白疕消软膏对小鼠尾部鳞片表皮颗粒层形成的影响Δ

张　红，陈　军

(武汉市中西医结合医院药学部，湖北 武汉　430022)



白疕消软膏对小鼠尾部鳞片表皮颗粒层形成的影响Δ

张红*，陈军

(武汉市中西医结合医院药学部，湖北 武汉430022)

目的：观察白疕消软膏外用对小鼠尾部鳞片表皮颗粒层形成的影响，为其临床应用提供实验依据。方法：建立小鼠尾部鳞片表皮模型，取昆明种小鼠50只，以随机数字表法分为高剂量组、中剂量组、低剂量组、阴性对照组、阳性对照组5组，每组10只，观察白疕消软膏对小鼠尾部鳞片表皮细胞分化的影响。结果：高剂量组、中剂量组、低剂量组对小鼠尾部鳞片表皮颗粒层形成的促进作用，与阴性对照组比较，差异有极显著统计学意义(P<0.01)，但与阳性对照组比较，中、低剂量组作用较弱，差异有统计学意义(P<0.05)，表明白疕消软膏能明显促进鼠尾鳞片表皮颗粒细胞形成。结论：白疕消软膏可以通过改善表皮细胞角化不全起到治疗银屑病的作用。

白疕消软膏； 银屑病； 小鼠尾部鳞片表皮模型

白疕消软膏是武汉市中西医结合医院已故皮肤病专家胡长发主任医师在有关科研实验[1]的基础上设计的一个外用中药制剂，在临床上用于治疗白疕血热、血瘀证(寻常性银屑病)。本研究采用天然缺乏颗粒层的鼠尾表皮模拟银屑病表皮分化异常，观察白疕消软膏外用对小鼠尾部鳞片表皮颗粒层形成的影响，了解和证实该中药复方制剂用于临床治疗以表皮细胞分化异常为特征的银屑病的作用机理，为临床应用提供实验室依据。

1　材料

1.1药品与试剂

白疕消软膏(批号：060601，规格：30 g/盒)，软膏基质(规格：30 g/盒)，均由课题组提供；哈西奈德软膏(广东顺风制药厂，批号：20051201，规格：10 g/支)；甘油、十六醇、白凡士林、单硬脂酸甘油酯等软膏基质成分均为药用级。

1.2实验动物

健康昆明种雄性幼小白鼠50只，体质量22.6～29.8 g，普通级，由湖北实验动物研究中心提供，动物合格证号：SCXK(鄂2003-0005)。笼养，10只为1笼；室温：(19±1)℃、湿度：50～70%，实验动物设施合格证号：SYXK(鄂)2004-0024；常规饲料喂养，饲料提供单位：湖北实验动物研究中心，合格证号：SCXK(鄂2003-0005)。

2　方法

2.1药品的制备

2.1.1白疕消软膏的制备：取大黄、丹参、苦参、红花、全蝎等中药，加药材量8倍的水煎煮3次，每次1.5 h，浓缩液加2倍量乙醇使沉淀，回收乙醇并浓缩至含生药2 g/ml，与适量甘油混合加热作为水相，取十六醇、白凡士林、单硬脂酸甘油酯、司盘-60等作为油相，在适宜温度下，依次将水相加入油相中，搅拌使乳化完全，即得。制成高中低3种剂量的软膏含生药分别为1.6、0.8、0.4 g/g。

2.1.2软膏基质的制备：取纯化水代替药液与适量甘油加热作为水相，余同“2.1.1”操作，即得。

2.2分组与给药

取昆明种小鼠50只，以随机数字表法分为高剂量组、中剂量组、低剂量组、阴性对照组、阳性对照组5组，每组10只，高剂量组给予高剂量白疕消软膏，中剂量组给予中剂量白疕消软膏，低剂量组给予低剂量白疕消软膏，阴性对照组给予软膏基质，阳性对照组给予哈西奈德软膏。用棉签分别蘸取不同组别对应的软膏，在每只小鼠尾部均匀涂抹(约0.5 g)，1日2次，连续15 d。 末次给药后次日处死小鼠，取距离根部约1.5 cm处尾部皮肤，10%甲醛溶液固定，石蜡包埋，HE染色。在光学显微镜下观察各组每只小鼠的尾部鳞片，凡两个毛囊口之间的鳞片表皮有排列成行的颗粒层者，称为有颗粒层的鳞片，计数每100个鳞片中有颗粒层的鳞片数。

2.3统计学方法

3　结果

高剂量组、中剂量组、低剂量组对小鼠尾部鳞片表皮颗粒层的形成的促进作用，与阴性对照组比较，差异有极显著统计学意义(P<0.01)，但与阳性对照组比较，中、低剂量组作用较弱，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1、图1。

表1　白疕消软膏对小鼠鼠尾鳞片表皮颗粒层生成的影响

注：P*为与阴性对照组比较，P#为与阳性对照组比较

Note：P*stands for vs. the negative control group,P#stands for vs. the positive control group

A.阴性对照组；B.低剂量组；C.中剂量组；D.高剂量组；E.阳性对照组A.Negative control group; B.Low dose group; C.Moderate dose group; D.High dose group; E.Positive control group图1　小鼠尾部鳞片表皮颗粒层(HE×100)Fig 1　Granular layer of squamous surface of mice tail(HE×100)

4　讨论

银屑病的基本病理特点是表皮细胞角化不全、角质形成细胞增殖过快和炎症反应等[2-5]。本研究选用与银屑病临床症状相关的促进颗粒层形成(改善表皮细胞角化不全)为指标进行实验研究。正常情况下小鼠尾部鳞片的表皮角质层角朊细胞保留有细胞核，而颗粒层颗粒细胞缺失，仅在毛囊处有少量的颗粒细胞，表皮较薄，其天然的角化形式与人类银屑病表皮的角化不全相似，故可模拟该病角化不全的特点，国内外许多学者利用其作为实验模型，评价药物促进颗粒层形成的作用[6-11]，药物如能促进小鼠鼠尾鳞片表皮颗粒层的形成，即可能改变银屑病表皮的角化不全，使之恢复正常。很多学者在实验中证明治疗银屑病临床有效的中药普遍具有促进小鼠尾鳞片表皮颗粒层形成作用[12-15]，并用其进行外用药物治疗银屑病药效研究模型[2]。本研究采用该种动物模型对白疕消软膏药理作用进行评价, 结果表明，局部用药后可明显诱导小鼠尾部鳞片表皮颗粒层形成，高、中、低剂量的白疕消软膏对小鼠尾鳞片颗粒层的形成均有明显促进作用，与剂量成正相关，与阴性对照组比较作用较强，差异均有统计学意义(P<0.05)，与阳性对照组比较，中、低剂量组作用均较弱，差异有统计学意义(P<0.05)。提示白疕消软膏可以通过改善表皮细胞角化不全起到治疗银屑病的作用，为白疕消软膏的治疗提供了实验依据。

多年来，临床上选用糖皮质激素制剂外用能有效地治疗银屑病[8]，且已经有相关实验证实，但长期应用造成的皮肤萎缩等副作用不能忽视。在本研究中发现，外用哈西奈德软膏15 d后，小鼠尾部皮肤萎缩很明显，而给予白疕消软膏的高、中、低剂量组则无萎缩现象。

中药在世界各国受到越来越多的青睐。相比于其他剂型，透皮给药制剂治疗皮肤局部疾病，具有安全、有效、稳定和患者适应性好等优点。因此，开展中药外用治疗银屑病的研究是一种可行的途径。

[1]袁劲松，周利平，胡长发，等.中药对银屑病的抗体搭桥角质形成细胞/单一核白细胞粘连的影响[J].中国中西医结合皮肤性病学杂志[J].2005，4(4)：240-241.

[2]苗志远，高超，艾宏伟，等.大黄黄芩合用对银屑病外治作用的研究[J].湖北中医药大学学报，2013，15(1)：21-22.

[3]刘晋华，尤光甫，李玉萍.青黛克银丸治疗银屑病的药理抗炎作用[J].中国药师，2010，13(8)：1107-1109.

[4]梁莹，周萌.活血化瘀中药复方对小鼠银屑病模型的影响[J].中国医药导报，2009，6(26)：9-11.

[5]王琼玉，张爱军，马慧群，等.腺病毒介导的PML基因对银屑病样小鼠模型的作用[J].南方医科大学学报，2013，33(3)：432-435.

[6]赵京霞，底婷婷，王燕，等.5种常用药物对咪喹莫特诱导小鼠银屑病样皮损模型形成的影响[J].中国皮肤性病学杂志，2014，28(3)：234-238，259.

[7]闫铁夫.黄芪注射液联合阿维A对小鼠银屑病模型的影响[J].重庆医科大学学报，2013，38(1)：58-60.

[8]张宗保，张霄岳，柳新，等.梢地祛银胶囊治疗寻常型银屑病的药效学研究[J].中国药师，2013，16(5)：642-644.

[9]沈珏，盛国荣.退银汤治疗银屑病动物模型的实验研究[J].华西药学杂志，2013，28(6)：592-595.

[10]底婷婷，赵京霞，李萍.银屑病样模型的研究进展[J].首都医科大学学报，2012，33(2)：275-279.

[11]何加炜，唐雪勇，杨志波.银屑病中医治疗的实验研究概况[J].中国中西医结合皮肤性病学杂志，2012，11(2)：132-134.

[12]王学军，陶以成，刘长发.丹槐银屑浓缩丸对小鼠银屑病模型的病理实验研究[J].中国中医急症，2010，19(1)：104-105.

[13]刘靖.储开宇，查旭山.银屑I号对银屑病样动物模型的影响[J].中国中医药信息杂志，2011，18(6)：43-45.

[14]郑海燕，李忻红.中药白疕合剂对实验性银屑病小鼠模型的影响[J].中国中西医结合皮肤性病学杂志，2012，11(3)：149-151.

[15]刘冬平，李蜀平，刘魁英，等.丹地消银丸对银屑病样动物模型的影响[J].北京中医药，2013，32(8)：625-626，635.

Experimental Study on Baibixiao Ointment on Squamous Surface Model of Mice TailΔ

ZHANG Hong, CHEN Jun

(Dept.of Pharmacy, Wuhan Hospital of Traditional Chinese and Western Medicine，Hubei Wuhan 430022，China)

OBJECTIVE：To observe the effects of Baibixiao ointment on squamous surface of mice tail, so as to provide experimental basis for the clinical application.METHODS: Squamous surface model of mice tail was establish, 50 cases Kunming mice were selected to be divided into high-dose group, middle dose group, low dose group, negative control group, positive control group via the radom number table, with 10 cases in each. The effects of Baibixiao qintment on squamous surface of mice tail were observed. RESULTS: Promote the formation of mouse tail epidermis granular layer in high-dose group, middle dose group and low dose group, compared with the negative control group, the difference was extremely significant(P<0.01). But compared with the positive control group,the middle and low dose group are less effective, with statistically significant difference(P<0.05).Baibixiao ointment can significantly promote the formation of squamous surface cell of mice tail. CONCLUSIONS: The therapeutic effects of Baibixiao ointment on psoriasis can be achieved by improving paraceratosis in the epidermal cells.

Baibixiao ointment; Psoriasis; Squamous surface model of mice tail

武汉市卫生局科研课题(No.武卫[2003]228号)

R986

A

1672-2124(2016)08-1023-03

10.14009/j.issn.1672-2124.2016.08.005

2016-05-03)

*主任中药师。研究方向：中西药新制剂临床前研究。E-mail:wyzh688@126.com