陕西省某羊场简阳大耳山羊球虫感染情况调查及种类鉴定

涂宜强，简永利，高永安

(温州科技职业学院，浙江温州 325006)



陕西省某羊场简阳大耳山羊球虫感染情况调查及种类鉴定

涂宜强，简永利，高永安

(温州科技职业学院，浙江温州 325006)

摘要：为了解陕西省某简阳大耳山羊场球虫种类和感染情况，采集不同年龄段简阳大耳山羊新鲜粪便55份，用形态学方法并结合麦克马斯特虫卵计数法(McMaster's method)对该场简阳大耳山羊球虫进行种类鉴定和感染情况调查。结果表明，大耳山羊球虫总感染率为92.7%，其中3月龄～7月龄、10月龄～12月龄、3岁山羊球虫检出率分别为100%、90%和86.7%，各年龄段平均OPG值为3 300、1 050、854。共鉴定出8种山羊球虫，其中阿氏艾美耳球虫(Eimeriaarloingi)、雅氏艾美耳球虫(E.ninakohlyakimovae)和艾氏艾美耳球虫(E.alijevi)为该羊场优势虫种。

关键词：大耳山羊；球虫；种类;感染

山羊球虫病是由艾美耳科(Eimeriidae)艾美耳属(Eimeria)球虫寄生于肠道上皮细胞内而引起的一种寄生性原虫病[1]，也是山羊最为常见、危害最为严重的疾病之一。可感染山羊的球虫种类众多，分布广泛。球虫种类的鉴定主要依据卵囊大小、形态、形状指数等形态学特征[2]。根据文献报道，已经确定寄生于山羊的球虫有13个种[3]，其中致病力最强的为雅氏艾美耳球虫(Eimerianinakohlyakimovae)，其次为阿氏艾美耳球虫(E.arloingi)。有研究表明，山羊感染球虫后常出现消瘦、贫血、下痢、发育迟缓等症状，本病对羔羊的危害较大，1月龄～3月龄的羔羊最为易感，感染率高达100%，羔羊病死率可达58%[4-5]；成年羊多表现为慢性亚临床感染状态，但会持续不断向外界环境散布大量球虫卵囊，成为重要的传染源。此外，球虫的寄生与增殖常常使宿主肠道黏膜的完整性遭受严重损伤，大大降低宿主免疫力，给其他病原微生物的感染创造了诱因。因而严重影响羊的产奶、肉品质以及皮毛等生产性能[6]。对黑龙江、西藏、福建、陕西、广西等地区进行的山羊球虫的种类和感染情况调查研究[5,7-11]，结果显示，不同地区山羊球虫感染种类、流行虫种和感染情况存在较大差异。因此，山羊球虫病严重制约着养羊业的健康发展。

简阳大耳山羊是由进口的努比亚山羊与四川简阳本地山羊杂交形成的优良山羊品种，具有耐粗食、体型大、繁殖力强、生长速度快等特点，饲养量逐年增加。目前尚未见有关简阳大耳山羊球虫感染情况的研究报道。因此，本研究以陕西省某羊场养殖的简阳大耳山羊为研究对象，采集不同年龄段的简阳大耳山羊新鲜粪便55份，通过饱和盐水漂浮法以及形态学方法明确简阳大耳山羊球虫感染情况和球虫种类，以期为该羊场球虫病的有效防治提供依据。

1材料与方法

1.1材料

1.1.1试剂饱和食盐水溶液，25 g/L重铬酸钾溶液，生理盐水。

1.1.2试验器材SHIMADZU-AUY220型电子天平，L-550低速台式离心机(长沙湘仪)，Motic AE31倒置显微镜，HH-B11型电热恒温培 养箱(上海医疗器械七厂)，60目铜筛，冰箱，铁丝圈，离心管，三角瓶，载玻片，盖玻片，计数器。

1.2方法

1.2.1样品采集采集陕西省某大耳羊场不同年龄段大耳羊的新鲜粪便55份(3月龄～7月龄20份、10月～12月份20份、36月龄种羊15份)，分装于15mL离心管并加入25 g/L重铬酸钾溶液，详细标记年龄、采集时间、粪便形态等信息，置于4℃冰箱保存备用。

1.2.2卵囊检测与计数采用饱和盐水漂浮法对粪便样品进行检查，采用马克马斯特计数法测定每克粪便的球虫卵囊数(OPG)。

1.2.3卵囊的分离和培养卵囊的分离参照索勋等[12]描述的方法进行。取大耳山羊新鲜粪样5 g，加水研碎并充分混匀后经80目铜筛过滤，滤液3 000 r/min离心10 min，弃上清，沉淀用饱和盐水混匀后经2 000 r/min离心10 min，取上清液并用5倍体积的纯净水稀释，然后3 000 r/min离心10 min，并取少量沉淀进行显微镜检查。分离到的卵囊保存于25 g/L重铬酸钾溶液中，放入28℃温箱培养72 h，期间每隔6 h吹打1次，待85%球虫卵囊孢子化后，于4℃冰箱保存备用。

1.2.4球虫种类的鉴定孢子化球虫卵囊于400倍光学显微镜下观察，随机测量100个孢子化卵囊，根据卵囊的大小、形态、形状指数、颜色、极帽、卵膜孔、卵囊残体以及斯氏体等形态学特征结合测量数据和文献资料进行球虫种类鉴定[5,8,10]。

2结果

2.1大耳山羊球虫感染情况

本次调查结果表明，球虫检测出率为92.5%(51/55)，说明本羊场球虫感染率较高。从表1可以看出，3月龄～7月龄小羊球虫感染率最高，达100%(20/20)，次之为10月龄～12月龄山羊，感染率为90.0%(18/20)，3岁种山羊的球虫感染率最低，为86.7%(13/15)。此外，根据各年龄段大耳山羊球虫感染强度的统计分析，结果显示，3月龄～7月龄山羊的OPG值为3 300，感染强度最大，且远远大于OPG值为854的3岁种山羊。由此可见，羔羊对球虫的易感性最高，感染强度也最大，这与以前文献资料报道相一致[4,9-10]。

2.2球虫种类鉴定

本研究对粪便中的球虫卵囊进行分离、孢子化，然后通过形态学方法，初步鉴定出8种艾美耳球虫，分别为阿氏艾美耳球虫(E.arloingi) 、艾氏艾美耳球虫(E.alijevi)、羊艾美耳球虫(E.caprovina)、雅氏艾美耳球虫(E.ninakohlyakimovae)、克氏艾美耳球虫(E.christenseni)、家山羊艾美耳球虫(E.hirci)和约氏艾美耳球虫(E.jolchijevi)。山羊各种球虫卵囊特征和形态观察结果见图1和表2。通过随机对100个孢子化卵囊观察测量后进行统计分析，结果表明本羊场大耳山羊的优势虫种为阿氏艾美耳球虫(32%)、雅氏艾美耳球虫(27%)及艾氏艾美耳球虫(23%)。

表1　各年龄段简阳大耳山羊球虫感染情况

a. 阿氏艾美耳球虫；b. 艾氏艾美耳球虫；c. 山羊艾美耳球虫；d. 雅氏艾美耳球虫；e. 羊艾美耳球虫；f. 家山羊艾美耳球虫；g. 克氏艾美耳球虫；h. 约氏艾美耳球虫

a.E.arloingi；b.E.alijevi；c.E.caprina；d.E.ninakohlyakimovae；e.E.caprovina；f.E.hirci；g.E.christenseni；h.E.jolchijevi

图1某羊场大耳羊8种孢子化的艾美球虫卵囊形态

Fig.1The morphology of eight species of sporulated oocysts in dear goats

表2　大耳山羊感染的球虫种类及形态学特征

注：“+”表示有；“-”表示无。

Note：“+”means positive；“-”means negative.

3讨论

山羊球虫病呈世界性分布，迄今公认寄生于山羊的艾美耳球虫有13种[3，12]。山羊球虫的感染种类、感染率以及优势种因地区不同而存在差异性。夏晨阳等[8]报道西藏尼木县山羊球虫感染率为91.16%，鉴别出9种艾美耳球虫，优势虫种为阿氏艾美耳球虫、山羊艾美耳球虫、雅氏艾美耳球虫、约氏艾美耳球虫；陶立等[10]则报道广西地区山羊球虫感染率为86.68%，鉴别出10种球虫，优势虫种为阿氏艾美耳球虫、雅氏艾美耳球虫、阿普艾美耳球虫、克氏艾美耳球虫、约氏艾美耳球虫；Wang C R等[7]报道我国黑龙江地区山羊球虫感染率为87.9%，鉴别出5种球虫，克氏艾美耳球虫、艾氏艾美耳球虫和山羊艾美耳球虫为该地区优势虫种。本研究结果表明，该羊场大耳山羊球虫平均感染率为92.5%，初步鉴定出山羊艾美耳球虫8种，优势虫种是阿氏艾美耳球虫、雅氏艾美耳球虫和艾氏艾美耳球虫。

进一步研究结果显示，本场各年龄段大耳羊球虫均具有较高的感染率，且呈现多种球虫的混合感染状态。相比较而言，3～7月龄羔羊无论是感染率(100%)还是感染强度(OPG值为3 300)都远远大于3岁种山羊(感染率为86.7%， OPG值为854)，这与此前的相关报道相一致[4，9-10]。有研究表明， OPG值超过5 000时山羊才会表现出明显的临床症状[4]，因此，本场羊只虽未出现明显的球虫感染症状，但较高的感染率和感染强度，很可能是造成该场羊只瘦弱、采食不佳、体重增长缓慢等情况的原因之一。

综上所述，尽管山羊球虫感染较为普遍，但临床多为隐性感染，这使在山羊的养殖过程中常常忽视了球虫病的防控，造成羊只体重增长缓慢，生产性能降低，使养殖成本大大增加，从而影响了养羊业的健康发展。因此，建议该羊场应该根据实际情况，制定相应的驱虫计划、科学合理使用抗球虫药物、加强饲养管理以及提高动物抵抗力，积极主动预防控制球虫病的发生[5-6，14-15]。

参考文献:

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Investigation on Coccidian Infections and Identification on Species of Jianyang Daer Goats in a Goat Farm of Shaanxi Province

TU Yi-qiang, JIAN Yong-li, GAO Yong-an

(WenzhouVocationalCollegeofScienceandTechnology,Wenzhou，Zhejiang,325006,China)

Abstract:In order to investigate species and prevalence ofEimeriainfections in a Jianyang daer goat farm of Shaanxi province,55 fresh fecal samples were collected from different ages of Jianyang daer goats and examined by McMaster′s and morphology method for infection status and oocyst species. The results showed that the average infection rate of coccidia in goats was 92.7%,the prevalences of coccidian oocysts in 3-7 month goats,10-12month goats and 3years old goats were 100%,90% and 86.7%,respectively.The average numbers of oocysts per gramme feces (OPG) were 3 300,1 050 and 854 in the three age groups, respectively.Eight species were identified from oocyst-positive samples, the predominant species wereE.arloingi,E.ninakohlyakimovaeandE.alijeviin this goat farm.

Key words:Jianyang daer goat; coccidia; species;infection

收稿日期：2016-01-29

作者简介：涂宜强(1979-)，男，浙江温州人，讲师，硕士，主要从事动物疫病防治与寄生虫学研究。

中图分类号:S852.723

文献标识码:B

文章编号:1007-5038(2016)06-0132-04