外周血T淋巴细胞亚群与免疫球蛋白检测对肺癌病情监测及预后评价意义

谭江峡

[摘 要] 目的：探讨外周血T淋巴细胞亚群与免疫球蛋白检测在肺癌病情监测、预后评估中作用。方法：选择87例肺癌患者、70例肺部良性肿瘤患者和50例健康人群分别作为研究组、良性组和对照组；比较各组外周血T淋巴细胞亚群变化水平和免疫球蛋白含量。结果：研究组CD4+ CD25+、IgG、IgA水平显著高于良性组和对照组（P<0.05），CD8+ CD28+水平显著低于良性组和对照组（P<0.05）；研究组和良性组IgM显著高于对照组（P<0.05）。T淋巴细胞亚群水平与病理类型无关（P>0.05），与TMN分期、淋巴转移有关（P<0.05）；相关性分析显示肺癌患者外周血CD4+ CD25+细胞与IgG、IgA呈正相关关系（P<0.05），与CD8+ CD28+呈负相关关系（P<0.05）。结论：肺癌患者外周血T淋巴细胞亚群水平和免疫球蛋白含量检测，能够作为评估肺癌病情、预后的指标之一。

[关键词] T淋巴细胞亚群；免疫球蛋白；肺癌；预后

中图分类号：R713 文献标识码：B 文章编号：2095-5200（2015）03-090-03

现代研究已证实，免疫功能在肿瘤的发生、发展中起着重要作用[1-2]。T淋巴细胞是体内重要的免疫系统。研究显示[3]T淋巴细胞的活化需要CD4、CD25、CD8、CD28的调节，这些调节性T淋巴细胞具有低反应性和免疫抑制性等特点，在肿瘤细胞的发生、发展及预后中发挥着重要作用。免疫球蛋白与T淋巴细胞一样，也是机体的重要防疫系统，相较于细胞免疫，体液免疫作用机制更为复杂。本研究通过分析肺癌患者外周血T淋巴细胞和免疫球蛋白的变化水平，探讨其在肺癌病情、预后评估中价值，现将研究成果总结如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2011年7月至2013年12月我院收治的肺癌患者，纳入标准：⑴经病理学、影像学检测确诊的初次原发性肺癌患者；⑵就诊前未进行相关抗肿瘤治疗；⑶近3个月内未使用免疫抑制剂；⑷取得患者知情。排除标准：⑴原发病灶为肺部以外的器官；⑵有严重并发症者；⑶心、肾、肝等器官功能异常者。经过筛选，87例患者符合标准，其中男51例，女36例；年龄28～69岁，平均（48.5±7.4）岁。病理分型腺癌47例，鳞癌29例，小细胞癌11例；按照肿瘤TMN分期：Ⅱ期27例，Ⅲ期43例，Ⅳ期17例；其中伴有淋巴转移者47例。选取同期在我院治疗的肺部良性肿瘤患者70例作为良性组，男43例，女27例；年龄31～74岁，平均（50.1±8.3）岁；其中肺血管瘤38例，炎性假瘤26例，肺错构瘤6例。另调取同期在我院体检的健康人群50例为对照组，男31例，女19例；年龄18～79岁，平均（49.7±9.1）岁。三组患者在性别、年龄等一般资料具有可比性（P>0.05）。

1.2 仪器与试剂

FITC标记的鼠抗人CD4单克隆抗体、PE标记的鼠抗人CD25单克隆抗体、PE标记的鼠抗人CD8、CD28单克隆抗体均购自美国Becton Dickinson公司；仪器为BD FACSCalibur流式细胞仪；溶血剂购自杭州康树生物技术有限公司；贝克曼库尔特IMMAGE 800特定蛋白分析仪。

1.3 检测方法

清晨空腹抽取各组研究对象外周静脉血3mL，放入抗凝管中，混匀后置于冰箱中保存待检。检测时取100μL全血，加入10μL CD4抗体、10μL CD25抗体、2μLCD8抗体，2μLCD28抗体，室温避光混匀15min，再加入2mL溶血剂，37℃溶解10min后立即上机检测；圈定淋巴细胞为门内细胞，要求每次获取10000以上门内细胞，计算CD4+ CD25+、CD8+ CD28+比值。另抽取患者全血3mL，高速离心分离血清，标记后放入冰箱保存待检。采用免疫散射比浊法测定血清免疫球蛋白含量，包括IgG、IgA和IgM。

1.4 统计学方法

所有研究数据采用SPSS 17.0统计学软件包进行统计分析，计量资料以x±s表示，独立样本采用t检验分析样本间差异，相关性采用Pearson检验，以P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 三组T淋巴细胞亚群与免疫球蛋白水平比较

研究组CD4+ CD25+、IgG、IgA水平显著高于良性组和对照组（P<0.05），CD8+ CD28+水平显著低于良性组和对照组（P<0.05）；研究组和良性组IgM显著高于对照组，而研究组和良性组组间IgM水平相比差异无统计学意义（P>0.05），见表1。

2.2 肺癌患者外周血T淋巴细胞亚群水平与临床病理参数关系

T淋巴细胞亚群水平与病理类型无关（P>0.05），与TMN分期、淋巴转移有关（P<0.05）；其中随着肺癌浸润程度加深，CD4+ CD25+水平逐渐升高，CD8+ CD28+水平逐渐降低；有淋巴转移者CD4+ CD25+水平较高、CD8+ CD28+水平较低，见表2。

2.3 CD4+ CD25+与CD8+ CD28+、免疫球蛋白相关性分析

肺癌患者外周血CD4+ CD25+细胞与IgG、IgA呈正相关关系（P<0.05），与CD8+ CD28+呈负相关关系（P<0.05），与IgM无明显相关性（P>0.05），见表3。

3 讨论

肿瘤患者机体多伴有免疫功能异常，在肿瘤免疫中，细胞免疫和体液免疫均发挥着重要作用[4]。其中细胞免疫主要通过各T淋巴细胞亚群调节机体的各项免疫功能。根据表面抗原，可以将T淋巴细胞分为CD4亚群和CD8亚群[5-7]；薛旦旦[8]报道证实，CD8+ CD28+在病毒感染和肿瘤抵抗中起着重要作用，并承担着机体免疫监控和免疫防御作用。李敏[9]在研究中称CD4+ CD25+能够促进细胞凋亡、抑制细胞增殖，在肿瘤免疫监视、维持细胞稳定性方面有着重要作用。

本研究中，研究组CD4+ CD25+水平显著高于良性组和对照组，CD8+ CD28+水平显著低于良性组和对照组，说明在肺癌的发生、发展中，机体的免疫系统发生了变化，整体处于免疫抑制作用，这与Critchley[10]报道结论相同。免疫球蛋白作为机体防御系统重要部分，在肿瘤监视中，免疫球蛋白主要起到溶解、吞噬靶细胞作用[11-12]。本研究对肿瘤患者血清免疫球蛋白进行检测后发现，研究组IgG、IgA水平显著高于良性组和对照组。免疫球蛋白属于体液免疫，该免疫系统作用机制较为复杂，目前对其机制尚不完全清楚。本研究免疫球蛋白水平升高可能与机体产生肿瘤抗原有关，也可能是体液免疫作为肿瘤细胞免疫功能低下的代偿作用[13]；我们对肺癌患者外周血T淋巴细胞亚群水平与临床病理参数的关系进行探讨后发现，T淋巴细胞亚群水平与TMN分期、淋巴转移有关，而与病理类型无关。随着肺癌分期增加，CD4+ CD25+水平逐渐升高，CD8+ CD28+水平逐渐降低；且有淋巴转移者CD4+ CD25+水平较高、CD8+ CD28+水平较低。这说明T淋巴细胞状态与肺癌病情的进展及预后密切相关。我们推测可能是肺癌病情加重，肿瘤细胞增多，机体细胞因子的调节作用会使免疫抑制状态越来越明显[14]。相关性分析也显示肺癌患者外周血CD4+ CD25+细胞与IgG、IgA呈正相关，与CD8+ CD28+呈正相关，这也提示我们，可以通过检测患者外周血T淋巴细胞作为评估肺癌病情的指标之一。

综上所述，肺癌患者外周血T淋巴细胞亚群水平和免疫球蛋白含量检测，能够作为评估肺癌病情、预后的指标；根据患者免疫状态，制定相应治疗方案，对评估疗效和预后具有重要作用。

参 考 文 献

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