刺梨、金樱子、红子种子油抗氧化活性研究

陈青

(贵州大学化学与化工学院化学系，贵州 贵阳550025)

刺梨、金樱子、红子种子油抗氧化活性研究

陈青

(贵州大学化学与化工学院化学系，贵州 贵阳550025)

目的 对刺梨、金樱子及红子种子油进行抗氧化活性研究。方法 利用索氏提取器及超声提取法，以石油醚(60～90 ℃)为提取溶剂对刺梨、金樱子及红子种子油进行提取，采用DPPH法对种子油的抗氧化活性进行测定。结果 刺梨、金樱子及红子种子油对DPPH自由基的清除率具有量效关系，均对DPPH有显著清除作用；采用两种提取方法获得的种子油清除率大小顺序均为红子<刺梨<金樱子；超声提取获得的种子油清除率小于索氏提取获得的种子油。结论 索氏提取获得的金樱子种子油抗氧化活性最高。

刺梨； 金樱子； 红子； 抗氧化活性

刺梨、金樱子及红子果、叶和花都有一定药效。刺梨果实味酸、涩，性平，用于治疗消化不良，肠炎，痢疾、胃痛、胃溃疡等疾病[1]；红子果实入药可健脾消积、活血止血，叶、根入药可清热解毒、收敛止泻、治疮疡[2]；金樱子果实味酸、甘，性平，用于治疗肾虚尿频，带下，脾虚泄泻、子宫脱落等疾病[3]。据文献[4-6]报道，刺梨、金樱子及红子的果实富含维生素(特别是维生素C)以及氨基酸、 微量元素等几十种营养成分；它们的种子油富含亚油酸等不饱和脂肪酸，具有较高的食用和药用保健作用。此外，还从三种植物中分离出鞣质、黄酮、皂苷、多糖和萜类等多种化合物，具有抗氧化、免疫调节和预防肿瘤等作用[7]。目前对刺梨、金樱子及红子种子油的研究主在化学成分和提取工艺的优化基础上，种子油的抗氧化活性报道很少。鉴于此，笔者采用DPPH法对刺梨、金樱子及红子种子油的抗氧化活性进行测定，以期为三种资源开发利用提供一定的理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料 仪器：SL-202型电子天平(上海长桥精密科学仪器有限公司)数控超声波清洗器(浙江托普仪器有限公司)，DZF型真空干燥器 (北京科伟永兴仪器有限公司)，旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)，800离心机(上海浦东物理光学仪器厂)，UV-2000型紫外可见分光光度计(上海尤尼柯仪器有限公司)。二苯代苦味酰基自由基(1,1-pheny-2-picrylhydrazyl，DPPH，上海阿拉丁试剂有限公司，分析纯)、95%乙醇、甲醇、石油醚(沸点60～90 ℃)、正己烷、乙醚、丙酮、苯、氢氧化钠均为分析纯。

1.2 实验方法 (1)种子油的提取：准确称取刺梨、金樱子及红子种子各10 g于索氏提取器中，加入石油醚(60～90 ℃)100 mL,液料比为1∶10(W∶V)，提取时间为3 h，80～85 ℃进行提取，结束后真空抽滤，用旋转蒸发仪回收溶剂。将提取物放入干燥箱，真空干燥至恒重，得到种子油。按下列公式：提取率=提取籽油质量/种子质量×100%，计算种子得油率。实验重复三次，刺梨、金樱子及红子种子平均得油率分别为：5.3%、4.9%及6.1%。准确称取10 g种子于圆底烧瓶中，加入石油醚(60～90 ℃)50 mL，液料比为1∶10(W∶V)，超声温度为35 ℃，超声时间为60 min，超声功率为120 w，进行超声提取。超声结束后减压抽滤，用旋转蒸发仪回收溶剂至较小体积。将提取物放入真空干燥箱，真空干燥至恒重，得到种子油。按下列公式：提取率=提取籽油质量/种子质量×100%，计算种子得油率。实验重复三次，刺梨、金樱子、红子种子平均得油率分别为：6.3%、4.5%、6.1%。(2)种子油抗氧化活性测定： DPPH是一种稳定的有机自由基，其溶液具有特征的紫红色团吸收峰，当存在自由基清除剂时，由于与其单电子配对而使其吸收逐渐消失，其褪色程度与其所接受的电子数成定量关系，因而可用分光法进行定量分析。准确称取0.0025 g DPPH，用体积分数为95%的乙醇溶解并定容于100 mL容量瓶中，DPPH浓度为0.25 mg/mL，避光保存(0～4 ℃)。 参考文献[8-9]方法，将质量浓度为114 mg/mL的索氏提取器提取的刺梨种子油用体积分数95%的乙醇溶剂溶解，然后将溶液稀释成不同浓度梯度，作为待测样品溶液。在试管中依次加入0.25 mg/mL DPPH的乙醇溶液2 mL，种子油溶剂2 mL，混匀后反应20 min，3 500 r/min 离心5 min后取上清液，于515 nm波长测定吸光度，记为Ai；0.25 mg/mL DPPH的乙醇溶液2 mL和2 mL无水乙醇混合测定吸光度， 记为Aj；2 mL刺梨种子油和2 mL计算无水乙醇溶剂混合测定吸光度，记为A0；注意测定时都要选无水乙醇溶剂作为参比液。利用下面公式计算清除率(也叫抑制率)：清除率Y%= [1- ( Ai-Aj/ A0)]×100。公式中引入Aj是为了消除添加物的颜色干扰。再将此浓度溶液稀释成一系列浓度，同上操作，得出各个浓度下的抑制率，利用系列溶液的抑制率绘制曲线，由曲线读取DPPH自由基清除率为50%时所需刺梨种子油溶液浓度，计为IC50，以IC50值表示种子油清除DPPH自由基能力，IC50值越小，表示清除能力越强。其它种子油样品(包括超声法提取的种子油)实验操作与刺梨种子油一样。

2 结果与讨论

按上述试验条件，随着种子油浓度的增加，清除DPPH 自由基的能力均呈上升趋势，清除率与种子油的浓度成量效关系。其中，采用超声提取法提取得到的种子油，清除率在一定浓度下都能达到90 %以上；采用索氏提取得到的种子油，清除率在一定浓度下都能达到80 %左右。因此，三种种子油对DPPH自由基均具有较强的清除能力。对样品进行清除DPPH活性的测定，DPPH随种子油的浓度变化关系图。见图1及图2。

图1 索氏提取刺梨、金樱子、红子种子油DPPH 清除率 图2 超声提取刺梨、金樱子、红子种子油DPPH 清除率

由以上实验数据可计算出刺梨、金樱子、红子种子油各自的IC50值，见表1。

表1 刺梨、金樱子、红子种子油的IC50值

由表1可以看出，种子油的不同提取方式对其IC50值有很大影响。无论是刺梨、金樱子还是红子种子，采用两种提取方法获得的同一种子油，它们的IC50数值不同，索式提取的种子油IC50值比超声提取的种子油IC50值小。表现获得的种子油，索式提取的种子油清除DPPH自由基能力更强。对于以上三种种子，采用同一提取方式得到的种子油，其IC50数值大小顺序均为红子>刺梨>金樱子，因此，三种种子清除率大小顺序为红子<刺梨<金樱子。综合提取方法和抗氧化测定结果，采用索式提取法提取的金樱子种子油抗氧化活性最强。刺梨、金樱子以及红子种子油中都含有较高比例的不饱和脂肪酸如亚油酸、亚麻酸等，这可能是三种种子油具有较好抗氧化活性的主要原因。不同提取方法获得的种子油在抗氧化方面表现出较大的差异，说明提取方法与其生物学效能密切相关。在今后的研究工作中，有必要对不同提取方法得到的种子油化学组成以及其中含有的抗氧化物质进行深入研究。

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Study on the antioxidant activities in the seed oil of Rosa roxburghii Tratt and Rosa Laevigata and pyracantha fortuneana

ChenQing.

DepartmentofChemistry,SchoolofChemistryandChemicalEngineering,GuizhouUniversity,Guiyang550025,China

Objective To conduct the study the antioxidant activities of the seed oil from Rosa roxburghii Tratt, Rosa Laevigata and pyracantha fortuneana. Methods The seed oil was extracted by using Soxhlet & ultrasonic extraction, and petroleum ether (60 ～ 90℃) as solvent, antioxidant activity was determined by means of DPPH. Results Three seed oils showed obvious antioxidant effect and dose-effect relationship. The free radical scavenging abilities of three seed oils showed the range of pyracantha fortuneana < Rosa roxburghii Tratt < Rosa Laevigata and the antioxidant activity of oil extracted by Soxhlet was higher than that of ultrasonic. Conclusion The seed oil of pyracantha fortuneana extracted by Soxhlet extractor method showed the most outstanding antioxidant activity than the other two.

Rosa roxburghii Tratt； Rosa Laevigata Michx； Pyracantha fortuneana Maxim

社会发展科技攻关计划项目[黔科合SY字(2011)3086]

R914；TS225; TQ646

A

1000-744X(2016)06-0587-02

2016-04-25)