规模猪场肥猪伪狂犬病毒感染的血清学诊断与分析

王 锐，方 超，柴强强，李润成

（湖南农业大学动物医学院，湖南长沙410128）

规模猪场肥猪伪狂犬病毒感染的血清学诊断与分析

王 锐，方 超，柴强强，李润成※

（湖南农业大学动物医学院，湖南长沙410128）

文章对湖南衡阳某规模猪场肥猪表现疑似伪狂犬病毒感染的病例进行了血清学诊断。采集了不同临床表现猪群的血清，进行伪狂犬病毒野毒（gE）抗体检测。结果显示：4份出现发病症状1～2天的猪血清gE抗体检测为阴性，8份出现发病症状4～6天的猪血清中5份gE抗体检测为阳性，3份为可疑。另有4份发病并康复的猪血清和4份同群未发病的猪血清gE抗体检测均为阳性。通过采取针对伪狂犬病毒的紧急措施将该猪场疫情控制在发病流行初期，减少了猪场损失，为血清学方法在伪狂犬病毒疫情诊断中的运用提供了参考数据。

肥猪；伪狂犬病毒；猪伪狂犬病；血清学诊断

猪伪狂犬病（Pseudorabies，PR）是由伪狂犬病毒（PRV）感染引起的猪场常见传染病，猪和鼠是PRV的主要宿主和传染源，可通过消化道、生殖道、皮肤黏膜以及飞沫、母乳等接触传播[1]。PRV感染能导致新生仔猪发热、脑脊髓炎症状和急性死亡，生长猪、育肥猪呼吸道症状，种猪繁殖障碍[2,3]，其临床症状与感染猪只的年龄阶段、感染途径、感染毒株的毒力和猪只免疫水平等相关[4]。该病常呈隐形感染，感染猪体可长期带毒和排毒，在养殖密度较大的地区多发，给养殖业造成了巨大的损失。目前，通过疫苗免疫和gE抗体检测逐步淘汰阳性猪只，是净化猪场或局部地区PR的常用和有效手段，因此对猪群的PRV免疫和感染情况进行正确判断具有重要的意义[5,6]。

1 临床症状

2015年4月，湖南衡阳某约400头母猪的规模猪场的肥猪栏舍中，有10多头肥猪表现体温升高（41℃左右），体表发红，精神沉郁，不同程度的呼吸症状，伴有打喷嚏、厌食等。畜主最初怀疑为猪丹毒，对发病猪使用青霉素治疗未见好转，后怀疑为附红细胞体病，用磺胺类药物配合多西环素治疗，也未见好转。发病猪在出现明显临床症状后4～6天，有逐渐康复的迹象，但在猪群中也存在疫病逐步蔓延的情况。

2 血清伪狂犬病毒gE抗体检测

根据猪群发病表现及畜主反映，怀疑存在伪狂犬病毒感染的可能，从4头出现发病症状1～2天的生猪（血清编号1～4）、8头出现发病症状1～2天的生猪（血清编号5～12）、4头发病康复的生猪（血清编号13～16）、4头与发病猪同群但临床表现正常的生猪（血清编号17～20）采集血液并标号，用IDEXX公司生产的ELISA试剂盒检测伪狂犬病毒gE抗体。结果见表1、图1。由表1和图1可见，刚发病的生猪伪狂犬病毒gE抗体均为阴性，发病后5～6天的生猪伪狂犬病毒gE抗体均处于阴性与阳性的临界值附近，部分个体已转为阳性，而发病康复猪伪狂犬gE抗体在临界值附近，但均已变为阳性，同群临床表现正常猪均已存在较高gE抗体水平。

表1 伪狂犬病毒g E抗体检测结果

图1 不同来源血清伪狂犬病毒g E抗体检测结果

3 分析与讨论

当前,规模猪场普遍使用的伪狂犬病毒疫苗为gE基因缺失疫苗，免疫后生猪不会产生针对gE蛋白的抗体，所以通过检测生猪是否存在gE蛋白的抗体可判定生猪近期内是否有感染过伪狂犬病毒野毒[7,8]。

根据该猪场发病猪临床症状及不同类型生猪血清gE抗体检测结果，基本可以确定该场的病猪为PRV野毒感染。同时、建议猪场立即隔离临床发病生猪，给哺乳仔猪进行全群滴鼻普免伪狂犬疫苗，保育猪、肥猪、后备母猪肌肉注射一次伪狂犬疫苗，所有种猪在配种前再加强免疫1次。基本控制了的疫病的进一步蔓延。此外，本文还对该次病例进行了蓝耳、流感病毒的检测，结果均为阴性。因此可以确定该次猪场发病主要由伪狂犬病毒感染引起。

通过血清学检测不同临床表现生猪血清gE抗体对于临床上伪狂犬病毒的诊断具备方便快捷的优势，尤其是针对当前往往是肥猪首先感染发病的流行特点而言[9]，可以快速的锁定病原，采取针对性的紧急防制措施，这对于控制疫病的大范围影响具有很重要的作用。采集刚发病、发病有5～6天、发病康复、同群正常猪的血液，目的是针对生猪伪狂犬病毒感染后抗体产生的规律而言，刚发病的生猪一般抗体尚未升起、而发病有5～6天的生猪群应该正处于抗体刚产生的阶段，康复猪则应该已变为抗体阳性，至于同群正常猪则要么尚未感染，处于抗体阴性阶段、要么在很早一段时间已经感染，只是当时没有表现出明显的临床发病症状（伪狂犬病毒感染大猪、在饲养管理和季节气候好的情况下，不一定会表现出明显的临床症状）[10]，抗体水平已上升到较高的水平。结果如果符合预期的规律则可以诊断正在发病的猪群存在PRC野毒感染。因此，临床上gE抗体检测配合gB抗体检测对于鉴别诊断猪群是否感染PRV野毒具有一定的优势。

PR的净化主要是通过使用PRV-gE基因缺失疫苗与gE-ELISA抗体鉴别检测来进行的。在欧美等国家和地区，已经应用该方法成功控制或净化了该病。猪场应通过对猪群抗体水平定期监测，适时补免PRV基因工程疫苗和相应的鉴别诊断ELISA检测，逐步淘汰感染猪，扩大健康猪群从而完成进行PR的净化，与此同时还要加强其他疫病特别是猪瘟、蓝耳病、猪圆环病等免疫抑制性疫病的免疫和监测[6,10]。

除上述防制措施以外，养殖场还应该加强饲养管理，减少应激因素，提高猪群的免疫水平，保持环境卫生，严格定期消毒，做好驱鼠灭鼠工作，慎重对待外来引种等等[8-10]。严格做好上述的防制措施，一定能控制直至净化根除PRV感染的流行和爆发。

参考文献:

[1]ZIMMERMAN J J,KARRIKER L,RAMIREZ A.Diseases of Swine(10th)[Z].Ames:Iowa State University Press,2012.

[2]SCHMIDT J,GERDTSV,BEYER J,et al.Glycoprotein D-independent infectivity of pseudorabies virus results in an alteration of in vivo host range and correlates with mutations in glycoproteins B and H[J].JVirol,2001,75(21):10054-10064.

[3]DONG B,ZARLENGA D S,REN X.An overview of live attenuated recombinant pseudorabies viruses for use as novel vaccines[J].J Immunol Res,2014,2014:824630.

[4]VERPOESTS,CAY A B,DEREGGEN.Molecular characterization of Belgian pseudorabies virus isolates from domestic swine and wild boar[J].Vete Microbiol,2014,172(1):72-77.

[5]王科文，杨汉春.我国重点养猪区域伪狂犬病野毒感染血清学调查报告[J].养猪.2010(2):45-47.

[6]杨雯慧，闫文朝，吴志明，等.河南省猪伪狂犬病血清学调查与分析[J].河南农业科学,2015,(9):108-111.

[7]SERENA M S,METZG E,CORVA SG,et al.A differential ELISA based on recombinantimmunodominantepitopesof thegE geneofSHV-1 in abaculovirus-insectcellsystem to discriminate between pigs infected naturallywith pseudorabiesand vaccinated pigs[J].JVirolMethods,2011,171(2):388-393.

[8]占永祥，姜礼辉.规模化猪场猪伪狂犬病毒野毒感染的血清学调查[J].中国动物保健,2015(5):47-49.

[9]施佳露.当前猪伪狂犬病的流行状况及防控对策[J].中国动物保健,2015,(5):27-28.

[10]康文彪，宋建国，周峰，等.甘肃省规模化猪场伪狂犬病的血清学调查与防控建议[J].国外畜牧学(猪与禽),2015,(11): 50-52.

S855.3

A

1006-4907（2016）02-0022-03

10.3969/j.issn.1006-4907.2016.02.011

2016-02-18

※通讯作者：李润成。