乳腺癌FDG摄取与VEGF、p53表达在淋巴结转移中的临床意义

尹 培，刘 浩，霍红旗，王海东，游志鑫，赵改花(.河北省邯郸市中心医院核医学科，河北 邯郸 05600；.河北医科大学第一医院核医学科，河北 石家庄 0500；.河北省邯郸市中心医院病案科，河北 邯郸 05600)

·论 著·

乳腺癌FDG摄取与VEGF、p53表达在淋巴结转移中的临床意义

尹 培1，刘 浩2，霍红旗1，王海东1，游志鑫1，赵改花3
(1.河北省邯郸市中心医院核医学科，河北 邯郸 056001；2.河北医科大学第一医院核医学科，河北 石家庄 050031；3.河北省邯郸市中心医院病案科，河北 邯郸 056001)

目的探讨乳腺癌脱氧葡萄糖(fluorodeoxyglucose,FDG)摄取与血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)、p53表达在淋巴结转移中的关系。方法选取经手术证实的乳腺癌患者92例，术前均进行正电子发射型计算机断层显像/CT全身检查，并记录所有肿瘤组织的最大标准化摄取值(maximal standard uptake value,SUVmax)。术后切除的乳腺癌组织均进行VEGF和p53表达检测，计算不同临床病理特征乳腺癌组织的VEGF和p53表达阳性率。分析乳腺癌FDG摄取与VEGF、p53表达在淋巴结转移中的关系。结果有淋巴结转移的乳腺癌组织中VEGF和p53的阳性表达率明显高于无淋巴结转移的乳腺癌组织(P<0.05)。有淋巴结转移的乳腺癌组织中VEGF与p53的表达有相关性(rs=0.563,P=0.000)，无淋巴结转移的乳腺癌组织中VEGF与p53的表达有相关性(rs=0.430,P=0.000)。随VEGF和p53阳性表达增强，乳腺癌组织摄取FDG的SUVmax逐渐增高(P<0.05)。在乳腺癌组织中，SUVmax与VEGF、p53表达呈正相关(rs=0.730，P=0.019，rs=0.610，P=0.035)。结论VEGF、p53表达与乳腺癌淋巴结转移有关，两者可能有协同作用，乳腺癌FDG摄取可反映淋巴结的生成及肿瘤的侵袭能力，并反映肿瘤更多的生物学特性。

乳腺肿瘤;脱氧葡萄糖;血管内皮生长因子类

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，发病率逐年上升，并呈年轻化态势增长。乳腺癌淋巴结转移为最常见的转移途径，如何准确找到有转移的淋巴结并指导其治疗，避免术后并发症尤为重要。临床常见的影像学检查方法有超声、钼靶X线和CT检查[1-2]，这些检查主要反映病灶的解剖学特征。正电子发射型计算机断层显像(positron emission computed tomography，PET)/CT全身显像是一种分子水平上的诊断技术，其最大标准化摄取值(maximal standard uptake value,SUVmax)是常用的半定量指标，能够反映肿瘤细胞的代谢活性，在乳腺癌的复发、转移和疗效预测等方面都具有重要意义[3-4]。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)可以促进血管内皮的生成，为肿瘤淋巴结转移提供途径。p53突变基因，在多数恶性肿瘤中均可检测到，一些研究发现p53与肿瘤的侵袭能力有关。目前，VEGF和p53的研究较为广泛和成熟，但在乳腺癌方面的研究尚少，且结果不一。本研究探讨乳腺癌脱氧葡萄糖(fluorodeoxyglucose,FDG)的摄取与VEGF、p53表达在淋巴结转移中的关系，以间接反映肿瘤的血管生成及侵袭状态，旨在为临床合理化诊疗提供信息依据，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2013年5月—2016年5月河北省邯郸市中心医院收治的乳腺癌患者92例，均为女性，年龄26～75岁,平均(55.65±9.88)岁，均经手术病理证实；导管癌72例，小叶癌13例，乳头状癌5例，黏液腺癌2例；有淋巴结转移68例，无淋巴结转移24例；年龄>50岁37例，≤50岁55例;肿瘤长径范围1.5～4.0 cm，其中≤2 cm 34例，>2 cm 58 例。

1.2 方法 应用荷兰飞利浦公司GEMINI TF64 PET/CT显像仪。所有患者检查前禁食6～8 h，检查当天检测空腹血糖，控制血糖<6.8 mmol/L，由手背静脉注射18F-FDG(5.0 MBq/kg)，安静休息约50 min后，上机进行PET/CT全身检查。整个扫描过程为7～9个床位，每个床位约2 min，层厚5 mm，扫描部位为颅底至股骨颈。仪器自动利用CT数据对PET图像进行衰减矫正，通过有序子集最大期望值迭代法对图像进行重建和融合。勾画感兴趣区，记录所有患者肿瘤组织的最大标准化摄取值(maximal standard uptake value,SUVmax)。

1.3 染色及评定标准 所有标本均经4%中性甲醛固定、梯度乙醇脱水、石蜡包埋、制作4 μm连续切片，采用免疫组织化学法。鼠抗人VEGF单克隆抗体、鼠抗人p53单克隆抗体及免疫组织化学试剂盒均购于北京中杉生物技术有限公司，具体操作步骤参照试剂盒说明进行。经显微镜观察，染色评定标准：VEGF表达检测以乳腺癌细胞细胞浆或包膜内出现棕黄色颗粒为阳性细胞，p53表达检测以细胞核内出现棕黄色颗粒为阳性细胞。按每个视野中计数每100个肿瘤细胞的阳性细胞数，将每视野中≤20%阳性细胞数定为表达阴性，将每视野中>20%阳性细胞数定为表达阳性。阳性表达又按照阳性细胞数所占百分率分为弱阳性(20%～40%)、阳性(>40%～60%)和强阳性(>60%)。

1.4 统计学方法 应用SPSS 19.0统计学软件进行数据分析。计量资料比较分别采用F检验和q检验；计数资料比较采用χ2检验；不同指标间相关性比较采用Spearman秩相关分析。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 不同临床特征乳腺癌组织VEGF、p53的表达 肿瘤长径≤2 cm的乳腺癌组织与肿瘤长径>2 cm的乳腺癌组织VEGF和p53阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05)。 年龄≤50岁患者的乳腺癌组织与年龄>50岁患者的乳腺癌组织VEGF和p53阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05)。有淋巴结转移的乳腺癌组织中VEGF和p53阳性表达率明显高于无淋巴结转移的乳腺癌组织,差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 不同临床特征乳腺癌组织VEGF、p53阳性表达率比较Table 1 The positive expression rates of VEGF and p53 in breast cancer tissue with different clinical features (例数，%)

2.2 乳腺癌组织VEGF与p53表达的关系 有淋巴结转移的乳腺癌组织中，VEGF阴性表达14例，弱阳性表达14例，阳性表达16例，强阳性表达24例；p53阴性表达22例，p53弱阳表达10例，阳性表达14例，强阳性表达22例。VEGF与p53表达有相关性(rs=0.563,P=0.000)。无淋巴结转移的乳腺癌组织中，VEGF阴性表达12例，弱阳性表达8例，阳性表达4例，强阳性表达0例；p53阴性表达14例，p53弱阳表达2例，阳性表达2例，强阳性表达6例。VEGF与p53表达有相关性(rs=0.430,P=0.000)。

2.3 乳腺癌组织SUVmax与VEGF、p53表达的关系 随VEGF、p53阳性表达增强，乳腺癌组织摄取FDG的SUVmax逐渐增高，差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

在乳腺癌组织中，SUVmax与VEGF表达呈正相关(rs=0.730，P=0.019),与p53表达呈正相关(rs=0.610，P=0.035)。

表2 不同VEGF、p53表达强度乳腺癌组织SUVmax比较Table 2 The relationship between the expressions of VEGF and p53 and SUVmax in breast cancer tissue ±s)

*P<0.05与阴性表达比较 #P<0.05与弱阳性表达比较

△P<0.05与阳性表达比较(q检验)

3 讨 论

VEGF又称血管内皮因子,是血管生成过程中能够促进内皮细胞有丝分裂的蛋白质，其相对分子质量为34 000 000～42 000 000，广泛存在于人体正常组织器官中，也可分布于许多肿瘤组织中。VEGF在增强血管渗透性、诱导血管发生和生成以及内皮细胞生长、促进细胞迁移、抑制细胞凋亡等方面发挥作用。VEGF家族成员包括VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D、VEGF-E、VEGF-F、胎盘生长因子[5]。VEGF受体是酪氨酸激酶受体，细胞膜是其结合位点。其中VEGF-C、VEGF-D和受体VEGFR-3主要诱导特异性淋巴管生成。VEGF在多种肿瘤组织中都呈高表达，它作为最有效的促血管生长因子之一，在癌细胞的发生、发展和转移中起着重要作用[6]。本研究结果显示，有淋巴结转移的乳腺癌组织的乳腺癌组织的VEGF阳性表达率明显高于无淋巴结转移者，差异有统计学意义。因此，VEGF高表达可能与肿瘤细胞淋巴结转移有关，可作为淋巴结转移的重要参考指标。Yang等[7]研究显示，VEGF-C和VEGF-D在食管癌组织中呈不同程度表达，其表达阳性率高于正常组织，并且在淋巴结转移组的表达均显著高于无淋巴结转移组。另有研究表明，Survivin和VEGF-C在乳腺癌组织中高度表达，两者呈正相关，Survivin的表达可能影响VEGF-C的侵袭能力，使其呈高表达,从而导致淋巴管的生成,造成乳腺癌淋巴转移[8]。Zhao等[9]研究也表明，VEGF表达与淋巴结转移有关。但Bonhin等[10]研究结论不同，结果显示喉鳞癌VEGF表达与淋巴结转移无相关性。以上研究结果不一，可能是由于VEGF基因的多态性[11]造成的。VEGF至少有30个单核苷酸多态位点，可能通过影响VEGF的转录或表达，从而影响肿瘤的发生发展和预后。不同肿瘤间甚至同一肿瘤不同部位的VEGF表达存在巨大差异，推测可能与基因多态性有关。此外，VEGF对淋巴结是否转移的不同表达可能与种族有关。在宫颈癌患者中，淋巴结转移组中的VEGF表达高于无淋巴结转移组，通过种族的亚组分析，在亚洲人种中，VEGF高表达增加宫颈癌淋巴结转移风险，而在韩国或日本人种中，VEGF高表达则不会增加淋巴结转移的风险[12]。

p53是一种肿瘤抑制基因，相对分子质量为53 000 000，它由393个氨基酸组成，具有特异的转录激活作用。在所有恶性肿瘤中，50%以上会出现该基因的突变。p53基因突变后，由于其空间构象发生改变，失去了对细胞生长、凋亡和DNA修复的调控作用，由抑癌基因转变为癌基因。本研究有淋巴结转移者乳腺癌组织p53阳性表达率高于无淋巴结转移者。何丹等[13]研究结果显示，乳腺癌淋巴结转移组中的p53蛋白阳性表达率为58.85%，无淋巴结转移组中的p53蛋白阳性表达率为30.77%，2组间p53的阳性表达率差异有统计学意义。表明p53表达可作为乳腺癌淋巴结转移潜能的判断指标之一。有研究结果则不同，伊朗患乳腺癌的库尔德妇女，其p53表达与淋巴结转移呈负相关[14]。在三阴性乳腺癌中，p53表达呈相对高表达。这可能与雌激素受体、表皮生长因子受体2的状态有直接关系。本研究结果显示，有淋巴结转移组中的p53和VEGF表达均高于非淋巴结转移组，这说明VEGF和p53均参与促进乳腺癌淋巴管生成的过程，进而导致肿瘤侵袭转移，且转移后的肿瘤细胞侵袭性可能更强、恶性程度可能更高。并且VEGF表达和p53表达在淋巴结转移前后均具有一定相关性，也提示两者在乳腺癌的发生发展中可能具有一定的协同作用。乳腺癌侵袭转移是多因素、多基因、多步骤共同作用的结果，因此，多项检测技术的联合将对疾病作出更准确的评估。

PET/CT显像是一种无创性分子影像技术，能根据功能及生物学特征来定性分析病变[15]。有研究显示，PET/CT评估乳腺癌治疗后淋巴结转移的患者中，有转移的淋巴结的SUVmax均值为8.3±3.6，良性淋巴结的SUVmax均值为4.6±1.9，2组间差异有统计学意义[16]。另有研究也表明，癌组织摄取FDG的SUVmax与淋巴结转移有关，SUVmax越高，患者发生转移的可能性越大，且SUVmax与VEGF表达呈正相关[17]。18F-FDGPET/CT显像标准化摄取值对乳腺癌的预后也有一定临床价值，有研究表明肿瘤的SUVmax越小，患者的生存期相对越长，反之，生存期则相对较短[18]。本研究中无论有无淋巴结转移，乳腺癌组织的VEGF表达与p53表达均具有相关性，说明两者在乳腺癌的发生发展中，可能起到一定的协同作用；SUVmax与VEGF、p53阳性表达强度呈正相关，随着表达强度增加，SUVmax升高，提示PET/CT显像SUVmax有可能反映肿瘤的血管生成状态，并有可能预测侵袭程度的高低，从而为临床提供更多的肿瘤生物学特性信息。

[1] 闫荟同,曹云峰,赵家慧.典型乳腺癌与不典型乳腺癌的超声图像对比分析[J].河北医科大学学报,2016,37(6):687-689.

[2] 仝淑丽,高晶磊,刘娜.钼靶X线联合螺旋CT在乳腺癌早期诊断中的临床价值[J].河北医科大学学报,2016,37(7):854-857.

[3] 王圣芳,胡旭东,王小玥,等.18F-FDGPET/CT全身显像对乳腺癌复发和转移诊断价值分析[J].中华肿瘤防治杂志,2013,20(12):945-948.

[4] 张凤春,徐海燕,许远帆,等.18F-FDG-PET/CT对复发转移性乳腺癌疗效预测价值的临床研究[J].中华肿瘤防治杂志,2016,23(5):308-312.

[5]CostacheMI,IoanaM,IordacheS,etal.VEGFexpressioninpancreaticcancerandothermalignancies:areviewoftheliterature[J].RomJInternMed,2015,53(3):199-208.

[6]KristensenTB,KnutssonML,WehlandM,etal.Anti-vascularendothelialgrowthfactortherapyinbreastcancer[J].IntJMolSci,2014,15(12):23024-23041.

[7]YangZ,WangYG,SuK.VEGF-CandVEGF-Dexpressionanditscorrelationwithlymphnodemetastasisinesophagealsquamouscellcancertissue[J].AsianPacJCancerPrev，2015,16(1):271-274.

[8]CaiX,MaS,GuM,etal.SurvivinregulatestheexpressionofVEGF-Cinlymphaticmetastasisofbreastcancer[J].DiagnPathol,2012,7:52.

[9]ZhaoR,ChangY,LiuZ,etal.Effectofvascularendothelialgrowthfactor-Cexpressiononlymphnodemetastasisinhumancholangiocarcinoma[J].OncolLett,2015,10(2):1011-1015.

[10]BonhinRG,RochaVB,CarvalhoGM,etal.Correlationbetweenvascularendothelialgrowthfactorexpressionandpresenceoflymphnodemetastasisinadvancedsquamouscellcarcinomaofthelarynx[J].BrazJOtorhinolaryngol，2015,81(1):58-62.

[11]KoutrasA,KotoulaV,FountzilasG.PrognosticandpredictiveroleofvascularendothelialgrowthfactorpolymorphismsVEGFinbreastcancer[J].Pharmacogenomics,2015,16(1):79-94.

[12]SunH,TangF,ZhouS,etal.Associationbetweenvascularendothelialgrowthfactorexpressionandlymphnodemetastasisincervicalcancer:ameta-analysis[J].JObstetGynaecolRes,2016,42(10):1310-1316.

[13] 何丹,杜娟,曾丽华,等.乳腺癌ki67、cerbB-2、p53、nm23表达与淋巴结转移的关系[J].实用临床医学,2015,16(2):9-10,16.

[14]PayandehM,SadeghiM,SadeghiE，etal.Expressionofp53breastcancerinkurdishwomeninthewestofiran:areversecorrelationwithlymphnodemetastasis[J].AsianPacJCancerPrev,2016,17(3):1261-1264.

[15] 张雪珍,张祥松.PET代谢显像在肿瘤与炎症病变鉴别诊断中的价值[J].中华核医学与分子影像杂志,2016,36(1):94-97.

[16] 张伟光,王国慧,张卫东,等.FDGPET/CT评估乳腺癌治疗后淋巴结转移的临床价值[J].中山大学学报:医学科学版,2013,34(1):135-139.

[17] 张雯杰,吴宁,王成峰,等.胰腺癌18F-FDG摄取程度与血管内皮生长因子及微血管密度的关系[J].癌症进展,2014,12(3):272-277.

[18] 徐蓉,马楠.晚期乳腺癌18F-FDGPET-CT显像标准摄取值与预后的相关性[J].医学影像学杂志,2012,22(11):1844-1845,1861.

(本文编辑：赵丽洁)

The clinical significance of FDG uptake and the expression of VEGF and p53 in breast cancer with lymph node metastasis

YIN Pei1, LIU Hao2， HUO Hong-qi1, WANG Hai-dong1, YOU Zhi-xin1, ZHAO Gai-hua3
(1.DepartmentofNuclearMedicine,theCenterHospitalofHandanCity,HebeiProvince，Handan056001,China； 2.DepartmentofNuclearMedicine，theFirstHospitalofHebeiMedicalUniversity，Shijiazhuang050031，China； 3.DepartmentofMedicalRecord，theCenterHospitalofHandanCity,HebeiProvince，Handan056001,China)

Objective To evaluate the relationship between the uptake of fluorodeoxyglucose(FDG) and the expression of vascular endothelial growth factor(VEGF) as well as p53 in breast cancer with lymph node metastasis. Methods The selected 92 cases with breast cancer had been performed positron emission computed tomography before operation,and recorded the maximal standard uptake value. The expression of VEGF or p53 of breast cancer tissue were tested after operation, and the positive expression rates of VEGF or p53were calculated. The relationship were analyzed between the uptake of FDG and the expression of VEGF and p53 in breast cancer with lymph node metastasis. Results The positive expression rates of p53 and VEGF with lymph node metastasis were obviously higher than that without lymph node metastasis in breast cancer(P<0.05). The expression of VEGF was correlated with the expression of p53 in breast cancer tissue with lymph node metastasis(rs=0.563,P=0.000). The expression of VEGF was correlated with the expression of p53 in breast cancer tissue with no lymph node metastasis(rs=0.430,P=0.000). When the positive expression of VEGF or p53 became stronger, the SUVmax values was increased gradually(P<0.05). The SUVmax value showed positive correlation with the expression of VEGF or p53 in breast cancer tissue(rs=0.730,P=0.019,rs=0.610,P=0.035). Conclusion The expressions of VEGF and p53 are associated with lymph node metastasis of breast cancer, and the SUVmax values are related to the expressions intensity of VEGF and p53. Maybe there is a synergistic effect between VEGF and p53. And the uptake of FDG maybe reflect the ability of lymph node metastasis and tumor invasion. It provides the basis for further clinical guidance for rational treatment.

breast neoplasms; deoxyglucose; vascular endothelial growth factors

2016-12-15；

2017-01-14

河北省医学科学研究重点课题(ZD20140118)

尹培(1981-)，女，河北石家庄人，河北省邯郸市中心医院主治医师，医学硕士，从事核医学研究。

R737.9

A

1007-3205(2017)04-0438-05

10.3969/j.issn.1007-3205.2017.04.016