统计学意义；分别对红细胞脆性、MCV、MCH、HbA2做ROC曲线。

2 结果

2.1 红细胞脆性、MCV、MCH和HbA2的检测结果贫血组与地贫组的各项指标与对照组比较，差异均有统计学意义 （P＜0.05）；地贫组与贫血组在MCV和MCH方面差异无统计学意义 （P＞0.05）；在红细胞脆性方面，地贫组与贫血组差异有统计学意义 （P＜0.05），α－地贫与β－地贫组间的差异无统计学意义 （P＞0.05）；HbA2方面，贫血组与α－地贫组的差异无统计学意义，其余各组间差异均有统计学意义 （P＜0.05）。见表1。

2.2 ROC曲线下的面积ROC曲线下的面积中，α－地贫组中所有参数的面积均未达到90%；β－地贫组中红细胞脆性和HbA2的面积均达到90%，而MCV和MCH的面积较小。见表2。

2.3 红细胞脆性、MCV、MCH和HbA2的诊断截断值红细胞脆性、MCV、MCH、HbA2的在α－地贫组中的最佳诊断截断值分别为50.50、71.65、23.25、2.65，β－地贫分别为48.50、71.05、23.10、3.55，所对应的灵敏度、特异度及Youden指数见表3。

表1 红细胞脆性、MCV、MCH、HbA2的试验结果 （±s）

表1 红细胞脆性、MCV、MCH、HbA2的试验结果 （±s）

组别 n 红细胞脆性（%） MCV MCH HbA2 α－地贫组 300 44±16.6 67.8±7.4 21.3±2.8 2.3±0.4 β－地贫组 210 39±12.9 64.6±5.9 20.5±1.9 6.1±6.4贫血组 193 60±12 68.8±6.8 20.1±3.1 2.2±0.3对照组 227 73±15 85.0±9.1 28±3.9 3±1.4

表2 红细胞脆性、MCV、MCH、HbA2 ROC曲线下的面积结果

表3 红细胞脆性、MCV、MCH、HbA2的诊断截断值

3 讨论

地中海贫血是由于血红蛋白珠蛋白链合成部分或完全受抑而引起的遗传性慢性溶血性贫血，除血红蛋白成分、含量及电荷情况发生改变外，幼红细胞利用铁也发生障碍，主要是原卟啉与铁结合障碍，血象也会发生相应的变化，主要表现为小细胞低色素性贫血、MCV降低。此外，多余的珠蛋白链沉附于红细胞内表面，使红细胞膜渗透张力增加，脆性降低。据相关报道［4－6］显示，MCV、红细胞脆性及血红蛋白电泳含量检测对地贫携带者的筛查有一定价值。

从表1看出，贫血组与地贫组的各项指标与对照组比较，差异均有统计学意义，提示可通过四个参数来区分地贫及贫血患者和正常人群；MCV、MCH结合红细胞脆性可区分地贫和贫血患者；β－地贫患者的HbA2值明显高于其他组，因此HbA2含量的升高可作为诊断β－地贫的特异性指标。表2显示，红细胞脆性和MCV在诊断α－地贫时的准确性中等 （曲线下的面积 ＜90%）；而红细胞脆性和HbA2在诊断β－地贫时准确性较高，尤以HbA2为最好 （面积达到了0.997）。表3显示用ROC曲线反映灵敏度与特异性之和的Youden指数，其中HbA2≥3.55作为诊断β－地贫的指标，Youden指数最高，与冯桂玲等［7］的研究结果相似。而其他参数在诊断两种地贫中的Youden指数较低，没有很好的特异性与灵敏度。

综上所述，红细胞脆性、MCV、MCH、HbA2在诊断地中海贫血方面有一定的作用，仍要多个参数综合考虑，以便为临床诊断地中海贫血提供更准确的参考依据。

[1]刘玲,蒋玮莹,许世艳,等.广东地区地中海贫血致病基因的基因型及β珠蛋白基因多态性研究 [J].中华血液学杂志,2013,34(7): 595－599.

[2]Zheng CG,Liu M,Du J,et al.Molecular spectrum of α－and β－globin gene mutations detected in the population of Guangxi Zhuang Autonomous Region,People′s Republic of China[J].Hemoglobin,2011, 35(1):28－39.

[3]何英,张银辉,吴润香,等.红细胞平均体积、脆性以及毛细管血红蛋白电泳联合检测在产前地中海贫血诊断中的价值 [J].国际检验医学杂志,2013,34(19):2521－2523.

[4]丁高侬,郑雁坚,王治伟.MCV、MCH和RDW对孕前筛查地中海贫血的意义 [J].白求恩军医学院学报,2011,9(3):163－165.

[5]Sirichotiyakul S,Wanapirak C,Srisupundit K,et al.A comparison of the accuracy of the corpuscular fragility and mean corpuscular volume tests for the alpha－thalassemia 1 and beta－thalassemia traits[J].Int J Gynaecol Obstet,2009,107(1):26－29.

[6]Mamtani M,Jawahirani A,Das K,et al.Bias－corrected diagnostic performance of the naked eye single tube red cell osmotic fragility test (NESTROFT):An effective screening tool for β－thalassemia[J].Hematology,2006,11(4):277－286.

[7]冯桂玲,林桢,林敏,等.ROC曲线评价β地中海贫血血红蛋白A2的诊断价值 [J].实用医学杂志,2013,29(13):2187－2189.

（责任编辑：钟婷婷）

The Application of Erythrocyte Fragility,MCV,MCH and HbA2 in the Diagnosis of Thalassemia

HE Kexin1,WANG Huimin2,MAI Jingwen1,QIU Pingying1,XU Peng1,ZHANG Yezi1,HONG Jianhao1,LIN Yulong1(1The Affiliated Brain Hospital of Guangzhou Medical University/Guangzhou Huiai Hospital,Guangzhou 510370,China;2The Second Affiliated Hospital of Guangzhou University of TCM/Guangdong Provincial Hospital of TCM,Guangzhou 510120,China)

ObjectiveTo explore the clinical value of erythrocyte fragility,MCV,MCH and HbA2 in the diagnosis of thalassemia.MethodsThe examination results of930 patients with thalassemia screening and gene diagnosis in our hospital were analyzed retrospectively, and all cases were divided into control group,anemia group,alpha thalassemia group and beta thalassemia group.ResultsThere was no statistically difference in MCV and MCH between thalassemia group and anemia group,but there was a significant difference in erythrocyte fragility(P＜0.05).The areas of ROC curve did not reach 90%in alpha thalassemia group,but the areas of ROC curve reached 90%in erythrocyte fragility and HbA2 of beta thalassemia group,and the areas of ROC curve were smaller in MCV and MCH.The cutoff values were 50.50,71.65,23.25,2.65 respectively in erythrocyte fragility,MCV,MCH,HbA2 of alpha thalassemia group,and 48.50,71.05,23.10, 3.55 in beta thalassemia group.ConclusionsErythrocyte fragility,MCV,MCH and HbA2 have certain value in the diagnosis of the thalassemia,which will provide a more accurate reference for clinical diagnosis of thalassemia.

Thalassemia;Erythrocyte fragility;MCV;MCH;HbA2

R556

：A

10.3969/j.issn.1674-4659.2017.02.0181

2016－08－11

2016－10－12

广东省中医药局科研项目 “绿茶提取物靶向HIF－α的抗阿尔茨海默病Aβ生成及其机制的研究” （项目编号：20161092）

何柯新 （1982－），男，硕士研究生学历，主管技师，主要研究领域：临床生物化学与生物化学检验。