HNP 1-3在新生儿败血症诊断中的价值

朱银燕 方妍彤 王晓芳 华春珍

HNP 1-3在新生儿败血症诊断中的价值

朱银燕 方妍彤 王晓芳 华春珍

目的 探讨人中性粒细胞多肽1-3（HNP 1-3）在新生儿败血症诊断中的价值。方法 新生儿败血症患儿105例，在入院初期（急性期）及恢复期（有效抗生素治疗10d左右）行外周血血浆HNP 1-3和超敏C-反应蛋白（hs-CRP）测定，取同期出生的新生儿30例作为对照组，一次性采血测定HNP 1-3和hs-CRP。结果 新生儿败血症急性期组血浆HNP1-3、hs-CRP水平显著高于恢复期组和对照组（P＜0.01），新生儿败血症急性期组血浆HNP1-3水平与hs-CRP水平呈中度正相关关系（r=0.450，P＜0.05）。结论 新生儿败血症患儿外周血浆HNP 1-3水平明显高于健康新生儿，与hs-CRP呈正相关，HNP 1-3对新生儿败血症早期诊断有一定的临床价值。

新生儿 败血症 HNP 1-3 hs-CRP

新生儿败血症是新生儿期最常见的疾病之一，尤其以早产儿、低体重儿和早期新生儿更为常见。新生儿败血症发病隐匿，以及临床症状不典型性，早期诊治是有效治疗的前提。血培养是新生儿败血症诊断的金标准，但阳性率低、培养费时又滞后，不利于早期诊断。人中性粒细胞多肽1-3（HNP 1-3）是中性粒细胞内嗜天青颗粒中的主要成分，起直接杀菌作用，而生理情况血浆中浓度较低，但当急性感染时可以向细胞外分泌量大幅度提高［1］。本文通过观察新生儿败血症HNP 1-3的变化，并与超敏C-反应蛋白（hs-CRP）进行比较分析，为临床早期诊断新生儿败血症提供依据。

1 临床资料

1.1 一般资料 选择2013年6月至2014年9月在杭州师范大学附属医院因败血症入院治疗的患儿105例。其中男55例，女50例；胎龄37～42周；体重2250～4000g，入院时日龄2～11d。根据患儿血培养结果和临床表现诊断新生儿败血症［2］，入选者均排除自身免疫性疾病和血液系统疾病，所有入选者入院前均未接受抗感染治疗。另选择同期在本院妇产科出生的健康新生儿30例作为对照组，其中男18例，女12例；胎龄37～42周；体重2250～4000g，入院时日龄2～11d。各组新生儿性别、胎龄、体重、日龄差异无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 材料和试剂 HNP1-3试剂盒由荷兰HycultBiotch公司提供；酶标仪为美国Molecular Devices公司产品；hs-CRP检测采用美国BECKMAN公司的全自动免疫分析仪及配套试剂。

1.3 检测方法 新生儿败血症患儿在入院初及恢复期抽取全血标本各1ml，以EDTA抗凝，静置15min后4℃低温低速离心，分离血浆200μl并分装2管，置-80℃冰箱保存待用。将-80℃保存的血浆标本室温复融并混匀，以ELISA法测定HNP1-3；以免疫比浊法测定hs-CRP，在抗生素有效治疗第10天左右的恢复期，再次同上测定血浆HNP1-3和hs-CRP。

1.4 统计学方法 采用SPSS 17.0统计软件。对不符合正态分布的计量资料，采用非参数检验，以中位数与四分位数M（P25，P75）表示。计数资料采用χ2检验，变量间的相关关系采用Pearson法作相关分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 新生儿败血症急性期组与对照组及恢复期组血浆HNP1-3、hs-CRP比较 见表1。

表1 各组HNP1-3和hs-CRP水平比较［M（P25，P75）］

2.2 急性期组外周血血浆HNP1-3水平与hs-CRP水平相关关系 急性期外周血血浆HNP1-3水平与hs-CRP水平呈中度正相关关系（r=0.450，P＜0.05）。

3 讨论

人HNP 1-3主要存在于中性粒细胞的嗜天青颗粒中，细胞内的HNP 1-3是人体天然免疫的重要组分，直接发挥抗多种细菌、病毒、真菌等病原体感染，其抗感染作用强弱与胞内HNP 1-3浓度正相关［3］。机体在正常情况下血浆中HNP 1-3含量甚微，但当急性感染时其含量大幅度增加，并可导致机体组织、细胞损伤。HNP 1-3作为一类抗菌肽，可杀伤多种病原微生物，大部分为细菌感染［4-5］。由于HNP 1-3主要从中性粒细胞中释放，标本采集后应及时分离血浆和白细胞，如果操作不当，导致白细胞破坏，都有可能导致血浆HNP 1-3水平明显升高，影响实验结果。因此采集标本后经EDTA抗凝，应及时冰浴静置和低温离心，减少破坏白细胞的目的。国外研究报道显示细菌性脑膜炎和新生儿败血症患者血浆HNP 1-3水平明显高于健康对照组［1］，Ihi等学者研究也发现感染性疾病患者的血浆HNP 1-3水平明显高于健康对照组［6］。本资料结果显示，新生儿败血症急性期组血浆HNP 1-3水平明显高于对照组，说明HNP 1-3与新生儿败血症有一定关系，提示HNP 1-3参与了机体的抗感染作用。有研究报道显示HNP 1-3可通过与抗原结合，抑制病原菌在黏膜上皮细胞粘附增值，增强病原抗原的免疫原性，促进抗原递呈细胞的递呈加工而发挥抗感染作用。本资料中新生儿败血症恢复期组HNP 1-3水平较急性期组明显下降，但仍稍高于对照组，表明随着病情的稳定好转，新生儿败血症HNP 1-3水平表达显著下降，但降至正常仍需一段时间。

hs-CRP作为CRP超敏感的检测方法，对血液中低浓度时的CRP比较敏感。本资料结果显示新生儿败血症急性期外周血血浆HNP 1-3水平与hc-CRP水平呈中度正相关关系，显示HNP 1-3可作为诊断新生儿败血症患儿的辅助指标。

综上所述，HNP 1-3可为新生儿败血症患儿早期诊断提供依据，有较高的临床价值。本研究还存在一定的局限性，收集的病例数尚少，结论仅有一定的参考价值，希望对临床有所帮助。

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［6］ Ihi T,Nakazato M,Mukae H,et al. Elevated concentrations of human neutrophil peptides in plasma,blood,and body fluids from patients with infections Clin Infect Dis,1997,25(5):1134-1140.

Objective To explore the neutrophil peptide 1-3（HNP 1-3）value in the diagnosis of neonatal sepsis. Methods Neonatal sepsis in children with 105 cases，in the early admission（acute phase）and recovery（effective antibiotics around 10 d）line of peripheral blood plasma HNP 1-3 and allergic C-reactive protein（hs-CRP），30 cases of newborns in the same period wereas control group，blood smaple were collected once for the determination of blood HNP 1-3 and hs-CRP. Results During acute phase, plasma HNP 1-3，hs-CRP level in neonataleonatal sepsis group acute phase plasma HNP 1-3，hs-CRP level is significantly higher than treatment group and control group（P＜0.01），neonatal sepsis，acute phase plasma HNP of 1-3 and hs-CRP levels in moderate positive correlation（r=0.450，P＜0.05）.Conclusions Neonat-alsepsis in children with peripheral blood plasma HNP 1-3 level is significantly higher than that of healthy newborn，positively correlated with hs-CRP，HNP 1-3 of neonatal sepsis in early diagnosis has certain clinical value.

Neonatal Sepsis Human neutrophil peptides C-reactive protein

浙江省医药卫生科技项目（2012KYA155）；杭州市卫生科技项目（H201201）

310012 杭州师范大学附属医院（朱银燕 方妍彤 王

晓芳）

310006 浙江大学附属儿童医院（华春珍）