膈下逐瘀颗粒对小鼠抗炎、镇痛作用的研究

郑跃，刘丽

(1.黑龙江中医药大学，黑龙江 哈尔滨 150040;2.黑龙江中医药大学附属第一医院，黑龙江 哈尔滨 150040)

膈下逐瘀颗粒对小鼠抗炎、镇痛作用的研究

郑跃1，刘丽2*

(1.黑龙江中医药大学，黑龙江 哈尔滨 150040;2.黑龙江中医药大学附属第一医院，黑龙江 哈尔滨 150040)

目的：考察膈下逐瘀颗粒对小鼠的抗炎、镇痛作用的影响，为临床应用及药物开发提供参考依据。方法：用二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验，计算肿胀度和肿胀抑制率。用琼脂肉芽肿致小鼠炎症实验，记录肉芽肿的重量。用热板法测定小鼠痛阈值并记录、统计、分析。用醋酸扭体法观察小鼠发生扭体反应的次数，并计算镇痛抑制率。结果：膈下逐瘀颗粒各剂量组能明显抑制二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀作用，使琼脂所致肉芽湿重减轻。膈下逐瘀颗粒各剂量组对醋酸致痛及热板致痛均有一定的抑制作用。结论：膈下逐瘀颗粒具有明显的镇痛抗炎作用。

膈下逐瘀颗粒；抗炎镇痛；耳廓肿胀;琼脂肉芽肿；热板致痛；醋酸致痛

膈下逐瘀颗粒由清代著名医家王清任的膈下逐瘀汤加减化裁而成，剂型方面由汤剂改为颗粒剂。膈下逐瘀颗粒以活血化瘀、行气止痛为治疗原则，在治疗慢性盆腔炎性疾病方面取得了显著疗效。本研究意在通过实验研究探讨膈下逐瘀颗粒的镇痛、抗炎作用，为临床应用及新药开发提供依据。

1 材料和动物

1.1 实验动物

昆明种雌性小鼠,350只,体质量范围(22±2)g,由黑龙江中医药大学实验动物中心提供,动物合格证号：小鼠SCXK黑2013-004。

1.2 仪器

AL204电子天平(梅特勒-托利多仪器上海有限公司)、恒温水浴锅。

1.3 药品与试剂

膈下逐瘀汤化裁方(牡丹皮15 g，赤芍20 g，乌药、川芎各15 g，香附20 g，枳壳15 g，元胡20 g，桃仁、鳖甲、地龙各15 g)；膈下逐瘀颗粒(由黑龙江中医药大学附属第一医院提供)；康妇炎胶囊(批号150530，山东步长神州制药有限公司，成分：蒲公英、败酱草、赤芍、薏苡仁、苍术、当归、川芎、香附、泽泻、白花蛇舌草、延胡索)。

2 实验方法

2.1 动物分组

实验设为膈下逐瘀颗粒高、中、低剂量组、膈下逐瘀汤化裁方汤剂组、康妇炎胶囊阳性药组和空白对照组。共计6组，每组10只小鼠。

2.2 供试品配制方法和给药途径方法

根据临床用量，并参照人与实验动物体表面积折算系数，分别配制不同的浓度。给药前1天配制,4℃冷藏保存,每天上午8点左右给药1次,灌胃给予。给药剂量：膈下逐瘀颗粒高剂量31.2 g/kg、膈下逐瘀颗粒中剂量15.6g/kg、膈下逐瘀颗粒低剂量7.8 g/kg、膈下逐瘀汤化裁方汤剂剂量21.5 g/kg、妇炎康胶囊阳性量0.468 g/kg。

2.3 抗炎实验

2.3.1 二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验

取6组小鼠(分组见动物分组)，分别灌胃等容量生理盐水及试药，每日1次，连续3 d，于末次给药后1 h，各组小鼠右耳廓两面均匀涂抹二甲苯(40 ml/只)，以左耳作对照。1 h后脱颈椎处死小鼠，沿耳廓基线剪下两耳，用9 mm打孔器分别在两耳对称部位打下圆形耳片，电子分析天平称质量，计算肿胀度(以每鼠左右耳片质量之差平均值来表示)和肿胀抑制率。

肿胀抑制率(%)=(对照组平均肿胀度-给药组平均肿胀度)/对照组平均肿胀度×100%

2.3.2 琼脂肉芽肿致小鼠炎症实验

取6组小鼠(分组见动物分组)，每只背部一次性皮下注射2%的琼脂溶液0.1 mL/10 g后，分别灌胃等容量生理盐水及试药，每日1次，连续5 d，末次给药1 h后，脱颈椎处死，剪开其背部，自皮下将琼脂连同周围结缔组织一起取出，剔除脂肪组织，用分析天平称重，并记录肉芽肿的重量。

2.4 镇痛实验

2.4.1 热板法

当水温为(55±0.5)℃时，以小鼠第一次添后足的时间作为痛阈值，以此作为指标挑选痛阈值在5～30 s内的雌性昆明种小鼠60只，按体质量随机分为6组，分别灌胃等容量生理盐水及试药，每日1次，连续3 d，于末次用药1 h，进行实验。给药前，于热板仪上重复测取两次正常痛阈值作为该组给药前痛阈值。给药后1 h用温水擦拭干净，开始测小鼠痛阈值，之后每隔半个小时测定各小鼠痛阈值。记下小鼠给药前后痛阈值，进行统计分析。

2.4.2 醋酸扭体法

取6组小鼠(分组见动物分组)，分别灌胃等容量生理盐水及试药，每日1次，连续3 d，于末次给药后0.5 h，给小鼠腹腔注射0.2 mL 2%冰醋酸，观察15 min内每只小鼠发生扭体反应的次数，并计算镇痛抑制率。

扭体抑制率(%)=(对照组平均扭体次数-给药组平均扭体次数)/对照组平均扭体次数×100%

2.5 统计方法

3 实验结果

3.1 抗炎实验结果

3.1.1 膈下逐瘀颗粒对二甲苯诱导小鼠耳廓肿胀的影响

膈下逐瘀颗粒各剂量组均能明显抑制二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀作用，与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结果见表1。

表1 膈下逐瘀颗粒对二甲苯诱导小鼠耳廓肿胀的影响

注：与空白组比较，*P<0.05，**P<0.01

3.1.2 膈下逐瘀颗粒对琼脂肉芽肿致小鼠炎症的影响

空白组小鼠肉芽增生明显，阳性对照药组、膈下逐瘀颗粒各剂量组和汤剂组的小鼠肉芽湿重均减轻。膈下逐瘀颗粒各剂量组与模型组差异均有统计学意义(P<0.01) 。结果见表2。

表2 膈下逐瘀颗粒对琼脂肉芽肿致小鼠炎症的影响

注：与空白组比较，*P<0.05，**P<0.01

3.2 镇痛实验结果

3.2.1 膈下逐瘀颗粒对热板刺激小鼠痛阈值的影响

表3表明，给药后60min膈下逐瘀颗粒高、中剂量组、汤剂组镇痛作用明显增强，与空白对照组比较，具有显著性差异。

表3 膈下逐瘀颗粒对热板刺激小鼠痛阈值的影响

注：与空白组比较，*P<0.05，**P<0.01

3.2.2 膈下逐瘀颗粒对醋酸所致小鼠扭体反应的影响

表4表明，膈下逐瘀颗粒高、中、低剂量组及汤剂组扭体次数均显著低于空白对照组(P<0.01)，可明显抑制醋酸所致小鼠扭体反应。说明膈下逐瘀颗粒对外周神经性疼痛的镇痛效果更强。

表4 膈下逐瘀颗粒对醋酸所致小鼠扭体反应的影响

注：与空白组比较，*P<0.05，**P<0.01

采用热板实验和醋酸扭体实验分别考察膈下逐瘀颗粒对外周神经性疼痛的作用以及中枢神经性疼痛产生的作用。

4 讨论

实验结果表明，膈下逐瘀颗粒各剂量组能明显抑制二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀作用，使琼脂所致肉芽湿重减轻，对热板致痛及醋酸致痛均有抑制作用。说明膈下逐瘀颗粒具有明显的抗炎、镇痛作用。

纵观全方，膈下逐瘀颗粒药物组成为牡丹皮、赤芍、乌药、川芎、香附、枳壳、元胡、桃仁、鳖甲和地龙。在王清任膈下逐瘀汤的基础上减去五灵脂、当归、红花、甘草，同时加入鳖甲、地龙,既保留了活血祛瘀、行气止痛的功效，又增加了软坚散结的作用。其中牡丹皮清热凉血活血化瘀;赤芍能“通顺血脉，缓中，散恶血，逐贼血”;川芎活血养血，行血中之气;香附乃血中气药，血气方中所必用之药能逐瘀调经，又能引血药至气分而生血;枳壳、元胡、乌药行气止痛;桃仁破癥瘕，通月水，止痛;鳖甲、地龙行气活血软坚散结,全方活血化瘀、理气止痛。

现代药理研究发现赤芍[1]具有抗炎镇痛、抗炎、抗凝血、抗血栓的作用;川芎[2]可降低血粘度，改善血流变，还具有一定的抗菌作用;桃仁[3]具有抗凝血、抗血栓形成作用，可改善血液流变学，还具有抗炎、抗菌、镇痛作用;牡丹皮[4]具有镇静、抗炎、抗菌、抗早孕、抗血小板聚集作用，可明显改善血流变;枳壳[5-6]能兴奋子宫，收缩子宫平滑肌，可治疗子宫脱垂、产后腹胀以及气虚所致的崩漏、带下，还具有镇痛作用;乌药[7]具有抗病毒、抑菌、抗炎镇痛、调节凝血功能等药理作用。这与我们得出的膈下逐瘀颗粒具有抗炎、镇痛作用是一致的。

由于中药复方药味繁多、成分复杂，除了单味中药的单一成分起作用，多种药物在联合后可能产生拮抗、抑制作用，或者新的疗效作用，因此期待膈下逐瘀颗粒的研究进一步深化。

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[2] 裴艳霞.川芎的药理作用及临床应用[J].中国医药指南，2011，9(34)：197-198.

[3] 颜永刚，雷国莲，刘静，等.中药桃仁的研究概况[J].时珍国医国药，2011，22(9)：2262-2264.

[4] 李媛媛，郑艳，黄军祥，等.牡丹皮的综合利用现状与产业发展分析[J].现代中药研究与实践，2012，26(4)：83-84.

[5] 章斌，金剑，金芝贵，等.枳壳的药理作用与临床应用进展[J].医药导报，2013，32(11)：1462-1464.

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2016-10-29

2016-12-29

哈尔滨市科学技术局面上项目(2014RFXG071)；黑龙江省整理、传承老中医药专家学术思想课题(CZ14-07)；黑龙江省哲学社会科学规划办公室一般项目(13B059)

郑跃(1985-)，女，主治医师，博士研究生,主要研究方向:中医妇科。

*通讯作者：刘丽(1966-)女，主任医师，主要研究方向:中医妇科。

R285.5

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1002-2392(2017)01-0028-03