关于薄层色谱鉴别丹参五味子片的效果

陈桂远

（广西清川仁源药业有限公司 广西南宁 530007）

关于薄层色谱鉴别丹参五味子片的效果

陈桂远

（广西清川仁源药业有限公司 广西南宁 530007）

目的：研究薄层色谱鉴别丹参五味子片的效果，进而将制剂的质量标准有效提高。方法：采用薄层色谱法对丹参五味子片中含有的五味子和丹参进行鉴别，研究其鉴别效果。结果：在五味子与丹参酮ⅡA供试品色谱中，和对照品色谱互相对应位置上出现了颜色相同的半点，并且阴性对照没有受到干扰。结论：薄层色谱鉴别丹参五味子片的效果显著，并且具有快速、简单、良好重现性等诸多优点，可以将其用在丹参五味子片的质量控制。

薄层色谱；鉴别；丹参五味子片；效果

前言

临床上，丹参五味子片主要被用来治疗慢性肝炎、神经衰弱、冠心病等疾病，田七、刺五加、甘草、五味子、丹参扥中药材为该制剂的主要组成部分。该制剂在临床上具有开窍理气、祛邪扶正、化瘀活血等诸多功效。丹参五味子片中的丹参中含有丹酚酸B、丹参素、丹参酮ⅡA、ⅡB、丹参酮Ⅰ等成分，它们为水溶性或者脂溶性二萜化合物或者酚酸类型的化合物。在丹参所包含的所有成分中，丹参酮ⅡA属于一种能够对细胞内脂质过氧化物以及核糖核酸之间的相互作用进行有效抑制的因子。其次，五味子也属于丹参五味子片一个重要组成部分，脂肪油、挥发油、有机酸、多糖以及木脂素等均属于五味子的重要组成部分。研究显示，五味子能够对机体中枢进行有效抑制，具有较广的作用范围，能够用发挥出与镇静安定相类似的效果。丹参五味子片中最重要的成分为五味子与丹参酮ⅡA，采用一种科学合理的方法对丹参五味子片中含有的五味子和丹参进行鉴别，不仅能够有效控制丹参五味子片的药物质量，而且能够有效控制与监督药物临床使用的安全性与有效性。本研究主要采用的是薄层色谱法对丹参五味子片进行鉴别，将五味子甲素与丹参酮ⅡA进行对照，以此来鉴别制剂中的五味子与丹参，通过研究分析获得了一些体会，现将其总结如下：

1 仪器与方法

1.1 仪器

仪器：由杭州子新华纸业有限公司提供的定性滤纸；由青岛谱科分离材料有限公司提供的硅胶GF254薄层板、硅胶G板；由广州市药品检验所提供的5μl与2μl定量毛细管；由上海市实验仪器总厂提供的理化干燥箱；由宁波自动化仪表厂提供的电热恒温水浴锅；由上海市安亭电子仪器厂提供的三用紫外仪；由广州经济开发区明珠电器有限公司提供的超声波清洗器，其功率为150W；来自瑞士的电子分析天平。

1.2 药物

药物：甲酸乙酯、石油醚（温度在30～60℃之间）、甲苯、乙酸乙酯、三氯甲烷、五味子甲素、丹参酮ⅡA、纯净水。

2 方法与结果

2.1 五味子薄层色谱鉴别方法与结果

丹参五味子片溶液的制备方法：选取10片丹参五味子片，将其研细，然后加入20mL三氯甲烷，采用超声对其进行30min的提取，将其过滤，蒸干滤液，将2mL三氯甲烷加入到残渣中进行溶解，将其作为供试品溶液。

五味子甲素对照品溶液制备方法：对五味子甲素对照品进行称取，在其中加入三氯甲烷进行溶解，将其配制成为每1mL五味子甲素对照品溶液含1mg五味子甲素的溶液，并且将其当作对照品溶液。

五味子阴性对照品溶液制备方法：以处方工艺为依据，对缺五味子阴性对照品溶液进行制备，以薄层鉴别方法中的供试品溶液制备方法为标准，制备出阴性对照溶液。

薄层鉴别方法：以《中国药典》中薄层色谱试验为依据，吸取5μl供试品溶液与2μl对照品溶液，将其分别点在相同的一块硅胶GF254薄层板上，展开剂为甲酸（15：5：1）-甲酸乙酯-石油醚（温度为30～60℃）的上层溶液，按照展开→取出→晾干→置紫外灯下的步骤，对其进行检视。

结果：在供试品色谱中，和对照品色谱互相对应位置上出现了颜色相同的半点，并且阴性对照没有受到干扰。具体色谱图见图1。

图1 五味子薄层色谱鉴别图谱

2.2 丹参薄层色谱鉴别方法与结果

丹参五味子片溶液的制备方法：选取10片丹参五味子片，将其研细，然后加入20mL三氯甲烷，采用超声对其进行30min的提取，将其过滤，蒸干滤液，将2mL三氯甲烷加入到残渣中进行溶解，将其作为供试品溶液。

丹参酮ⅡA对照品溶液制备方法：对丹参酮ⅡA对照品进行称取，在其中加入子酸乙酯进行溶解，将其配制成为每1mL丹参酮ⅡA对照品溶液中含1mg丹参酮ⅡA的溶液，并且将其当作对照品溶液。

缺丹参阴性对照品溶液制备方法：以处方工艺为依据，对丹参阴性对照品溶液进行制备，以薄层鉴别方法中的供试品溶液制备方法为标准，制备出阴性对照溶液。

薄层鉴别方法：以《中国药典》中薄层色谱试验为依据，吸取5μl供试品溶液，将其分别点在相同的一块硅胶GF254薄层板上，展开剂为甲甲苯—乙酸乙酯（19：1），在展开缸上放置薄层板，并将其展开，然后取出，再晾干。

结果：在供试品色谱中，和对照品色谱互相对应位置上出现了颜色相同的半点，并且阴性对照没有受到干扰。具体色谱图见图2。

3 讨论

薄层色谱法是把涂布在支持板上的支持物当成固定相，并且采用恰当的溶剂作为流动相，进而分离、鉴定与定量混合样品，它属于一种层析分离技术[1]。这种方式能够以加快的速度对生物碱、核苷酸、氨基酸、类固醇以及脂肪酸等多种物质进行层析。薄层色谱法属于一种吸附薄层色谱分离方法，它对各个成分对相同吸附剂具有不同吸附能力这一特点进行充分利用，进而使得流动相溶液在流过吸附剂的过程中，会出现连续性的吸附、解吸附、再吸附、再解吸附的现象，通过这样方式能够促使各个成份之间进行相互分离[2]。以薄层层析固定相不同支持物为依据，可以分为薄层凝胶层析、薄层离子交换层析、薄层分配层析以及薄层吸附层析等。通常情况下，薄层吸附层析使用的频率最高。物体表面一个十分重要的性质便为吸附，不同相之间均可以有表面形成，吸附指的是一个相中的物质在表面表现出密集的现象。在气体与吸附液体、液体与固体、气体与固体之间的表面上均可能有吸附现象的出现。固体表面之所以能够停留物质分子，就是因为固体内部分子以及固体表面分子的吸引力存在差异性，固体内部分子之间有着对称的相互作用，所以通常会抵消力场。但是固体表面分子所受的力具有不对称性，如表面层力的作用小，向内一面的作用力大，进而会促使溶质分子或者气体在进行运动的过程中，在与固体表面相遇时，因为受到了剩余力影响，所以便会停留下来。

图2 五味子薄层色谱鉴别图谱

本研究主要是在参考药典的基础上，将石油醚当成提取溶剂，对其超声之后10min、20min、以及30min所获得的结果进行对比分析，研究结果显示，采用石油醚进行10min的超声提取之后，能够将丹参酮ⅡA斑点有效显示出来，但是却不能将五味子甲素斑点显示出来，将超声提取时间延长到30min之后，也还是不能将斑点清楚的显示出来。在采用三氯甲烷作为提取剂之后，便能够将五味子以及丹参斑点均清楚显示出来。因此本研究将三氯甲烷当成丹参以及五味子的提取溶液，将其当成质量标准，具有更大便利性。其次，为了选择更好的丹参展开系统，本研究对环己烷一乙酸乙酯（17：3）以及甲苯一乙酸乙酯（19：1）进行了对比性的研究分析，研究结果显示甲苯一乙酸乙酯（19：1）具有更好的展开效果。

综上所述，丹参五味子片在临床上属于一种复方制剂，成分具有较大复杂性，薄层色谱法能够对其进行有效鉴别，具有快速、简单、良好重现性等诸多优点，可以将其用在丹参五味子片的质量控制，在临床上具有良好的推广价值。

[1]秦建平，吴建雄，毕宇安，林夏，赵宾江，王振中，萧伟.HPLC同时测定益心舒片中五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素和丹参酮Ⅱ_A的含量[J].中国实验方剂学杂志，2012，18（02）：77～80.

[2]李广生，王凌波，笔雪艳，李慧勇，林林，张清波.HPLC法同时测定益心舒片中丹酚酸B、五味子醇甲和丹参酮Ⅱ_A的含量[J].黑龙江医药，2016，29（01）：1～3.

R286.0

A

1004-7344（2016）26-0307-02

2016-8-26

陈桂远（1984-），男，大专，主要从事药品生产、研究等工作。