腹腔镜贲门癌手术对贲门癌患者hs-CRP、T淋巴细胞亚群及免疫球蛋白的影响机制研究

王志炎　　陈　婷　　王　勇　　吴　彪宁波市鄞州区第二医院外科，浙江宁波　315100



腹腔镜贲门癌手术对贲门癌患者hs-CRP、T淋巴细胞亚群及免疫球蛋白的影响机制研究

王志炎陈婷王勇吴彪▲
宁波市鄞州区第二医院外科，浙江宁波315100

［摘要］目的研究腹腔镜贲门癌手术对患者hs-CRP、T淋巴细胞亚群及免疫球蛋白的影响。方法选择2009年12月～2015年12月我院治疗的贲门癌患者60例，根据手术方式的不同随机分为两组：其中腹腔镜组30例，余30例行开腹手术为对照组，比较两组贲门癌患者手术前后hs-CRP、调节性T细胞及免疫球蛋白水平的变化。结果腹腔镜组hs-CRP水平术后3、7 d分别显著低于对照组，腹腔镜组患者术后7 d外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+活性恢复至接近术前水平（P＞0.05），而对照组仍显著低于腹腔镜组（P＜0.05）。对照组术后3、7 d的IgM水平分别显著低于腹腔镜组 （P＜0.05）。结论腹腔镜贲门癌手术对hs-CRP及T淋巴细胞亚群与免疫球蛋白的变化较开腹手术变化小，对机体的免疫抑制轻，能更好地保护患者的免疫功能，且可以减轻术后急性期反应，有效避免术后因免疫导致的感染等并发症的发生，有利于促进患者术后尽快恢复。

［关键词］腹腔镜手术；贲门癌；hs-CRP；T淋巴细胞亚群；免疫球蛋白

贲门癌是常见病，传统贲门癌的治疗主要采用经胸或经腹贲门癌根治术，但贲门癌手术解剖结构复杂、解剖层面多、淋巴结转移范围广，加上周围血管丰富，开腹手术难度较大［1］。随着腹腔镜技术的进一步成熟，由于腹腔镜手术对患者身体的损伤小、患者痛苦少且术后恢复快，目前已经成为治疗贲门癌的主要方法。但腹腔镜手术作为一种创伤性手术，可影响机体的免疫功能和炎症因子不同程度的表达，主要表现在超敏C反应蛋白（hs-CRP）、T淋巴细胞亚群及免疫球蛋白等指标的变化。hs-CRP由肝细胞合成，是一种急性反应蛋白，研究发现，血清中hs-CRP水平与手术创伤大小呈正相关［2］。另一方面，机体对肿瘤的免疫应答主要包括细胞免疫和体液免疫，且主要以T细胞参与的细胞免疫为主，CD3+、CD4+、CD4+/CD8+等T细胞亚群可以直接反映肿瘤患者术后的免疫功能；体液免疫通过IgA、IgG、IgM免疫球蛋白发挥抗肿瘤的免疫效应［3］，目前对腹腔镜贲门癌手术在hs-CRP及补体与免疫球蛋白方面研究较少，本研究旨在探讨腹腔镜贲门癌手术对患者hs-CRP、T淋巴细胞亚群及免疫球蛋白的影响机制，现报道如下。

▲通讯作者

1　资料与方法

1.1临床资料

选择2009年12月～2015年12月我院治疗的贲门癌患者60例，术前、术后均经病理检查证实，无免疫系统疾病，术前无肠梗阻，术前术后均未行免疫治疗及放、化疗。其中男36例，女24例，患者年龄40～80岁；TNM分期：I期3例，Ⅱ期18例，Ⅲ期29例，Ⅳ期10例。根据手术方式的不同采用随机数字表法分为两组：其中腹腔镜组30例，其余30例行开腹手术为对照组，两组入选对象的性别、年龄、TNM分期等一般资料间比较差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2手术方法

1.2.1对照组行开腹手术，上腹正中切口绕脐下2～3 cm，进腹探查肿瘤后，充分游离左肝三角韧带、冠状韧带，大s拉勾将肝左叶向右牵开，左上腹部用悬吊式肋缘拉钩牵拉暴露，按R2常规行近端胃切除、全胃切除术，消化道重建食管胃吻合、食管空肠吻合。

1.2.2腹腔镜组全麻，患者取平卧位，上腹正中剑突下作6～7 cm纵形切口，建立CO2气腹。观察孔位于脐周处，主操作孔和辅操作孔在两侧脐上5 cm水平锁骨中线处。打开左侧脾结肠韧带，游离结肠系膜前叶左半，结扎胃网膜左血管，清扫脾门淋巴结及贲门左侧淋巴结，Koche切口打开结肠肝曲处侧腹膜，游离结肠系膜前叶右半，保留胃网膜右血管弓，充分游离结肠系膜前叶，剥除胰腺被膜，清扫脾动脉周围淋巴结，打开肝胃韧带，清扫肝动脉及胃左腹腔干周围淋巴结并清扫贲门右侧淋巴结，经切口处将胃牵出，行肿瘤切除+胃肠吻合重建术。

1.3观察指标

1.3.1hs-CRP的检测 空腹12 h以上于术前、术后3 d和术后7 d取肘静脉血4 mL，采用ELISA法检测hs-CRP，严格按照试剂盒说明书进行。

1.3.2T淋巴细胞亚群的检测 采用Beckman Coulter EpicsXL流式细胞仪应用单纯红细胞致敏花环法检测T细胞亚群（CD3+、CD4+、CD8+）［4］。

1.3.3免疫球蛋白的检测 采用速率散射比浊法测定免疫球蛋白A（immunoglobulin A，IgA）、免疫球蛋白G （immunoglobulin G，IgG）、免疫球蛋白M（immunoglobulin M，IgM），采用美国Beckman公司的Immage特种蛋白分析仪，试剂为Beckman公司提供的配套试剂。

1.4统计学方法

采用SPSS12.0统计学软件进行分析，计量资料以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用t检验、方差分析，计数资料以［n（%）］表示，组间比较采用Χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1两组贲门癌患者手术前后hs-CRP水平变化比较

腹腔镜组与对照组术前hs-CRP水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；术后3、7 d腹腔镜组与对照组的hs-CRP水平分别高于术前，差异有统计学意义，但腹腔镜组hs-CRP水平术后3、7 d分别显著低于对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1　两组贲门癌患者手术前后hs-CRP水平变化比较（±s，mg/L）

表1　两组贲门癌患者手术前后hs-CRP水平变化比较（±s，mg/L）

组别　n 术前　　术后3 d　术后7 d　F值　P腹腔镜组对照组t值P 30 30 0.19±0.04 0.21±0.06 0.131 ＞0.05 5.17±1.16 7.87±1.92 2.532 ＜0.05 0.98±0.33 2.45±0.72 3.237 ＜0.05 6.238 5.739 ＜0.05 ＜0.05

2.2两组贲门癌患者手术前后T淋巴细胞亚群水平变化比较

术前两组患者T细胞亚群活性差异无统计学意义（P＞0.05）。术后3 d两组患者外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+较术前明显降低，但两组组间比较差异无统计学意义（P＞0.05）；术后7 d，腹腔镜组患者外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+活性恢复至接近术前水平（P＞0.05），而对照组仍显著低于术前及腹腔镜组（P＜0.05）。腹腔镜组术后3、7 d CD8+水平与术前比较差异不显著（P＞0.05）。对照组术后7 d CD8+水平与术前及术后3 d比较显著降低，且显著低于腹腔镜组（P＜0.05）。见表2。

2.3两组贲门癌患者手术前后免疫球蛋白水平变化比较

术前两组患者的免疫球蛋白比较差异不显著（P＞0.05）；术后3 d腹腔镜组免疫球蛋白IgA、IgM、IgG水平分别较术前显著降低，但术后7 d较术前比较未见明显变化。腹腔镜组术后3 d、7 d的IgA、IgG水平与对照组比较无显著差异，但对照组术后3 d、7 d的IgM水平分别显著低于腹腔镜组。见表3。

3　讨论

贲门癌主要采取手术治疗，而腹腔镜贲门癌手术可清晰观察到各解剖平面、病灶部位、神经等结构以及血管走行，有利于病灶的彻底切除及淋巴结的彻底清扫［5］。而腹腔镜手术作为一种创伤性手术，在治疗疾病的同时可引起机体的应激反应及炎性细胞活化、补体系统激活等炎性反应，而过度的炎症应激反应可以加重机体组织器官的损伤［6-9］。hs-CRP是由肝脏合成的血浆蛋白，机体受到创伤或严重感染时大量合成，是生理状态下含量很少的急性时相反应物质［10-12］。研究发现，hs-CRP上升越高，机体的创伤或感染程度越严重。本文中表1结果分析显示，腹腔镜组与对照组术后3、7 d的hs-CRP水平分别高于术前，且对照组hs-CRP水平术后3、7 d分别显著高于腹腔镜组（P＜0.05），与黄祥［13］报道的观点是相符的，说明开腹手术引起的炎性反应更为剧烈，而腹腔镜手术对机体的创伤较小。机体对肿瘤的免疫应答主要是T细胞参与完成的，CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+等T细胞亚群可以直接反映肿瘤患者术后的免疫功能。其中CD3+T细胞的数量代表机体总的细胞免疫状态，而CD4+T细胞是辅助性和诱导性T细胞，其活化后可释放大量细胞因子，增强抗瘤效应；CD8+T细胞是细胞毒和抑制性T细胞，具有病毒清除和黏附功能。CD4+/CD8+保持动态平衡，以维持机体细胞免疫功能的稳定，当其比值降低，则患者的免疫功能低下［14-19］。本文中表2对两组贲门癌患者术前及术后3、7 d的调节性T细胞进行比较，结果显示术后7 d，腹腔镜组患者外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+活性恢复至接近术前水平（P＞0.05），而对照组仍显著低于术前及腹腔镜组（P＜0.05）。腹腔镜组术后3 d、7 d CD8+水平与术前比较差异不显著（P＞0.05），说明腹腔镜手术对机体的创伤及免疫抑制明显小于开腹手术，能使机体更快地恢复到术前水平。免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）有清除病原体、保护机体的重要作用。正常情况下，机体中免疫球蛋白浓度处于稳定状态，当机体受到损伤时会过度消耗，体内免疫球蛋白浓度会明显下降，其下降幅度与损伤程度有关。本研究中，腹腔镜组免疫球蛋白IgA、IgM、IgG水平术后7 d较术前比较未见明显变化，但对照组术后3 d、7 d的IgM水平分别显著低于腹腔镜组，说明腹腔镜手术对IgM激活补体和调节吞噬功能的影响小于对照组，严建宇等［20］也证实了上述观点。

表2　两组贲门癌患者手术前后T淋巴细胞亚群水平变化比较（±s）

表2　两组贲门癌患者手术前后T淋巴细胞亚群水平变化比较（±s）

注：*与术前比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；#与对照组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）

CD3+（%）　CD4+（%）　CD8+（%）　CD4+/CD8+组别　n腹腔镜组30术前术后3 d术后7 d F值P对照组30术前术后3 d术后7 d F值P 47.11±5.16 36.37±6.41*48.14±5.23#5.327 ＜0.05 47.86±6.72 38.23±4.35*41.51±6.26*4.872 ＜0.05 35.86±3.32 26.91±5.18*34.73±3.56#3.621 ＜0.05 34.53±4.67 26.56±3.23*27.23±2.11*3.236 ＜0.05 27.27±3.11 27.42±5.78 26.83±3.04#0.352 ＞0.05 27.03±4.23 27.13±2.71 24.61±3.12*2.164 ＜0.05 1.17±0.34 0.91±0.18*1.16±0.26#3.257 ＜0.05 1.18±0.36 0.92±0.25*1.01±0.08*3.198 ＜0.05

表3　两组患者手术前后免疫球蛋白变化比较（±s，mg/L）

表3　两组患者手术前后免疫球蛋白变化比较（±s，mg/L）

注：*与术前比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；#与对照组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）

组别　n　IgA　IgG　IgM腹腔镜组30术前术后3 d术后7 d F值P对照组30术前术后3 d术后7 d F值P 152.42±11.51 148.34±18.93*150.21±15.42 3.236 ＜0.05 153.06±12.68 147.33±17.36*152.28±13.75 2.873 ＜0.05 173.54±10.52 163.56±13.81*170.32±22.61 3.872 ＜0.05 172.12±14.33 161.39±16.04*169.37±17.03 2.763 ＜0.05 138.21±13.46 126.28±14.39*#135.95±11.65#2.398 ＜0.05 137.25±18.65 110.12±13.25*118.31±17.59*2.136 ＜0.05

综上，腹腔镜贲门癌手术在对hs-CRP及T淋巴细胞亚群与免疫球蛋白的变化较开腹手术变化小，对机体的免疫抑制轻，能更好地保护患者的免疫功能，且可以减轻术后急性期反应，有效避免术后因免疫导致的感染等并发症的发生，有利于促进患者术后尽快恢复［21］。

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［中图分类号］R735.2

［文献标识码］A

［文章编号］1673-9701（2016）13-0012-04

［基金项目］浙江省医药卫生科技计划项目（2010ZHB004）

收稿日期：（2016-01-04）

Influencing mechanism research of laparoscopic cardiac cancer surgery on hs-CRP，T lymphocyte subsets and immune globulin

WANG ZhiyanCHEN TingWANG YongWU Biao
Department of Surgery，Yinzhou Second Hospital of Ningbo City，Ningbo315100，China

［Abstract］Objectives To explore the influence of laparoscopic cardiac cancer surgery on hs-CRP，T lymphocyte subsets and immune globulin of patients.Methods 60 patients with cardiac cancer treated in our hospital from December 2009 to December 2015 were selected and divided according to operation methods into two groups：the laparoscope group（30 patients）and the open surgery group（30 patients）.The changes of levels of hs-CRP，regulatory T cell，and immune globulin were compared between two groups.Results The level of hs-CRP was significantly lower in the laparoscope group than in the open surgery group at 3 days and 7 days after operation.In the laparoscope group，the activity of CD3+，CD4+，CD4+/CD8+in peripheral blood recovered nearly to that before operation at 7 days after operation （P＞0.05），and the control group was significantly lower than that in laparoscope group（P＜0.05）.The levels of IgM in the control group at 3 days and 7 days after operation were respectively significantly lower than those in the laparoscope group（P＜0.05）.Conclusion Laparoscopic cardiac cancer surgery leads to slighter changes in hs-CRP，T lymphocyte subsets and immune globulin levels and immunosuppression than open surgery does，thus can protect the immunity function of patients and relieve reactions at acute phase after surgery，effectively avoiding complications such as infection that may be caused by immunosuppression and facilitating rehabilitation of patients after operation.

［Key words］Laparoscopic surgery；Cardiac cancer；Hs-CRP；T lymphocyte subsets；Immune globulin