进展期白癜风患者治疗后血清中 sICAM-1、IFN-γ的变化

丁敏，张建中，杜鹃（.江苏省徐州市中心医院，徐州　009；.北京大学人民医院，北京　00044）



进展期白癜风患者治疗后血清中 sICAM-1、IFN-γ的变化

丁敏1，张建中2，杜鹃2
（1.江苏省徐州市中心医院，徐州221009；2.北京大学人民医院，北京100044）

摘要：目的探讨进展期白癜风患者治疗后血清中可溶性细胞间黏附分子-1（sICAM-1）、干扰素-γ（IFN-γ）水平的变化及临床意义。方法收集33例进展期白癜风患者作为治疗组，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测患者血清中sICAM-1、IFN-γ水平，并与20例稳定期白癜风患者及20例健康人对照；33例进展期白癜风患者均给予综合治疗，总疗程为16周，疗程结束后评定疗效并再次检测血清sICAM-1、IFN-γ水平。结果进展期白癜风患者血清sICAM-1、IFN-γ平均水平明显高于稳定期白癜风患者及正常人，差异有统计学意义；稳定期白癜风患者血清sICAM-1、IFN-γ平均水平与正常人比较差异无统计学意义；治疗后进展期白癜风患者血清sICAM-1、IFN-γ平均水平较治疗前明显降低，差异有统计学意义；治疗有效组进展期白癜风患者治疗后血清sICAM-1、IFN-γ降低程度高于治疗无效组，差异有统计学意义。结论白癜风患者血清sICAM-1、IFN-γ可反映疾病活动性，其水平变化可能与进展期白癜风的转归及临床疗效相关。

关键词：进展期白癜风；可溶性细胞间黏附分子-1；干扰素-γ

白癜风是一种较常见的色素脱失性疾病，其病因及发病机制目前尚未完全清楚，多数学者认为白癜风是一种多因性疾病，包括遗传、自身免疫、精神与情感压力、神经内分泌因素等［1］，体液免疫和细胞免疫对黑素细胞的破坏在白癜风形成中起重要作用。研究表明细胞因子与白癜风密切相关，ICAM-1可促进白细胞与黑素细胞黏附，在白细胞接触依赖性免疫反应过程中具有重要作用，而IFN-γ可加强黑素细胞sICAM-1的表达，参与破坏黑素细胞，两者均与白癜风病情有关［2］。本研究通过检测进展期白癜风患者治疗前后血清sICAM-1、IFN-γ的水平，探讨其可能的免疫机制及临床意义，以期为临床治疗提供指导。

1　资料与方法

1.1临床资料白癜风患者均来自我院皮肤科门诊，其中33例进展期白癜风患者，20例稳定期白癜风患者，所有患者的诊断和分型均符合2003年中西医结合学会皮肤病专业委员会色素病学组颁布的白癜风临床诊断分型标准修订版［3］，均为寻常型。33例进展期白癜风患者，其中男18例，女15例，平均年龄28岁（13～53岁），病程平均为20个月（4个月～21年）；稳定期白癜风患者20例，其中男9例，女11例，平均年龄27岁（15～51岁），病程平均为15个月（6个月～17年）；近1个月内未进行过系统性或局部治疗。排除标准：孕妇及哺乳期妇女；有严重心、肝、肾及其他严重器质性疾病者；光敏性皮肤病患者、白内障患者等；对紫外线过敏者；治疗前1个月内接受过光疗、全身或局部使用过糖皮质激素、免疫抑制剂者。正常人对照组20例，为体检健康者，无自身免疫性疾病家族史，其中男11例，女9例。平均年龄23岁（12～46岁）。无心、肝、肺、肾等主要脏器疾患，肝、肾功能检查正常，亦无皮肤疾患。正常人对照组与白癜风患者组在性别和年龄构成上差异无统计学意义。所有患者均获得知情同意。

1.2方法

1.2.1治疗方法治疗组患者给予卤米松乳膏，适量局部外用，2次/d；口服驱白巴布期片3粒/次，3次/d；甲泼尼龙片3片每日早晨顿服，见效后每月递减5 mg；总疗程为16周。疗效观察：每4周观察评价1次疗效，观察色素沉着时间、色素生长占皮损的面积。疗程结束后评定疗效。血清标本收集：抽取治疗前进展期白癜风患者及正常人对照组外周血4 mL，分离血清置-20℃冰箱保存。

1.2.2疗效评价依据中国中西医结合学会皮肤性病专业委员会色素病学组制定的《白癜风临床分型及疗效标准》［3］，痊愈：白斑全部消退，恢复正常肤色；显效：白斑部分消退或缩小，恢复正常肤色的面积占皮损面积≥50%；好转：白斑部分消退或缩小，恢复正常肤色的面积占皮损面积的10%～49%；无效：白斑无色素再生或缩小，恢复正常肤色的面积占皮损面积＜10%。有效率=（痊愈例数+显效例数）/治疗例数×100%。

1.2.3酶联免疫吸附法测定血清sICAM-1、IFN-γ sICAM-1、IFN-γ酶免试剂盒为加拿大HCG公司产品，购于南京森贝伽生物技术公司。检测按照ELISA试剂盒说明书进行操作。以标准品浓度为X轴，对应的A值为Y轴，建立sICAM-1、IFN-γ标准曲线，根据标准曲线求得样品测定浓度，乘以稀释倍数即为待测血清的sICAM-1、IFN-γ质量浓度（ng/L）。步骤如下：样本复融，1 000转/min离心5 min，取上清液。分别在sICAM-1、IFN-γ的酶标板上，加待测标本50 μL，充分混匀后置37℃，45 min。每次加抗体前用洗涤液洗板4次，并在滤纸上甩干，先加入第一抗体工作液，将反应板充分混匀后置37℃35 min，再加入酶标抗体工作液，将反应板充分混匀后置37℃15 min，然后加底物工作液50 μL，置37℃暗处反应15 min，加入终止液混匀，450 nm处测吸光度值。根据标准曲线计算出每管组织液中sICAM-1、INF-γ的浓度。所有标本均用双孔检测，数值取复孔均值。

1.3统计学处理采用SPSS16.0进行统计学分析，结果用均数±标准差表示，成组计量资料采用t检验，P＜0.05差异具有统计学意义。

2　结果

2.1血清sICAM-1、IFN-γ检测结果治疗前进展期白癜风患者血清中的sICAM-1以及IFN-γ的平均水平高于稳定期白癜风患者，差异有统计学意义（t值分别为3.381、3.015，P＜0.01），同时也高于正常对照组，差异有统计学意义（t值分别为3.904、3.376，P＜0.01），而稳定期白癜风患者与正常对照组相比，血清中的sICAM-1以及IFN-γ的平均水平差异无统计学意义（t值分别为0.894、1.136，P＞0.05），见表1。

表1　白癜风患者与正常对照组血清sICAM-1、IFN-γ的检测　（±s）

表1　白癜风患者与正常对照组血清sICAM-1、IFN-γ的检测　（±s）

注：*与健康对照组比较，P＜0.01；**进展期白癜风与稳定期白癜风比较，P＜0.01。

组别　n　sICAM-1（ng/L）　IFN-γ（ng/L）稳定期白癜风　20　90.54±10.12**　71.92±13.44**进展期白癜风　33　199.43±17.26*　119.92±18.15*正常对照　20　81.78±9.24　60.83±11.57

进展期白癜风患者治疗后血清sICAM-1以及IFN-γ的平均水平与治疗前相比明显降低，差异有统计学意义（P＜0.01），见表2。

表2　进展期白癜风治疗前后血清sICAM-1、IFN-γ的检测　（±s）

表2　进展期白癜风治疗前后血清sICAM-1、IFN-γ的检测　（±s）

**P＜0.01。

n组别治疗前治疗后t 33 33 sICAM-1（ng/L）　IFN-γ（ng/L）199.43±17.26　119.92±13.15 98.28±12.69　80.53±7.63 3.277**　2.971**

2.2与疗效的相关性进展期白癜风患者治疗后痊愈7例，显效15例，好转7例，无效4例，治疗后有22例患者有效，有效率66.67%。治疗有效组治疗前后血清sICAM-1以及IFN-γ降低的程度高于无效组，差异有统计学意义（P＜0.01）。见表3。

表3　进展期白癜风患者治疗前后有效组和无效组血清sICAM-1、IFN-γ的变化　（±s）

表3　进展期白癜风患者治疗前后有效组和无效组血清sICAM-1、IFN-γ的变化　（±s）

**P＜0.01。

组别　n　sICAM-1（ng/L）　IFN-γ（ng/L）有效组　22　185.07±18.72　79.13±8.14无效组　11　82.76±10.01　30.25±4.65 t 4.972**　4.509**

3　讨论

sICAM-1在免疫和炎症反应中发挥重要作用。有研究证明sICAM-1是中性粒细胞与黑素细胞黏附的必需因子，在抗原的递呈和T细胞的活化过程中起重要作用，可促进淋巴细胞与黑素细胞黏附，从而导致黑素细胞破坏。IFN-γ是最早发现的细胞因子，其可加强黑素细胞sICAM-1的表达。此外，IFN-γ还是诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的诱导因子，iNOS通过产生大量NO引起黑素细胞自身破坏并导致皮肤色素脱失［4］。Pearl等［5］研究表明IFN-γ是细胞凋亡（Apoptosis）的介质，并可能参与了黑素细胞的破坏机制。IFN-γ可导致黑素细胞形态学明显改变，使其对免疫损伤更为敏感继而显著抑制黑素细胞增殖及降低酪氨酸酶活性。

笔者发现进展期白癜风患者血清中sICAM-1、IFN-γ浓度比稳定期白癜风患者及正常人显著增高，但稳定期与正常对照组的sICAM-1、IFN-γ浓度无显著差异，与斯拉甫·艾白等［6］的研究结果一致。洪为松等［7］的研究也表明白癜风患者血清中sICAM-1浓度明显增高，与正常对照组比较差异有统计学意义，且sICAM-1浓度进展期显著高于稳定期，稳定期与正常对照组的sICAM-1浓度无显著差异。Abdallah等［8］研究提示sICAM-1异常高表达可能引起局部微环境的改变，致使黑素细胞的破坏，其整体水平可能与移植疗效有关。白癜风治疗比较困难，进展期白癜风通常给予外用糖皮质激素或其他免疫调节剂，系统使用小剂量糖皮质激素、局部光疗和中医中药等［9］，患者治疗有效后其机体免疫功能随之改善恢复，Hwang等［10］研究发现在活动性白癜风患者血清中sICAM-1水平明显高于正常人，糖皮质激素治疗有效。笔者发现进展期白癜风患者治疗后血清sICAM-1、IFN-γ平均水平比治疗前明显降低，说明临床改善后病情相关的免疫指标也得到改善，患者免疫功能得到一定恢复，提示某些免疫指标与临床转归具有一定相关性。本研究治疗有效组的进展期白癜风患者治疗后血清sICAM-1、IFN-γ的水平明显降低，降低程度高于治疗无效组（P＜0.01），提示进展期白癜风患者治疗后临床疗效与治疗后sICAM-1、IFN-γ水平变化程度可能有关，推测免疫因素在疗效不佳的患者中可能不是主要致病因素。胡晶晶等［11］的研究发现稳定期白癜风患者经表皮移植后失败组白斑区sICAM-1的浓度明显高于成功组，认为局部sICAM-1高水平表达可能与移植疗效有关，也提示了白斑区sICAM-1高表达的患者给予免疫治疗下调sICAM-1水平，再行表皮移植可能会有更好的疗效。我们的研究提示某些免疫指标的检测可反应白癜风患者病情稳定与否，其水平变化可能与进展期白癜风的转归及临床疗效相关，可能为指导临床治疗提供一定的依据。

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Changes of Serum Soluble Intercellular Adhesion Molecule-1 and Interferon-γ after Treatment in Active Vitiligo Patients

DING Min1，ZHANG Jianzhong2，DU Juan2
1.The Center Hospital of Xuzhou，Xuzhou 221009，China；2.Peking University People's Hospital，Beijing 100044，China

Abstract:ObjectiveIn order to investigate the changes and clinical significance of serum soluble intercellular adhesion molecule-1（sICAM-1）and interferon-γ（IFN-γ）in active vitiligo patients before and after treatments.MethodsThirty-three patients with active vitiligo were included in this study as treatment group.Enzyme-linked immunosorbent assay（ELISA）was used to detectthe levels ofsICAM-1 and IFN-γ in serum，and then compared with 20 patients with stable vitiligo and 20 healthy controls.Thirty-three patients with active vitiligo were received integrated therapy.Treatment regimens were performed for 16 weeks.Clinical efficacy was evaluated at the end of the study.The levels of sICAM-1 and IFN-γ in serum were detected again. ResultsThe expression of sICAM-1 and IFN-γ was higher in active vitiligo patients than in stable vitiligo patients as well as in healthy controls.There was no significant difference in the serum level of sICAM-1 and IFN-γ between patients with stable vitiligo and the healthy controls.After the treatment，the expression of sICAM-1 and IFN-γ was decreased compared with that of before treatment.Among 33 patients，the variations of sICAM-1 and IFN-γ after treatment was significantly bigger in those patients who responded successfully than in those patients who responded poorly.ConclusionThe expression of sICAM-1 and IFN-γ reflects the activity of vitiligo.The variations of serum levels of sICAM-1 and IFN-γ have a correlation with the outcomes and efficacy in active vitiligo.

Key words:Active vitiligo；Soluble intercellular adhesion molecule-1；Interferon-γ

中图分类号：R758.4+1

文献标识码：A

文章编号：1672-0709（2016）01-0034-03

收稿日期：（2015-02-14）