紫杉醇化疗方案对乳腺癌患者血清Th1/Th2细胞因子水平的影响

荣　磊，王恩礼

(南方医科大学附属深圳市妇幼保健院，深圳　518028)



紫杉醇化疗方案对乳腺癌患者血清Th1/Th2细胞因子水平的影响

荣磊，王恩礼*

(南方医科大学附属深圳市妇幼保健院，深圳518028)

摘要：目的探讨紫杉醇化疗方案对乳腺癌患者血清Th1/Th2细胞因子水平的影响。方法将100例乳腺癌术后辅助化疗患者随机(1︰1)分为2组，常规组行AC(阿霉素-环磷酰胺，每3周1次)-P(紫杉醇80 mg·m-2，每周1次)方案化疗，剂量密集组，行AC(阿霉素-环磷酰胺每2周1次)-P(紫杉醇175 mg·m-2，每2周1次)方案化疗，化疗前后观察患者血清细胞因子水平变化。结果常规组及剂量密集组化疗后患者血清IL-2、TNF-α及IFN-γ浓度均显著增高(P<0.05)，血清IL-4、IL-6及IL-10水平显著降低(P<0.05)。结论常规组及剂量密集组均能够改善乳腺癌患者细胞免疫功能；剂量密集组较常规组具有更强的恢复细胞免疫为主的抗肿瘤免疫能力，且未显著增加毒性和不良反应。

关键词：紫杉醇；阿霉素-环磷酰胺；乳腺癌；细胞因子；Th1/Th2

化疗是治疗乳腺癌的重要方法之一。乳腺癌的化疗药物及方案较多，疗效及不良反应报道不一。研究表明[1-3]，紫杉醇(paclitaxel) 为抗微管药物，通过促进微管蛋白聚合和抑制解聚，保持微管蛋白稳定，抑制细胞有丝分裂，在直接杀伤肿瘤细胞的同时，还能对包括效应性T细胞、树突状细胞(dendritic cells，DC)、NK、Treg和巨噬细胞等多种免疫细胞发挥调节作用，目前在临床应用于包括乳腺癌等多种肿瘤的治疗[4-5]。为此，我们采用不同含紫杉醇化疗方案治疗手术后的乳腺癌患者，观察其毒性和不良反应，并探讨其对患者细胞免疫功能的影响。

1资料与方法

1.1临床资料本项研究选取2013年7月～2014年10月，经病理证实的早、中期女性乳腺癌患者100例，平均年龄44.6±5.7岁，进行乳腺癌改良根治术或保乳术后，排除因HER-2阳性使用曲妥珠单抗患者。患者随机以1︰1比例分为常规组和剂量密集组接受不同化疗方案。所有患者均在化疗前被告知此项研究数据统计及用途，全部患者知情并同意其个人数据用于本项研究。剂量密集组的2名患者因个人原因未能按照计划完成化疗，样本被排除出本项研究。1.2患者分组治疗所有患者采用AC-P(阿霉素+环磷酰胺-紫杉醇)方案全身静脉化疗：常规组患者阿霉素60 mg·m-2+环磷酰胺600 mg·m-2,静脉注射，每3周1次，共4次，序贯紫杉醇(PTX)80 mg·m-2,静脉滴注1 h，每周1次，共12次，必要时使用G-CSF；剂量密集组患者阿霉素60 mg·m-2+环磷酰胺600 mg·m-2,静脉注射，每2周1次，共4次，序贯紫杉醇(PTX)175 mg·m-2,静脉滴注3 h，每2周1次，共4次，GCSF支持。化疗期间每3 d监测1次血常规，2组患者常规应用止吐及对症治疗。

1.3检测免疫指标所有患者化疗前及化疗后2周采集外周静脉血5 mL，离心分离血清及淋巴细胞，采用ELISA法检测血清IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α和IFN-γ水平，试剂盒购于深圳市达科为生物技术有限公司。

1.4统计学方法各组间细胞因子表达水平采用非配对t检验(Un-pairedttest)，采用Prism 5.0统计软件对数据进行统计学计算。

2结果

2.1毒性反应按照WHO化疗药物毒性反应分级标准，将出现Ⅲ、Ⅳ级化疗药物毒性反应,定义为阳性。

常规组白细胞减少15 例、血红蛋白降低3例、恶心呕吐9例、肌肉关节痛16例、手足麻木8例；剂量密集组白细胞减少14 例、血红蛋白降低4例、恶心呕吐8例、肌肉关节痛16例、手足麻木9例。2组白细胞减少、血红蛋白降低、恶心呕吐、肌肉关节痛和手足麻木等毒性反应差异均无统计学意义(P>0.05)，见表1。

表1 常规组和剂量密集组发生毒性反应事件分析

Tab.1 Toxic reaction events between conventional group and dosage dense group

毒性反应常规组(n=50)剂量密集组(n=48)风险比(95%CI)P白细胞减少15141.12(0.61,2.06)0.72血红蛋白降低340.78(0.18,3.31)0.74恶心呕吐981.17(0.49,2.79)0.72肌肉关节痛16161.04(0.59,1.84)0.89手足麻木890.93(0.39,2.20)0.86

2.2对细胞因子的影响与化疗前相比，常规组和剂量密集组患者化疗后血清IL-2、TNF-α及IFN-γ浓度均显著增高(P<0.05)， 见表2～3。血清IL-4、IL-6及IL-10水平显著降低(P<0.05)，见图1。

表22组患者治疗前后外周血Th1类细胞因子IL-2、TNF-α及IFN-γ水平比较

Tab.2 Peripheral blood Th1 cytokines (IL-2，TNF-αand IFN-γ) pre- and post chemotherapy analysis in conventional and dosagedense group

±s)

注：*化疗前后比较P<0.05；Δ常规组与剂量密集组间化疗后比较P<0.05。

表32组患者治疗前后外周血Th2类细胞因子IL-4、IL-6及IL-10水平比较

Tab.3 Peripheral blood Th1 cytokines (IL-4，IL-6 and IL-10) pre- and post chemotherapy analysis in conventional and dosagedense group

±s)

注：*化疗前后比较P<0.05；Δ常规组与剂量密集组间化疗后比较P<0.05。

图1常规组和剂量密集组化疗前后Th1/Th2类细胞因子表达水平(*P<0.05)

Fig.1 Th1/Th2 cytokines expression level pre- and post-chemotherapy between conventional group and dosagedense group

3讨论

Th为辅助性T细胞，根据产生细胞因子和功能的不同，可以分为Th1和Th2等亚群。Th1亚群主要通过分泌IL-2、IFN-γ和TNF-α，促进机体的细胞免疫功能；Th2亚群主要通过分泌IL-4、IL-6和IL-10来促进机体的体液免疫功能[1]。Th1 型细胞因子类主要通过2种途径参与抗肿瘤免疫调节，一是通过其抗原受体识别肿瘤细胞上的肿瘤抗原并与之结合，通过溶细胞作用，直接杀伤肿瘤细胞；二是分泌IFN-γ和TNF-α等细胞因子，具有抑制肿瘤细胞生长和诱导多方面抗肿瘤的免疫应答以间接杀伤肿瘤细胞[2-3]。正常生理条件下，机体内Th1/Th2类细胞亚群处于平衡状态，Th1细胞因子IFN-γ促进Th1，抑制Th2；Th2细胞因子IL-4促进Th2发育，故Th1和Th2交叉调节，共同左右机体的免疫平衡，维持机体的正常肿瘤免疫状态。在肿瘤宿主中，这种平衡会逐渐遭到破坏，向Th2漂移，而Th2 型细胞占优势时将保护肿瘤发生免疫逃逸[6-7]。

紫杉醇(paclitaxel)为抗微管药物，通过促进微管蛋白聚合、抑制解聚，保持微管蛋白稳定和抑制细胞有丝分裂，在临床上应用于多种肿瘤的治疗，其中包括乳腺癌的辅助化疗[8-9]。研究表明，接受常规组和剂量密集组化疗的乳腺癌患者，化疗后血清IL-2、TNF-α及IFN-γ的浓度均显著增高(P<0.05)；血清IL-4、IL-6和IL-10的水平均显著降低(P<0.05)。此外，剂量密集组患者接受化疗后，血清IL-2、TNF-α及IFN-γ浓度增高，较常规组患者血清Th1类因子增高明显；而剂量密集组患者接受化疗后，血清IL-4、IL-6和IL-10水平降低，较常规组患者血清Th2类因子降低明显。结果表明，乳腺癌患者Th细胞呈现Th1抑制和Th2极化状态，Th1/Th2平衡向Th2 方向漂移，细胞免疫受到抑制。含紫杉醇的常规化疗AC-P方案及剂量密集的AC-P方案均可纠正失衡的Thl/Th2 细胞因子网络，逆转荷瘤机体的Thl/Th2 的异常漂移，进行Th1/Th2 转型治疗。本试验结果表明，接受常规组及剂量密集组化疗的患者血清中Th1 类细胞因子表达强度明显增高，并明确出现Th2向Th1 漂移，提示化疗后患者免疫功能改善。同时，剂量密集组患者Th2向Th1漂移较常规组更加显著。结果提示，剂量密集组化疗对于以细胞免疫为主的抗肿瘤免疫能力的恢复起到了更有利的作用，对于防止肿瘤复发、转移以及延长生存期等有比较积极的意义。

本研究中，在常规组和剂量密集组患者中，均未出现明显毒性和不良反应。结果显示，常规组出现血红蛋白降低及手足麻木的风险低于剂量密集组；常规组与剂量密集组相比，在发生白细胞减少、恶心呕吐及肌肉关节痛等毒性反应方面，差异无统计学意义。结果表明，患者对常规组及剂量密集组化疗方案均耐受较好，可进一步进行临床远期效果研究。

参考文献：

[1]Mosmann T R，Cherwinski H，Bond M W，et al. Two types of murine helper T cell clone. I. Definition according to profiles of lymphokine activities and secreted proteins(1986)[J].J Immunol，2005，175(1):5-14.

[2]Knutson K L，Disis M L.Tumor antigen-specific T helper cells in cancer immunity and immunotherapy[J].Cancer Immunol Immunother，2005，54(8): 721-728.

[3]Neurath M F，Finotto S，Glimcher L H. The role of Th1/Th2 polarization in mucosal immunity[J].Nat Med，2002，8(6): 567-573.

[4]Grivennikov S I，Greten F R，Karin M．Immunity，inflammation，and cancer[J]．Cell，2010，140(6):883-899．

[5]Vassileva V，Allen C J，Piquette-Miller M．Effects of sustained and intermittent paclitaxel therapy on tumor repopulation in ovarian cancer[J].Mol Cancer Ther，2008，7(3): 630-637．

[6]曹颖平，康明强，张旸，等.肺癌患者的Th1/Th2免疫反应状态[J].福建医科大学学报，2007，41(2):150-152.

[7]林华燕，吴平，何惠娟，等.乳腺癌患者外周血Th1/Th2细胞因子的漂移及其与病理和临床病程的关系[J].肿瘤研究与临床，2006，18(5):304-306，309.

[8]袁亮亮.紫杉醇多孔硅微球的制备及提高渗透性考察[J].西北药学杂志，2013，28(6)：614-616.

[9]陈建龙，任丽莉，陈国广.紫杉醇靶向制剂的研究进展[J].西北药学杂志，2011，26(5)：390-392.

基金项目：中国癌症基金会项目(编号：S2013023)

作者简介：荣磊，男，博士，主治医师

*通信作者：王恩礼，男，主任医师

doi:10.3969/j.issn.1004-2407.2016.04.025

中图分类号：R979.1

文献标志码：A

文章编号：1004-2407(2016)04-0409-03

(收稿日期：2015-09-22)

Effect of paclitaxel-containing chemotherapy on serum Th1/Th2 cytokines in patients with breast cancer

RONG Lei，WANG Enli*

(Shenzhen Maternal and Children Health Hospital，Affiliated to the Southern Medical University，Shenzhen 518028，China)

Abstract:ObjectiveTo investigate the effects of paclitaxel-containing chemotherapy on serum Th1/Th2 cytokines in breast cancer patients.Methods100 breast cancer patients were randomly (1︰1) allocated to two different chemotherapy groups，the conventional group [adriamycin cyclophosphamide (every 3 weeks)-P(80 mg·m-2weekly)] and the dosage dense group [adriamycin cyclophosphamide (every 2 weeks)-P(175 mg·m-2every 2 weeks)]. Patients′ blood serum cytokines were evaluated before and after different chemotherapies. ResultsSerum levels of IL-2、TNF-α and IFN-γwere significantly increased (P<0.05) after chemotherapies in both conventional group and dosage dense group，while the levels of IL-4,IL-6 and IL-10 were significantly decreased(P<0.05) in both groups. Conclusion Conventional group and dosage dense group both improved the cellular immune-function in patients with breast cancer. Moreover，chemotherapy of dosage dense group possesses better anti-tumor immune ability，improving cellular immune function，without rendering significantly increased toxic side effects.

Key words:paclitaxel；adriamycin cyclophosphamide；breast cancer；cytokines；Th1/Th2