流化床包衣法制备银耳多糖肠溶微粒

李红月，肖旭朗，王海洋，张洪贺，徐多多，王明星，高其品，高　阳

(长春中医药大学 吉林省中药大分子重点实验室，长春 130117)



流化床包衣法制备银耳多糖肠溶微粒

李红月，肖旭朗，王海洋，张洪贺，徐多多，王明星，高其品，高阳*

(长春中医药大学 吉林省中药大分子重点实验室，长春 130117)

目的考察并优化流化床包衣法制备银耳多糖肠溶微粒(ETPP)工艺条件。方法以Eudragit L30-D55水分散体为包衣材料，柠檬酸三乙酯为增塑剂，滑石粉为抗黏剂，同时考察包衣后微粒的累计释放度，制备直径小于190 μm肠溶微粒。结果载药量为40.62%，包封率为79.29%，酸中累计释放度小于10%，碱液中累计释放度大于75%,制备的微粒其平均粒径在115～190 μm之间，圆整度、堆密度、总收率均较理想。结论应用流化床包衣法制备ETPP，其工艺简便，稳定可行，适合小鼠药物药理学和毒理学研究的需要和大工业生产。

银耳多糖；银耳多糖肠溶微粒；流化床包衣法

银耳(Tremella fuciform Berk)是真菌类植物，其主要化学成分为多糖类化合物，具有提高机体免疫力等作用。但是该多糖口服不被吸收，基本无活性;静脉给药虽具有良好的作用，但其结构十分复杂，纯化困难，难以进行静脉给药的新药研发[1]。因此，如何提高其生物利用度，是该类药物研发面临的瓶颈问题。提高糖类药物的生物利用度，首先要克服胃酸对其水解所造成的破坏。对药物以肠溶材料保护是常用的方法。但是该方法制备的制剂因粒径大(>40目)[2-6]，难以对小动物口服给药，造成实验难以进行。因此，研究制备粒径小的肠溶微粒(球)，为药效学、药代动力学研究提供可行的样品，是提高糖类药物生物利用度研究面临的首要问题。笔者以银耳多糖为样品,采用挤出滚圆制粒机制备银耳多糖微粒[7]和流化床包衣机将微粒包衣，最终制备了粒径小、分布均匀、包衣效果好、载药量较高的ETPP。

1　仪器与试药

Mini流化床制粒包衣机(深圳信宜特科技)；空气压缩机(上海捷豹压缩机制造有限公司)；紫外分光光度计(上海菁华科技仪器有限公司)；标准分样筛(北京海地清科技术服务仪器责任有限公司)；电子天平(福州华志科学仪器有限公司);恒温磁力搅拌器(江苏省金坛市荣华仪器制造有限公司);柠檬酸三乙酯(东京化成工业株式会社)；恒温恒湿振荡器(太仓市试验设备厂)；银耳多糖微粒(本实验室自制)；肠溶包衣液(Eudragit L30-D55上海昌为医药辅料科技有限公司),银耳多糖微粒(平均粒径115～190 μm之间，本实验室自制)。

2　方法与结果

2.1微粒流化床包衣工艺研究

2.1.1银耳多糖微粒制备对银耳多糖微粒处方和工艺进行考察，确定其制备工艺为：载药量为65%，稀释剂为65%乙醇溶液，MCC为主要辅料，挤出速度为50 r/min，滚圆速度为1 500 r/min，滚圆时间为10 min，制备的微粒其平均粒径在115～190 μm之间，以上制备的银耳微粒进行下一步包衣[8]。

2.1.2微粒包衣工艺及处方1)微粒包衣工艺：选用流化床包衣机进行包衣[9-14]，以Eudragit L30D-55水分散体为肠溶包衣材料[15]，包衣厚度以含药微丸增重计。取银耳多糖微粒置于包衣机内包衣。包衣工艺条件为喷液流速为2.5 mL/min，喷气压力为0.2 MPa，流化温度为33 ℃，鼓风流量为100 L/min，进风温度为50.5 ℃，物料温度为33.5 ℃。2)微粒包衣处方：依据银耳多糖性质和查阅相关文献[16]，选择包衣液的基本处方为：Eudragit L30D-55、柠檬酸三乙酯、滑石粉、氢氧化钠水溶液和蒸馏水。包衣液配制方法如下：Eudragit L30D-55和滑石粉分别过100目药筛，然后将Eudragit L30D-55、柠檬酸三乙酯、氢氧化钠水溶液和蒸馏水混匀，包衣过程中根据微粒引起静电程度，选择加入定量的滑石粉。制备肠溶微粒置40 ℃烘箱中老化24 h。

2.1.3包衣微粒的体外释放度实验1)银耳多糖检测波长的确定： 称取适量银耳多糖冻干粉、MCC和L30D-55分别用摸拟肠液溶解，于190～800 nm内进行紫外扫描。在波长276 nm处银耳多糖有最大吸收，MCC和L30D-55无干扰，故选择检测波长为276 nm。2)模拟胃液和模拟肠液释放试验：按紫外分光光度法《中国药典》：1部附录IVA(2010)，在276 nm波长处测定吸光度，计算出肠溶微粒释放度。模拟胃液作溶液的为释放度Ⅰ，模拟肠液作溶液的为释放度Ⅱ。

2.1.4银耳多糖肠溶微粒释放度考察1)标准曲线绘制 ：①模拟肠液标准曲线为:Y=7.001 4X+0.003 8 ，r=0.999 6，在0～0.1 mg/mL浓度范围内线性良好；②同法，模拟肠液标准曲线为：Y=8.248 6X+0.009 6，r=0.996 6，在0～0.1 mg/mL浓度范围内线性良好。2)包衣增重考察：基于本实验室中药微粒包衣经验，本实验分别考察40%、50%和60%包衣增重，依据 微粒包衣处方分别包衣，以0.1 mol/L盐酸溶液和0.2 mol/L NaH2PO4溶液为溶剂，考察不同的ETPP酸中累计释放度Ⅰ%、缓冲液中累计释放度Ⅱ%。结果显示，ETPP增重为40%、50%时,酸中累计释放度大于10%，而60%包衣增重的ETPP酸中累计释放度小于10%，同时碱中累计释放度大于75%，符合药典对肠溶制剂要求。故包衣增重为60%。结果显示，ETPP增重为40%、50%时,酸中累计释放度大于10%，而60%包衣增重的ETPP酸中累计释放度小于10%，同时碱中累计释放度大于75%，符合药典对肠溶制剂要求。故包衣增重为60%。

2.1.5释放度验证试验将制备80-120目银耳多糖微粒，以包衣增重60%的L30D-55包衣材料流化床底喷包衣(包衣液流速3.0 r/min)，3批平行制备ETPP(批号分别为20141211、20141212、20141213)。制得的3批ETPP进行粉体学性质和体外释放度性能评价，结果见表1。

表1　ETPP工艺和处方验证试验结果

由表1可见，流化床包衣法制备的微粒圆整度适宜，堆密度大，休止角合格，可用于释放度的测定。

依据包衣最佳工艺，制备3批产品，分别测定其释放度，酸中释放度平均值为9.04%，碱中释放度平均值为77.65%，同时计算3批样品平均包封率，其包封率为79.29%，证明包衣工艺合理。

3　小结

本课题使用底喷式流化床包衣，制得ETPP质量更稳定，衣膜更均匀，释放更均匀。流化床包衣后也可以掩盖药物的不良味道和减少药物刺激性。

流化床包衣法制备ETPP圆整度、粒径和均匀度均较好，可较好满足以小动物进行的药效学和药代动力学研究要求，同时制备工艺简单易行，在将来的新剂型研究中也有良好的应用前景。

[1]包全英,周震,平其能.盐酸缓释微丸的制备及释放度研究[J].中国药科大学学报,2008,39(2):127-131.

[2]朱澄云,车鑫,董丽娜,等.盐酸普萘洛尔微球的制备及性能考察[J].中国药剂学杂志,2013,11(2)：11-25.

[3]罗晓健,张国松,黄锋荣,等.流化床制备芪仙汤微丸的工艺研究[J].中国中药杂志,2009,34(6)：690-693.

[4]朱莉,沈岚,冯怡,等.挤出滚圆-流化床法制备麦冬皂苷肠溶微丸[J].中成药,2012,33(2):349-352.

[5]冯怡,沈岚,徐德生,等.麦冬皂苷让融微球的载药量和包封率研究[J].中成药,2004,26(8):611-613.

[6]赵国巍,廖正根,陈绪龙,等.喷雾干燥法制备三七皂苷缓释微球[J].华西药学杂志,2010,25(6):676-678.

[7]李红月,张洪贺,王海洋,等.低温挤出滚圆法制备银耳多糖微粒[J].长春中医药大学学报,2016,32(1):34-36.

[8]瞿慧,杨秀珍.流化床制粒法制备淀粉类空白丸芯的工艺研究[J].现代中药研究与实践,2013,27(5):46.

[9]李葆林,王娇.流化床包衣技术在药物制剂中的应用现状[J].河北医科大学学报,2015,36(9):1114-1116.

[10]方瑜,向柏,潘振华,等.流化床包衣法制备甘草酸二铵结肠定位微囊[J].中国医院药学杂志,2012,32(3):197-200.

[11]董佳丽,黄震.泮托拉唑钠肠溶微丸胶囊的制备[J].上海医药,2014,35(21):74-77.

[12]周欣,张晶,王娟,等.奥美拉唑肠溶微丸胶囊的制备[J].解放军药学学报,2012,28(1):32.

[13]廖恒锋,张翰铭,李梦楚,等.挤出滚圆-流化床包衣法制备雷贝拉唑钠肠溶微丸[J].中国药房,2016,27(4):514-517.

[14]陈丽华,徐德生.流化床包衣法制备芍药总苷缓释微丸的研究[J].中草药,2009,40(3):379.

[15]白靖,王静.药用丙烯酸树脂在制剂中的应用进展[J]中国药房,2011,22(17):1613-1616.

[16]王爱明,杨磊,张晓岭,等.pH依赖型阿莫西林多重脉冲微丸的制备[J].医药导报,2013,32(3):387-389.

Preparation of enteric soluble microparticles of polysaccharide Tremella fuciform by fluid-bed coating method

LI Hongyue,XIAO Xulang,WANG Haiyang,ZHANG Honghe,XU Duoduo,WANG Mingxing,GAO Qipin,GAO Yang*

(Chinese Medicine Macromolecules Laboratory of Jilin Province,Changchun University of Chinese Medicine,Changchun 130117,China

ObjectiveTo review and optimize the process conditions of Enteric soluble microparticles of the polysaccharide from Tremella fuciform Berk(Tremella polysaccharide) by fluid-bed coating method.MethodsWith Eudragit L30 - D55 as coating material,triethyl citrate as plasticizer,talcum powder as the antisticking agent,the release of the inspection after the coating particles respectively in degrees,preparation of diameter of less than 190 μm particles.Results40.62% drug loading.The encapsulation efficiency is 79.29%,and the cumulative release of acid is less than 10%,the cumulative release of lye is greater than 75%.Preparation of particles of the average particle size is between 115 μm to 190 μm,its roundness,bulk density,in vitro release and total yield are ideal.ConclusionThe methods of fluidized bed coating to prepare the enteric soluble microparticles of polysaccharides are simple,stable and feasible,and the methods are suitable for preparing the sample for the functional research of enteric administration with mouse and for industrial production.

Tremella polysaccharide;Tremella polysaccharide enteric particles;fluid-bed coating method

10.13463/j.cnki.cczyy.2016.05.014

吉林省重点科技攻关项目(20140204026YY)。

李红月(1990-)，女，硕士研究生，主要从事糖类化合物构效关系。

高阳，电话-13644410003，电子信箱-756287045@qq.com

R284.1

A

2095-6258(2016)05-0919-03

2016-03-07)