鳞状上皮细胞癌抗原在高危型HPV感染人群宫颈病变分流诊治中的应用

冯阳春，张园，刘诚明，黄艳春

(新疆医科大学附属肿瘤医院 1.检验科，2.肿瘤防治研究所，新疆 乌鲁木齐 830011)



·论 著·

鳞状上皮细胞癌抗原在高危型HPV感染人群宫颈病变分流诊治中的应用

冯阳春1，张园2，刘诚明1，黄艳春1

(新疆医科大学附属肿瘤医院 1.检验科，2.肿瘤防治研究所，新疆 乌鲁木齐 830011)

目的:探讨鳞状上皮细胞癌抗原(SCC)在高危型HPV(HR- HPV)感染人群宫颈病变分流诊治中的应用价值。方法:采用回顾性研究的方法收集1 039例妇科门诊就诊者的SCC、薄层液基细胞学检查(TCT)和HR- HPV检查的结果资料，对资料进行统计学分析。结果:HR- HPV感染者SCC含量和HPV- DNA负荷量呈正相关(rs=0.802，P=0.012)，SCC含量及阳性率随宫颈细胞病变的加深而增加。HR- HPV感染者中，TCT阳性人群SCC含量[(3.8±0.9) ng·ml-1]与阴性人群SCC含量[(1.0±0.3) ng·ml-1]差异有统计学意义(t=8.022，P<0.001)，SCC阳性率分别是4.35%和68.97%，差异有统计学意义(χ2=103.681，P<0.001)。SCC诊断细胞学阳性的灵敏度为68.79%，特异度为95.65%，阳性预测值为94.12%，阴性预测值为75.34%。对于HR- HPV感染者，SCC阳性患者存在细胞学病变的可能性是SCC阴性者的48.889倍。结论:SCC可以为HR- HPV阳性而细胞学阴性的就诊者的分流诊治提供参考意见。

高危型； 人乳头状瘤病毒； 鳞状上皮细胞癌抗原； 宫颈病变

人类乳头状瘤病毒(human papilloma virus，HPV)是一种嗜上皮细胞的病毒，感染HPV可以导致机体内各种鳞状上皮来源的组织增生[1- 3]。鳞状上皮细胞癌抗原(squamous cell carcinoma antigen，SCC)广泛分布在鳞状上皮中，当鳞状细胞恶性增生时，血清中SCC的含量就会升高[4]。宫颈癌是由于高危型HPV(high risk HPV，HR- HPV)持续感染导致的宫颈上皮细胞增生永生化[5]，90%～95%的宫颈癌是鳞状细胞癌，因此SCC作为一种常用宫颈病变的肿瘤标志物进行临床检测[6]。HR- HPV感染妇女的进一步分流诊治是目前宫颈癌筛查体系中的难点，因此研究HR- HPV感染人群中SCC和宫颈脱落细胞病变之间的关系，对妇科门诊就诊人群关于宫颈病变的分流诊治具有一定的临床意义。

1 资料与方法

1.1 标本来源

收集2011年7月2日至2014年7月31日在新疆医科大学附属肿瘤医院妇科门诊首次就诊妇女的一般资料，通过医院LIS系统从检验科和细胞室得到其初次就诊时SCC、HR- HPV- DNA和薄层液基细胞学(TCT)的结果，排除TCT结果为腺癌的患者。共收集到符合要求的就诊者资料1 039例，年龄18～71岁，中位年龄47岁。

1.2 实验方法

HR- HPV检测采用美国Digene Corporation生产的Digene HPV Test试剂盒及相关仪器(GeneAmp PCR System 9700等)进行，其原理是二代杂交捕获法。SCC检测由雅培Abbot i2000全自动微粒子化学发光分析仪及原装试剂盒进行。HPV和SCC的检测均严格按照检验科项目SOP文件进行。SCC的参考值范围是0～1.5 ng·ml-1，若检验结果大于参考值上限，则认为SCC检测阳性。二代杂交捕获法测定值用RLU Value(相对光单位值)/Cutoff Value(阈值)的值表示，即代表了HR- HPV- DNA在机体内的负荷量，以RLU值大于1.0作为HR- HPV感染阳性。TCT检测结果采用宫颈细胞学诊断的TBS分级系统，即正常范围(WNL)、意义不明的不典型鳞状上皮细胞(ASCUS)、低度鳞状上皮内病变(LSIL)、高度鳞状上皮内病变(HSIL)和鳞状细胞癌(SCC)，TCT阳性诊断包括ASCUS及以上病变。

1.3 统计学处理

2 结 果

2.1 一般结果

1 039例样本资料中，共有HR-HPV感染阳性者231例，阳性率为22.91%，SCC阳性者107例，阳性率为10.39%，TCT结果阳性者127例，阳性率为12.22%。

2.2 HR- HPV感染者HPV病毒负荷量和SCC的相关性

在HR-HPV阳性人群中，SCC含量[(1.4±0.5)ng·ml-1]比HR-HPV阴性人群[(1.0±0.4)ng·ml-1]高，差异有统计学意义(t=6.224，P<0.001)。由于HPV-DNA定量呈偏态分布，故用中位数(M)和四分位间距(Q)表示，分别是5.78和42.37。经Spearman相关分析，SCC和HPV-DNA负荷量呈正相关(rs=0.802，P=0.012)。

2.3 不同宫颈病变组HPV负荷量和SCC的关系

根据TCT结果将1 039例病例分成4组：阴性组912例；低度病变组61例，包括鳞状上皮异常、低度鳞状上皮内病变；中度病变组40例，包括高度鳞状上皮内病变；高度病变组26例，包括鳞状细胞癌。各组HPV-DNA负荷量及SCC结果分析见表1。经方差分析，HPV-DNA含量在4组间差异有统计学意义(F=631.265，P<0.001)，经DunnettT3两两比较分析，任意两组间差异均有统计学意义(P<0.001)。SCC含量在4组间差异有统计学意义(F=50.625，P<0.001)，经DunnettT3两两比较分析，任意两组间差异均有统计学意义(P<0.001)。SCC阳性率在4组间差异有统计学意义(χ2=471.324，P<0.001)。

表1 不同宫颈病变组HPV- DNA和SCC变化比较

Tab 1 The difference of HPV- DNA and SCC in different cervical lesion groups

组 别nHPV-DNA含量阳性率/%SCC含量/ng·ml-1阳性率/%阴性组9120.68±0.2212.70.9±0.33.5%低度病变组618.79±2.8291.82.1±0.547.54中度病变组4053.82±8.911004.2±1.970.00高度病变组26662.84±245.2210010.7±3.596.15

2.4 HR- HPV感染人群中SCC和TCT检查结果相关性

在231例HR- HPV感染患者中，未出现细胞学病变的为115例，比较这部分人群和HR- HPV阳性TCT阳性患者SCC的表达情况,结果见表2。

表2 不同HR- HPV感染阳性人群中SCC的表达情况

Tab 2 The expression of SCC in HPV+TCT-and HPV+TCT+populations

组 别nSCC含量/ng·ml-1阳性率/%HPV+TCT-1151.0±0.34.35HPV+TCT+1163.8±0.968.97t值/χ2值8.022103.681P值<0.001<0.001

SCC诊断细胞学阳性的灵密度为68.79%，而特异度为95.65%，阳性预测值为94.12%，阴性预测值为75.34%。SCC检出阳性者相比于SCC阴性者，诊断宫颈细胞病变的OR值为48.889，95%的CI为18.372～130.099，说明对于HR- HPV感染阳性者，SCC阳性者存在细胞学病变的可能性是SCC阴性者的48.889倍。见表3。

3 讨 论

Harald在20世纪80年代已经证明HR- HPV感染是引起宫颈病变的高危因素，最近研究证明持续HR- HPV感染更是和宫颈上皮细胞的形态学改变密切相关，因此对妇女人群进行宫颈病变筛查时HPV的检测已经纳入筛查体系。目前临床应用最广泛的是HPV检测结合TCT检查对妇科门诊就诊妇女人群进行宫颈病变的筛查[7- 8]。SCC是常用的鳞状细胞癌肿瘤标志物，相比于宫颈鳞癌其它的常用肿瘤标志物具有更好的辅助诊断意义[9- 10]。本研究结果显示妇科门诊就诊人群中HR- HPV感染阳性和HR- HPV阴性者SCC含量存在明显差异，HR- HPV人群中SCC和HPV- DNA负荷量呈正相关(rs=0.802)，说明HR- HPV感染确实会对SCC的含量产生影响，因此SCC对HR- HPV感染妇科就诊人群的宫颈细胞病变具有一定的诊断价值。

表3 SCC在HR- HPV阳性人群中和TCT检查结果的关系 例

Tab 3 The relation of SCC and TCT in HR- HPV infected population cases

对127例TCT阳性者即宫颈细胞存在病变者进行分组，然后分别统计各组中HR- HPV和SCC的含量和阳性率，发现随着宫颈细胞病变程度的加深，HR- HPV的DNA负荷量呈明显增加趋势，说明HR- HPV感染的严重程度确实和宫颈细胞的病变存在密切相关性，而且几乎所有存在宫颈细胞病变的就诊者均存在HR- HPV的感染，证明了HR- HPV感染是宫颈细胞发生病变的一个重要条件，符合以前的报道[11]。而对于SCC，同样存在含量和阳性率随着宫颈细胞病变加深而增加的趋势，同样符合以前的报道[12]。但是由于SCC作为血清肿瘤标志物的一种，和宫颈病变的关系并不像HR- HPV那样密切，因此在低度和中度病变组，SCC同样存在一定的阴性病例。综上所述，在HR- HPV人群中，SCC和HR- HPV的病毒负荷量具有很好的相关性，且血清中浓度随宫颈病变的加深而增加，可以作为宫颈病变的辅助诊断指标，对于可疑的宫颈病变者，SCC阳性可进一步提示诊断宫颈病变。

由于HR- HPV结合TCT组合是目前常用的筛查组合[13- 14]，对于HR- HPV阳性，而TCT阴性的就诊者进行进一步的分流诊治是常见的难题。临床经常把HR- HPV阳性就诊者看作可疑的宫颈病变者，因此研究HPV+TCT-和HPV+TCT+两组人群中SCC的表达情况十分有意义，本研究发现在这两组人群中，SCC的含量和阳性率都存在明显差异。进一步的研究发现，SCC对于HR- HPV阳性人群中宫颈病变的诊断具有较好的特异性，特异度达95.65%，而何聚莲等[15]报道显示，SCC作为肿瘤标志物诊断HPV感染人群宫颈癌的特异度为99.44%。本研究同时发现SCC阳性者存在细胞学病变的可能性是SCC阴性者的48.889倍，说明可以通过对HPV+TCT-人群进行进一步的SCC检测，如果出现阳性，则可认为就诊者存在两种可能，第一种可能是目前的细胞学检查可能存在假阴性，提示医生需要对就诊者进行细胞学复查或者进一步有创检查；第二种可能是提示就诊者在未来会有很大可能出现宫颈细胞病变，这就要求就诊者缩短细胞学检查的随访间隔，做到早期发现将来可能出现的病变。而如果SCC在正常范围时或者在一个很低水平时，则可适当放宽就诊者未来随访的时间间隔，起到减少就诊者经济负担的作用。

本研究HR- HPV感染者仅有231例，样本量较少，其次，本研究是应用目前实验室SCC检测的参考值范围作为判断SCC的阳性界点，下一步应该通过对SCC的结果进行更加详细的研究，争取利用受试者特征曲线等方法得到SCC的能够对HPV+TCT-人群分流诊治更具指导意义的临界值。

[1] XI R，ZHANG X，CHEN X，et al.Human papillomavirus 16 infection predicts poor outcome in patients with esophageal squamous cell carcinoma[J].Onco Targets Ther，2015，8(3):573- 581．

[2] SCHETTINO M T，AMMATURO F P，GRIMALDI E，et al.Persistent papillomavirus type- 31 and type- 45 infections predict the progression to squamous intraepithelial lesion[J].Taiwan J Obstet Gynecol，2014，53(4):494- 497.

[3] 王森钰，热娜·米吉提，冯阳春，等.新疆地区汉族女性人乳头状瘤病毒基因型及感染情况分析[J].东南大学学报:医学版，2015，34(6):902- 905．

[4] 李卫鹏，张蕾蕾.鳞状细胞癌抗原研究进展[J].放射免疫学杂志，2010，23(1):34- 37．

[5] LI C，MA C，ZHANG W，et al.The immune function differences and high- risk human papillomavirus infection in the progress of cervical cancer[J].Eur J Gynaecol Oncol，2014，35(5):557- 561．

[6] 陈军莹，姚德生.宫颈癌血清肿瘤标志物临床应用概况[J].医学综述，2015(19):3501- 3504．

[7] FENG Y C，YANG J，LIU C M，et al.DNA ploidy of cervical epithelial cells should be a cure criterion of high- risk HPV infection in Xinjiang Uygur women[J].Onco Targets Ther，2015，8:827- 833．

[8] 吴立芳.宫颈癌医院机会筛查结果分析[J].现代医学，2015，34(4):442- 445．

[9] DASARI S，WUDAYAGIRI R，VALLURU L.Cervical cancer:Biomarkers for diagnosis and treatment[J].Clin Chim Acta，2015，445:7- 11．

[10] 王静，郑群，余素飞，等.Logistic回归联合分类树CHAID法建立SCC在宫颈癌中的辅助诊断模型[J].中华检验医学杂志，2015，38(11):761- 764．

[11] 冯阳春，张园，黄艳春.高危型人乳头状瘤病毒负荷量对宫颈上皮细胞DNA倍体的影响[J].中国病原生物学，2012，7(1):5- 7．

[12] 倪凤慧，俞春松.HPV感染各类宫颈疾病肿瘤标志物检测的临床价值[J].放射免疫学杂志，2013，26(5):703- 704．

[13] 胡静熠，吴江平.TCT与HR- HPV联合检测对宫颈癌筛查的意义[J].江苏医药，2012，38(24):2988- 2990．

[14] 徐兴云，赵蔚，李桂军，等.细胞学联合人乳头瘤病毒杂交捕获检测在宫颈上皮内瘤样病变筛查中应用[J].中华医学杂志，2012，92(35):2503- 2505．

[15] 何聚莲，唐盈，林佩萱，等.HPV感染者血清鳞状上皮癌抗原检测的临床意义[J].国际医药卫生导报，2013，19(19):2945- 2948．

Clinical significance of SCC to shunt screening cervical lesions in HR- HPV infected women

FENG Yang- chun1，ZHANG Yuan2，LIU Cheng- ming1，HUANG Yan- chun1

(1.ClinicalLaboratoryCenter，2.InstituteofCancerResearch，TumorHospitalAffiliatedtoXinjiangMedicalUniversity，Urumqi830011，China)

Objective： To evaluate the value of squamous cell carcinoma antigen(SCC)for shunting screening the cervical lesions in high- risk type HPV(HR- HPV)infected women. Methods: SCC， cytology(TCT)， and HR- HPV examination results in 1 039 cases of outpatient from gynaecology department by retrospective study were collected， then the data was statistical analyzed. Results: There was correlation between SCC content and HPV DNA load in HR- HPV infected women(rs=0.802，P=0.012). The SCC content and positive rate increased along with the deepening of cervical cell lesions. In HR- HPV infected women， SCC content between TCT positive[(3.8±0.9) ng·ml-1]and negative women[(1.0±0.3) ng·ml-1]had statistical difference(t=8.022，P<0.001)， the positive rate were 4.35% and 68.97%， respectively， also had statistical difference(χ2=103.681，P<0.001). The sensitivity was 68.79%， specificity was 95.65%， positive predictive value was 94.12%， negative predictive value was 75.34%， to diagnose cytology lesion with SCC in HR- HPV infection women. It was 48.889 times to detect cytology lesion in SCC positive than SCC negative women. Conclusion: SCC can provide the reference opinion in further diagnosis for the women which had HR- HPV infection but cytology normal．

high- risk； human papilloma virus； squamous cell carcinoma antigen； cervical lesions

2016- 05- 14

2016- 09- 01

新疆维吾尔自治区自然科学基金资助项目(2015211C133)

冯阳春(1987-)，男，河南平舆人，主管技师，医学硕士。E- mail:paopao1987123@163.com

黄艳春 E- mail:huangyanchun0619@sohu.com

冯阳春，张园，刘诚明,等.鳞状上皮细胞癌抗原在高危型HPV感染人群宫颈病变分流诊治中的应用[J].东南大学学报:医学版,2016,35(6)：989- 992.

R711.74

A

1671- 6264(2016)06- 0989- 04

10.3969/j.issn.1671- 6264.2016.06．033