胃癌组织中MAT1及MCM2表达的临床病理意义

王艳华 付华珍 傅爱荣



胃癌组织中MAT1及MCM2表达的临床病理意义

王艳华 付华珍 傅爱荣

目的 探讨胃癌组织中相关基因1(MAT1)以及微小染色体维持蛋白2(MCM2)的表达及其临床意义。方法 选取95例胃癌患者，采用免疫组化法检测所有患者癌组织以及癌旁组织MAT1、MCM2的表达情况，分析胃癌组织表达中MAT1、MCM2与患者各临床指标的相关性。结果 ①胃癌组织表达MAT1、MCM2的阳性率显著高于癌旁组织，差异有统计学意义(P<0.05)。②MAT1表达与年龄、性别、体质指数、肿瘤分化程度无显著相关性(P>0.05)，与浸润深度、淋巴结转移、远处转移有显著相关性(P<0.05)。③MCM2表达与年龄、性别、体质指数、远处转移无显著相关性(P>0.05)，与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移有显著相关性(P<0.05)。结论 胃癌组织中MAT1、MCM2表达与其临床指标密切相关，从而进一步影响患者的预后。

胃癌；转移相关基因1；微小染色体维持蛋白2

(ThePracticalJournalofCancer,2016,31:1770～1772)

胃癌是目前临床上最常见的消化系统恶性肿瘤之一，其发生是1个多阶段、进行性的过程，但是该过程中的具体机制尚未完全明确，因此胃癌发生、发展的分子机制一直以来就是胃癌肿瘤学研究的重要方向[1-2]。本研究即旨在探讨胃癌组织表达转移相关基因1(MAT1)以及微小染色体维持蛋白2(MCM2)的临床病理意义，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 研究对象

选取2012年9月至2015年11月江西省肿瘤医院收治的95例胃癌患者作为研究对象，所有患者均经病理组织学检查确诊，且既往未接受针对胃癌的任何治疗，其中男性63例，女性32例；年龄27～65岁，平均(59.3±14.2)岁；体质指数22.4～29.7 kg/m2，平均(24.6±4.3)kg/m2；分化程度：低分化21例、中分化29例、高分化45例；浸润深度：T1～T2 30例、T3～T4 65例；淋巴结转移：阴性56例、阳性39例；远处转移：阴性77例、阳性18例。

1.2 MAT1与MCM2检测方法

采用免疫组化法检测胃癌组织以及癌旁组织中MAT1、MCM2的表达情况，癌旁组织为距离手术切缘5 cm以上的正常胃黏膜。方法如下：①将石蜡切片60 ℃烘烤30 min，二甲苯(Ⅰ)脱蜡15 min，二甲苯(Ⅱ)脱蜡15 min。无水乙醇(Ⅱ)5 min，无水乙醇(Ⅰ)5 min，95%乙醇5 min，85%乙醇5 min，75%乙醇5 min，磷酸盐缓冲液(PBS)洗涤3次，5 min/次。②在电热手提式压力蒸汽灭菌器中用柠檬酸抗原修复液进行抗原修复，当有蒸汽冒出2 min后，取出冷却。PBS洗涤3次，5 min/次。③去除多余液体，置于湿盒，滴加3%过氧化氢去离子水，孵育10 min。PBS洗涤3次，5 min/次。④去除多余液体，置于湿盒，滴加羊血清工作液，孵育15 min。⑤滴加50 μl一抗稀释液，稀释剂为PBS，稀释比例为1∶100，4 ℃冰箱过夜。恢复室温1 h，PBS洗涤3次，5 min/次。⑥置于湿盒，滴加生物素化二抗工作液，孵育15 min。PBS洗涤3次，5 min/次。⑦置于湿盒，滴加辣根过氧化物酶(HRP)标记链霉素液，孵育15 min。PBS洗涤3次，5 min/次。⑧置于湿盒，滴加二氨基联苯胺(DAB)显色剂50 μl，当细胞质呈棕黄色时将切片浸入自来水中终止显色，流水冲洗5 min。⑨苏木精复染1 min，流水冲洗5 min。1%盐酸乙醇分化1～2 s，流水洗涤20 min。⑩75%乙醇脱水3 min，95%乙醇脱水3 min。无水乙醇(Ⅰ)脱水3 min，无水乙醇(Ⅱ)脱水3 min，二甲苯(Ⅰ)透明10 min，二甲苯(Ⅱ)透明10 min，中性树胶封片。 镜下观察结果。

1.3 结果判断

由2名病理医生进行结果判断，在400倍显微镜下观察10个视野，每个视野计数100个肿瘤细胞。染色阳性细胞数评分：阳性肿瘤细胞百分率>50%为3分，25%～50%为2分，5%～25%为1分，<5%为0分。染色强度评分：深棕色为3分，黄棕色为2分，淡黄色为1分，未着色为0分。计算染色阳性细胞数评分与染色强度评分的乘积，2～9分为阳性，0～1分为阴性。

1.4 统计学分析

2 结果

2.1 胃癌组织以及癌旁组织中MAT1与MCM2表达阳性率的比较

胃癌组织MAT1、MCM2表达阳性率显著高于癌旁组织，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 胃癌组织以及癌旁组织中MAT1与MCM2表达阳性率的比较(例，%)

2.2 MAT1表达与胃癌临床病理特征的相关性分析

MAT1表达与年龄、性别、体质指数、肿瘤分化程度无显著相关性(P>0.05)，与浸润深度、淋巴结转移、远处转移有显著相关性(P<0.05)，见表2。

表2 MAT1表达与胃癌临床指标的相关性分析/例

2.3 胃癌组织MCM2表达与其临床指标的相关性分析

MCM2表达与年龄、性别、体质指数、远处转移无显著相关性(P>0.05)，与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移有显著相关性(P<0.05)，见表3。

表3 胃癌组织MCM2表达与其临床指标的相关性分析/例

3 讨论

胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一。与其他大多数恶性肿瘤一样，胃癌发病较隐匿，很多胃癌患者在确诊时已经是为进展期，此时已经丧失了最佳的手术治疗机会[3]，因此胃癌常给患者身心健康带来巨大威胁。值得注意的是，胃癌的发生、发展涉及多个因素的参与，其中的分子机制成为当前胃癌肿瘤学研究的重要课题。

MTA1是Pencil等在1993年应用相差杂交技术在鼠乳腺癌细胞株中分离出来的1个新的乳腺癌转移相关基因，Toh等在1994年测定该基因的核苷酸序列以及蛋白产物的氨基酸序列，并将其命名为MTA1。目前有关MTA1与恶性肿瘤的研究较多。侯二文等[4]报道，膀胱癌组织MTA1表达水平显著高于癌旁组织，且MTA1表达与淋巴结转移、淋巴管浸润等指标密切相关，从而进一步影响患者的预后。秦晓宁等[5]报道，胃癌组织表达MTA1蛋白与肿瘤的浸润深度、TNM分期、淋巴结转移密切相关，但是与肿瘤分化程度未见明显相关性。原甜甜等[6]报道，沉默MTA1表达可抑制胃癌细胞株SGC7901的迁移、侵袭能力，但是并不影响胃癌细胞株SGC7901增殖，MTA1在胃癌侵袭、转移过程中可能发挥重要作用。

MCM2是微小染色体维持蛋白家族中的一员。在正常组织以及某些反应性组织中，MCM2仅仅表达于正常增殖的细胞区域，但是在不典型增生组织、恶性肿瘤组织中，MCM2则表达于大多数细胞并且可以延伸到上皮全层[7]，因此MCM2比其他增殖标记蛋白能够更好地区分正常组织与不典型增生组织。目前MCM2检测已经应用于多种类型恶性肿瘤。栗东海等[8]报道，乳腺癌组织MCM2表达阳性率显著高于乳腺纤维腺瘤，且MCM2表达与肿瘤直径、组织学分级、临床分期、腋窝淋巴结转移相关。杨春等[9]报道，胃癌组织表达MCM2与患者年龄、浸润深度、淋巴结转移有显著相关性，但是与肿瘤大小、肿瘤位置、远处转移、UICC分期无显著相关性。

在本研究中，初步结果分析显示胃癌组织MAT1、MCM2表达阳性率显著高于癌旁组织，这与目前其他临床报道均一致。进一步结果分析MAT1、MCM2表达与患者临床指标的相关性，结果显示MAT1表达与年龄、性别、体质指数、肿瘤分化程度无显著相关性，与浸润深度、淋巴结转移、远处转移有显著相关性，MCM2表达年龄、性别、体质指数、远处转移无显著相关性，与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移有显著相关性。上述结果与既往研究有一定区别，如MCM2表达与远处转移的相关性，潘峥等[10]认为胃癌组织表达MCM2与患者是否发生肝转移密切相关。分析两者差异的原因，可能是试剂盒质量、样本量等因素影响所致，因此其具体关系有待进一步研究。总之，胃癌组织表达MAT1、MCM2与患者某些临床指标有着密切的关系，检测MAT1、MCM2表达对预测胃癌患者预后有一定的临床应用价值。

[1] 葛艳丽，张俊杰，王志荣，等.胃癌组织中血管内皮生长因子C的表达及其临床意义〔J〕.实用癌症杂志，2015，30(2)：159-161.

[2] 刘贵长，李 辉，钟宝元，等.CCR2在胃癌中的表达及其对胃癌细胞侵袭转移能力的影响〔J〕.江西医药，2014，45(12)：1429-1431.

[3] 王 琳，陈俊民，邢雪花，等.进展期胃癌ERCC1表达与含铂方案化疗疗效相关性Meta分析〔J〕.中华肿瘤防治杂志，2015，22(6)：467-473.

[4] 侯二文，王 禾，马建军，等.MTA1在膀胱癌的表达及其与预后的相关性〔J〕.现代泌尿外科杂志，2014，19(4)：263-266，276.

[5] 秦晓宁，阎庆辉，王凤安，等.MTA1和VEGF-C在胃癌中的表达及临床意义〔D〕.石家庄：河北医科大学，2013.

[6] 原甜甜，衣艳梅，李济伟，等.沉默MTA1表达对胃癌SGC7901细胞增殖和侵袭能力的影响〔J〕.现代肿瘤医学，2015，23(14)：1944-1947.

[7] 栗东海.微小染色体维持蛋白2在肿瘤中的研究现状〔J〕.医学综述，2010，16(19)：2945-2947.

[8] 栗东海，刘 明.存活素、微小染色体维持蛋白2在乳腺癌中的表达及其临床意义〔J〕.中华乳腺病杂志(电子版)，2013，7(4)：15-18.

[9] 杨 春，谢小亮，施 磊，等.微小染色体维持蛋白2在胃癌中的表达及预后意义〔J〕.宁夏医学杂志，2013，35(8)：680-682.

[10] 潘 峥，陈 军，覃冠德，等.MCM2和Rb蛋白在胃癌中的表达及临床意义〔J〕.现代肿瘤医学，2010，18(8)：1595-1597.

(编辑：吴小红)

Clinical Pathological Significance of Expression of MAT1 and MCM2 in Gastric Carcinoma Tissues

WANGYanhua,FUHuazhen,FUAirong.

JiangxiCancerHospital,Nanchang,330029

Objective To investigate the clinical pathological significance of expression of metastasis-associated gene1(MAT1) and minichromosome maintenance protein2(MCM2) in gastric carcinoma tissues.Methods 95 cases of patients with gastric carcinoma were selected as the objects of study,and expression of MAT1 and MCM2 in gastric carcinoma tissues and carcinoma adjacent tissues of all patients were detected by imunohistochemistry method,then the correlation between expression of MAT1 and MCM2 in gastric carcinoma tissues and clinical indexes in patients with gastric carcinoma were analyzed.Results ①The positive rates of expression of MAT1 and MCM2 in gastric carcinoma tissues were obviously higher than those in carcinoma adjacent tissues,respectively(P<0.05).②There were no significant correlations between expression of MAT1 and age,sex,body mass index and tumor differentiation(P>0.05),while expression of MAT1 was significantly correlated with depth of invasion,lymph node metastasis and distant metastasis(P<0.05).③There were no significant correlations between expression of MCM2 and age,sex，body mass index and distant metastasis(P>0.05),while expression of the MCM2 was significantly correlated with tumor differentiation,depth of invasion and lymph node metastasis (P<0.05).Results The expression of MAT1 and MCM2 in gastric carcinoma are closely related to clinical indexes,which can influence the prognosis of patients with gastric cancer.

Gastric carcinoma；Metastasis-associated gene1(MAT1) ；Minichromosome maintenance protein2(MCM2)

330029 江西省肿瘤医院(王艳华，傅爱荣)；336400 上高县中医院 (付华珍)

傅爱荣

10.3969/j.issn.1001-5930.2016.11.009

R735.2

A

1001-5930(2016)11-1770-03

2016-04-21

2016-06-12)