丹参酮 IIA 磺酸钠静脉注射对脊髓损伤大鼠神经功能恢复的影响

杨永栋 俞兴 高誉珊



丹参酮 IIA 磺酸钠静脉注射对脊髓损伤大鼠神经功能恢复的影响

杨永栋 俞兴 高誉珊

【摘要】目的 探索丹参酮 IIA 对脊髓挫伤大鼠后肢神经功能恢复的影响及其作用机制。方法 将45 只 SD 大鼠随机分为4组（对照组、模型组、丹参酮IIA组、甲泼尼龙组）：对照组（仅切除椎板，尾静脉注射生理盐水 1ml/天，连续 7 天）。模型组（使用 NYU 脊髓打击器选择25mm高度造成T9脊髓节段挫伤，术后予尾静脉注射生理盐水1ml/天，连续7天）。丹参酮IIA组（造模成功后即刻予尾静脉注射丹参酮 IIA 磺酸钠注射液20mg/kg/天，连续给药7天）。甲泼尼龙组（造模成功后即刻予尾静脉注射甲泼尼龙 30 mg/kg，仅给药1次）。采用旷场实验 [Basso，Beattie，and Bresnahan（BBB）open field locomotor test]和热板实验评价各组大鼠后肢神经功能的恢复。在术后1、4、8周进行心脏灌注固定并取材 T9脊髓，HE染色、尼氏染色观察挫伤脊髓局部组织结构的变化，同时通过免疫组化法标记各组脊髓中的巨噬/小胶质细胞。结果（1）术后3天，丹参酮IIA组（1.91±0.31）和甲泼尼龙组（3.10±0.41）大鼠后肢运动功能较模型组（0.89±0.26）都有显著改善，且甲泼尼龙组改善更明显（P＜0.05）；至术后8周，甲泼尼龙组（17.00±0.41）运动功能改善仍然较丹参酮IIA组（15.50±0.43）更明显，差异有统计学意义（P＜0.05）；（2）术后3天，甲泼尼龙组（4.06±0.26）感觉功能恢复较丹参酮IIA组（4.59±0.71）快，差异有统计学意义（P＜0.05）；术后2周开始，丹参酮IIA组（3.06±0.13）表现出了比甲泼尼龙组（3.14±0.13）更明显的改善趋势，但差异无统计学意义（P＞0.05）；（3）术后1周，除对照组，余各治疗组部分巨噬/小胶质细胞形态由分支状变为杆状或圆状，其中丹参酮IIA组和甲泼尼龙组形态改变的细胞较少，丹参酮IIA组（11.61±2.64）和甲泼尼龙组（11.88±1.47）阳性细胞累积光密度（integrated optical density，IOD）较模型组（27.22±3.04）明显减少，差异有统计学意义（P＜0.05）；（4）术后8周，除对照组，余各组巨噬/小胶质细胞形态大部分转变为分枝状，其中丹参酮IIA组（2.89±0.12）和甲泼尼龙组（2.93±0.15）大鼠阳性细胞IOD较模型组（1.58±0.20）明显增加，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论（1）丹参酮IIA能够促进脊髓损伤大鼠后肢运动、感觉功能恢复；（2）丹参酮 IIA 能够促进巨噬/小胶质细胞对神经恢复的有利影响。

【关键词】丹参酮；脊髓损伤；神经胶质；神经系统

脊髓损伤的病理机制包括原发性损伤和继发性损伤。原发性损伤仅局限于特定的区域，主要表现为急性出血和局部缺血。而继发性损伤以神经元和胶质细胞的破坏为特征，导致了病变范围的明显扩大，进而影响到了脊髓的相邻节段。然而继发性损伤导致的后果在脊髓损伤后占主导地位。继发性损伤包括延迟事件如局部缺血，脂质降解，自由基形成，兴奋性毒性和蛋白酶释放，进而导致了脱髓鞘，轴突变性，神经元死亡，空洞形成，以及初始损伤区域形成神经胶质瘢痕。

既往的研究表明早期治疗可以改善神经功能的恢复[1]。迄今为止，还没有成熟的治疗方法能够对神经学的结果产生直接的治疗作用。近年来很多基础科学、实验研究和临床研究都致力于防止继发性损伤，促进再生[2]。

甲泼尼龙作为一种糖皮质激素，是目前临床上惟一被批准可用于脊髓损伤治疗的药物，但它并没有表现出显著的效果。与此同时，在临床使用过程中，甲泼尼龙在大剂量（30 mg/kg）静脉给药后常常会出现明显的副作用[3-4]，对体液与电解质，肌肉骨骼系统，消化道，皮肤等都产生严重影响。2015 年，笔者对就丹参酮 IIA 对脊髓挫伤大鼠后肢神经功能恢复的影响及其作用机制进行了研究，现报告如下。

材料与方法

一、实验动物与分组

SPF级成年雌性 SD（Sprague-Dawley）大鼠45 只，体重220～250g，由北京维通利华实验动物中心提供，饲养于东直门医院屏障环境动物房。3～4只一笼，予12h光照，水和食物无限制按时供应。随机分为4组（对照组、模型组、丹参酮IIA组、甲泼尼龙组）。对照组（仅切除椎板，尾静脉注射生理盐水1ml/天，连续7天）。模型组（使用NYU脊髓打击器选择25mm高度造成 T9脊髓节段挫伤，术后予尾静脉注射生理盐水 1 ml/天，连续7天）。丹参酮IIA组（造模成功后即刻予尾静脉注射丹参酮IIA磺酸钠注射液20mg/kg/天，连续给药7天）。甲泼尼龙组（造模成功后即刻予尾静脉注射甲泼尼龙30mg/kg，仅给药1次）。

二、主要试剂

苏木素、伊红染液，焦油紫染液（北京益利精细化学品有限公司）；兔抗鼠 Iba1 抗体（Wako，日本），即用型免疫组织化学 UltrasensitiveTMSP 试剂盒（福州迈新）。

三、损伤模型制作及取材

10%水合氯醛0.33ml/100g 腹腔注射麻醉，俯卧位固定后背部正中切口显露 T9～11椎板，咬除椎板后暴露 T9段脊髓，使用NYU脊髓打击器选择25mm的高度打击T9段脊髓背侧，逐层缝合切口。术后1、4、8周取材，麻醉后采用4%多聚甲醛经主动脉灌注固定，找到损伤脊髓节段后剪取5mm，后固定过夜后石蜡包埋。

四、神经功能评价

通过旷场实验 [Basso，Beattie，and Bresnahan（BBB）open field locomotor test]于术后1、3、7天，2、3、4周共6个时间点，评价大鼠后肢运动功能的恢复情况。采用热板实验法于术后3、7天，2、4周共4个时间点，记录大鼠后肢对热痛刺激的反应时间。

五、脊髓组织病理学观察

制作石蜡切片，以损伤部位为中心上下切取6μm、9μm厚切片各6片。6μm厚切片用于HE染色，9μm切片进行尼氏染色。光镜观察拍照后使用Image-Pro Plus（IPP）6.0病理分析软件测量各组大鼠脊髓背侧形成空洞面积，并计算出空洞面积占正常脊髓组织面积的比例，进行统计分析。

六、免疫组织化学检测脊髓组织中小胶质细胞

切片脱蜡至水，0.01M PBS 冲洗，枸橼酸热修复后0.01M PBS 冲洗，加H2O210min 阻断内源性过氧化物酶，0.01 M PBS 冲洗后加山羊血清10min后甩去，加一抗（anti-Iba1，1:1000）50μl，放入湿盒后4°冰箱过夜；0.01M PBS 冲洗后加二抗10min，0.01M PBS 洗净后加链霉菌抗生素蛋白-过氧化物酶 10 min，0.01 M PBS 冲洗后加 DAB显色，苏木素复染细胞核，乙醇逐级脱水后二甲苯透明，中性树胶封片。光镜观察并拍照，采用 IPP 6.0病理分析软件计数各组大鼠脊髓组织中阳性细胞的面积（area）、平均光密度（density）、累积光密度 IOD（integrated optical density），IOD=density（mean）* area，并进行统计分析。

七、统计学分析

采用 SPSS 20.0软件进行统计学分析，采用t检验进行对照组和各时间点实验组比较，P＜0.05 为差异有统计学意义。

结　　果

一、后肢运动功能评价结果

大鼠脊髓损伤后即出现后肢痉挛性瘫痪，随时间推移，后肢运动功能出现不同程度的恢复。和模型组相比，丹参酮IIA组和甲泼尼龙组大鼠后肢运动功能都有显著改善（P＜0.05），但甲泼尼龙组改善更明显（P＜0.05）（图1，表1）。

二、后肢感觉动能评价结果

脊髓损伤后大鼠足底对热痛刺激的感觉明显下降，反应时间较对照组显著增加。损伤后3天，模型组大鼠对热痛刺激的反应时间最长，丹参酮IIA组和甲泼尼龙组反应时间较模型组短，即感觉更敏感，且此时甲泼尼龙组较丹参酮 IIA 组更短，差异有统计学意义（P＜0.05）。损伤后7天，丹参酮IIA组和甲泼尼龙组对热痛刺激的反应时间越来越接近，在损伤后2～4周，丹参酮IIA组表现出比甲泼尼龙组反应时间更短的趋势，但差异无统计学意义（P＞0.05）。此外，模型组大鼠尽管反应时间一直较丹参酮IIA组和甲泼尼龙组长，但在损伤后2周内也较之前明显改善，在损伤后2～4周反应时间不断接近两个治疗组（图2，表2）。

三、脊髓损伤后4周各组大鼠脊髓组织病理学改变

图1　旷场实验Fig.1 Open feld locomotor test

表1　各组大鼠术后不同时间 BBB 评分（x- ± s）Tab.1　BBB scores in the sham and experimental groups（x- ± s）

表2　各组大鼠术后不同时间对热痛刺激的反应时间（x- ± s）Tab.2　Reaction time to heat pain in the sham and experimental groups（x- ± s）

图2　热板实验Fig.2　Hot plate test

1.脊髓损伤后4周大鼠脊髓局部组织结构的变化：脊髓损伤后随着继发性损伤的发展，背侧损伤区域脊髓组织坏死和逐渐形成空洞，损伤后4周，模型组大鼠脊髓背侧空洞面积占正常组织面积的0.059±0.006（图3b），丹参酮 IIA 组为 0.03±0.005（图3c），甲泼尼龙组0.012±0.001（图3d），丹参酮IIA组和甲泼尼龙组空洞面积比例较模型组明显减小（P＜0.05）（图3）。

2.脊髓损伤后4周各组脊髓前角运动神经元的变化：对照组前角运动神经元数量较多，尼氏体清晰可见，细胞核明显（图4a）；模型组前角运动神经元较多坏死，尼氏体溶解消失形成小空洞，细胞核固缩变小（图4b）；丹参酮IIA组和甲泼尼龙组神经结构较清晰，少量神经元坏死，尼氏体溶解后形成空洞较少，细胞质分布均匀（图4c～d）。

四、丹参酮IIA对脊髓损伤后局部脊髓中巨噬/小胶质细胞变化的影响

1.脊髓损伤后7天各组脊髓组织中巨噬/小胶质细胞的变化：对照组脊髓中可见分枝状的巨噬 /小胶质细胞（图5a）。在损伤初期（7天），模型组、丹参酮 IIA组、甲泼尼龙组巨噬/小胶质细胞形态均发生明显改变，胞体肥大呈圆形或杆状，突起回缩，其中模型组细胞形态改变的比例最高，活化的巨噬/小胶质细胞数量最多（图5b～d）；丹参酮IIA组和甲泼尼龙组活化的吞噬细胞/小胶质细胞 IOD较模型组明显减小（P＜0.05）。

2.脊髓损伤8周后各组大鼠脊髓组织中巨噬/小胶质细胞的变化：损伤后期（8 周），各组大鼠巨噬/小胶质细胞形态大部分转变为分枝状，仍有小部分呈杆状或圆状。丹参酮 IIA 组和甲泼尼龙组巨噬细胞/小胶质细胞IOD较模型组明显增加（P＜0.05），且其中形态呈圆状或杆状细胞数量较多（图6）。

表3　各组大鼠脊髓损伤-后不同时间脊髓组织中巨噬/小胶质细胞累积光密度（IOD）（± s）Tab.3　IOD of macropha-ges/microglia in spinal cord in the sham and experimental group（± s）

表3　各组大鼠脊髓损伤-后不同时间脊髓组织中巨噬/小胶质细胞累积光密度（IOD）（± s）Tab.3　IOD of macropha-ges/microglia in spinal cord in the sham and experimental group（± s）

注：a与对照组相比，P＜0.05；b与模型组相比，P＜0.05Notice:aDenotes when compared with that of the sham group； P ＜ 0.05，bDenotes when compared with that of the SCI group

组别　7 天　8 周对照组（Sham）　 7.89±1.68　8.14±0.90模型组（SCI）　27.22±3.04b　1.58±0.20a丹参酮 IIA 组（SCI/TIIA）　11.61±2.64a　2.89±0.12b甲泼尼龙组（SCI/MP）　11.88±1.47a　2.93±0.15a

图3　术后4周大鼠脊髓背侧空洞（Bar=200 μm）Fig.3 The cavity formed in the dorsal spinal cord 4 weeks after surgery（Bar=200 μm）

图4　术后4周脊髓前角运动神经元形态变化（Bar=50μm）Fig.4 Morphological changes of anterior horn motor neurons 4 weeks after surgery（Bar=50μm）

讨　　论

近年来，随着交通工具和城市建设的迅猛发展，交通事故和高空坠落成为导致脊髓损伤最主要的原因，呈现出不完全损伤逐年升高的趋势。因此，本实验选择了脊髓挫伤的动物实验模型，模拟了撞击及高处坠落时引起脊髓挫伤的病理过程。自 1911 年 Allen 首次报道了大鼠脊髓挫伤的动物模型以来，经过了多次的改良，现在使用最为广泛的是美国纽约大学改良后生产的脊髓打击装置 NYU Impactor[5]，它将脊髓打击的过程标准化，并作了一系列的参数测量，根据需要损伤的不同程度，可选择12.5mm、25mm、50mm、75mm等不同的高度，为研究者们根据不同的实验需要选择合适的损伤程度，并较为客观的得出评价结果提供了较好的参考。

评价大鼠脊髓损伤后神经功能恢复的方法主要包括3个方面，即神经电生理、形态学和运动功能评定。旷场实验（BBB评分）一直以来是大鼠运动功能评定最常用的方法，可操作性强，评价相对客观，能够较好的反映损伤后3个阶段的功能恢复程度：早期（≤7分）表现为没有或者只有轻微的后肢活动，但不能够负重；中期（～13分）表现为可以负重，但不能够协调运动；晚期（～21分）表现为可持续负重，且运动协调。热板实验常用于镇痛药物的实验研究，在这里用于测量大鼠脊髓损伤后不同时间点足底的疼痛阈值，相对客观地评价了脊髓损伤大鼠后肢感觉功能的恢复情况。

新闻的负面性和一致性价值也可以通过使用其他叙事特征来实现。萨默斯和吉布森指出，叙事是按照一定的评判标准构建的。这些标准能够实现并指导有选择地采用一系列事件或元素，而这些事件或元素源自构成该经历的各种开放的和重复出现的事件。（转引自Baker 2006：71）因果情节设置使我们能够权衡和解释事件，并将一系列命题转变为可解读的排序，以便使我们从中提炼出观点。（ibid.：67）

迄今为止，临床上用于脊髓损伤治疗的药物只有甲泼尼龙，但甲泼尼龙的大剂量使用有诸多副作用，丹参酮IIA磺酸钠作为丹参酮IIA的水溶性衍生物，有着类似的生物活性和药物代谢过程，临床上已用于治疗心梗和冠脉疾病多年，相对来说副作用少，安全性强。

1. 脊髓损伤的病理过程：Zhou等[6]根据之前的研究，把脊髓损伤分为了4个具体的过程：（1）原发性机械损伤：以直接打击造成血管痉挛和细胞死亡为特征；（2）损伤蔓延：以血管损伤而导致急性出血和局部缺血为特征；（3）免疫/炎症反应：以细胞凋亡、存活的轴突脱髓鞘以及免疫介导的细胞死亡为特征；（4）稳定化：以中央空洞和胶质瘢痕形成为特征。

图5　术后7天a：正常脊髓中处于静息状态的小胶质细胞；b：损伤后巨噬/小胶质细胞由分枝状转化为阿米巴样；c：丹参酮IIA组脊髓中巨噬/小胶质细胞数量IOD较模型组明减小；d：甲泼尼龙组脊髓中巨噬/小胶质细胞IOD较模型组明减小（Bar = 50 μm）Fig.5 Seven days after surgery a： Microglia in the resting state in normal spinal cord； b： Macrophages/microglia contract their processes and transformed from a ramifed to an ameboid morphology after injury； c： IOD of macrophage/microglia in TIIA group was reduced signifcantly compared with SCI group（P ＜ 0.05）； d： IOD macrophage/microglia in MP group was reduced dramatically compared with SCI group（P ＜ 0.05）（Bar = 50 μm）

图6　术后8周a：各实验组脊髓中巨噬/小胶质细胞形态由阿米巴样转变回分枝状；b：模型组脊髓中巨噬/小胶质细胞 IOD 较对照组减小；c：丹参酮 IIA 组脊髓中巨噬/小胶质细胞 IOD 较模型组增多；d：甲泼尼龙组脊髓中巨噬/小胶质细胞 IOD 较模型组增加（Bar=50μm）Fig.6 Eight weeks after surgery a： Microglia transformed from an ameboid to a ramifed morphology in experimental groups； b： The IOD of macrophage/microglia in SCI group was reduced signifcantly compared with sham group； c： IOD of macrophage/microglia increased in TIIA group compared with SCI group（P＜0.05）； d： IOD of macrophage/microglia increased remarkably in MP group compared with SCI group（P＜0.05）（Bar=50 μm）

炎症反应是所有继发性损伤的机制中最为重要的，它能够直接或间接的影响脊髓损伤的结果。炎症反应可以分为以下几个阶段[7]：（1）在损伤后 0～2 天内中性粒细胞快速浸润且固有的小胶质细胞活化；（2）损伤后3～7天时血源性的单核细胞向损伤部位聚集；（3）损伤后第7天开始巨噬细胞分解瘢痕并且轴突再生。

脊髓损伤通过激活固有的免疫反应，促进继发性损伤而引起炎症反应。脊髓损伤中心内巨噬细胞的累积，是神经元退变和再生相关的重要机制[8]。

2. 脊髓损伤后巨噬/小胶质细胞的活化：20世纪初，del Rio-Hortega 第一次描述了小胶质细胞，它占据了成人中枢神经系统细胞总量的 10%～20%[9]。有学者认为在发育过程中，这些细胞向中枢神经系统迁移，并可能在整个生命过程中不断的迁入，尤其是在受到损伤或疾病侵犯时[10]。脊髓损伤后，中枢神经系统固有的免疫细胞迅速做出反应，不仅是小胶质细胞，神经元和其它胶质细胞也迅速表达促炎性因子，使来自外周血源性的免疫细胞聚集在损伤部位并活化。

Yang 等[11]研究表明，是固有的小胶质细胞而非浸润的外周巨噬细胞，成为急性脊髓损伤后促炎症因子IL-1β，IL-6和TNF-α的主要来源。此外，在损伤后14天和28天，有一些损伤部位头尾部的区域血脊髓屏障通透性增加与OX-42+小胶质细胞表达相关[12]。

巨噬细胞和小胶质细胞一起构成了损伤脊髓的单核细胞反应。来自外周的巨噬细胞和活化的小胶质细胞于脊髓损伤后12～24h，出现在脊髓中，在损伤后4～8天浸润最多[13]。目前的研究结果表明，小胶质细胞和巨噬细胞在脊髓损伤60天出现第2个峰值，在脊髓损伤180天时仍持续上升[14]。活化的小胶质细胞和巨噬细胞证明，基因表达谱反应出吞噬功能、抗原呈递能力提升以及促炎性因子、ROS和RNS分泌的增加[15]。这与本实验中观察到的结果一致：模型组巨噬/小胶质细胞的 IOD 在损伤后7 天较对照组显著的增加，且在损伤后60天时仍存在活化的巨噬/小胶质细胞。

在脊髓损伤后早期的炎症环境下，大部分巨噬/小胶质细胞极化为M1型，只有少量极化为M2型。M1型巨噬/小胶质细胞有助于促炎性因子的再分泌，从而加剧神经毒性作用[18]。在脊髓损伤后期，局部的微环境有利于巨噬/小胶质细胞向M2型极化，从而释放大量的神经营养因子（IGF，BDNF，NGF等）以及抗炎性因子（IL-4，IL-10，TGF-β 等），促进轴突再生，发挥神经保护作用[17]。

在本实验条件下，脊髓损伤后7天，丹参酮IIA组和甲泼尼龙组巨噬/小胶质细胞IOD明显较对照组减少，可能为药物干预影响了炎症环境，进而减少了巨噬/小胶质细胞的活化。而在这个时期，从巨噬/小胶质细胞两种亚型所占比例来说，M1型＞M2型，因此减少了总量就更多地减少了M1型的数量，从而有利于发挥神经保护作用。在损伤后60天，丹参酮IIA组和甲泼尼龙组巨噬/小胶质细胞IOD较模型组增多，形态较模型组更接近活化状态，表明药物的干预在此时促进了巨噬/小胶质细胞的活化，而此时从两种亚型所占比例来说，是否是M2＞M1型，还不明确。

已经有研究证明M2型巨噬细胞对治疗非感染性的中枢神经系统炎症有利。选择性的活化M2型巨噬细胞，抑制M1表型，是促进脊髓损伤的功能恢复的有效方法[19]。但在脊髓损伤后，巨噬/小胶质细胞的功能不能被简单地认为是好或者坏，M1型或M2型，应考虑到更为复杂的微环境。为了应对这个问题，甚至有学者提出另一种巨噬细胞表型分类法，即根据作用的不同分为6个亚型：炎症型，吞噬型，血管重塑型，基质重建型，促进再生型和免疫调节型[20]。

综上所述，巨噬/小胶质细胞活化是中枢神经系统组织损伤必不可少的反应，它的双重作用以及不同的极化方向已经明确，有鉴于此，未来的研究需要进一步阐明信号通路和机制，使小胶质细胞可以被引导趋利避害，促进功能恢复。

参 考 文 献

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（本文编辑：李贵存）

. 脊柱脊髓损伤 Spinal and spinal cord injuries .

DOI：10.3969/j.issn.2095-252X.2016.06.003中图分类号：R683.2

基金项目：教育部 2012 年度“新世纪优秀人才支持计划”（NCEF12-0805）

作者单位：100700 北京中医药大学东直门医院（杨永栋、俞兴）；100029 北京中医药大学（高誉珊）

通信作者：俞兴，Email: yuxing34@sina.com

收稿日期：（2016-02-14）

Effects of intravenously injected tanshinone IIA on neurological function recovery of adult rat after spinal cord injury

YANG Yong-dong， YU Xing， GAO Yu-shan.

Department of Orthopedics， Dongzhimen Hospital Affiliated to Beijing University of Chinese Medicine， Beijing， 100700， PRC
Corresponding author： YU Xing， Email： yuxing34@sina.com

【Abstract】Objective To determine the impact of tanshinone IIA（TIIA）on the recovery of hindlimb neurological disorders and to explore the possible mechanisms. Methods Adult female Sprague-Dawley rats（n=45）were randomly divided into 4 groups： Sham group（laminectomy only）， SCI group（T9spinal cord contusive injury），SCI/TIIA group（SCI with intravenous injection of TIIA [20 mg/kg] from 1 to 7 days post-injury at the same time），SCI/MP group（SCI with intravenous injection of methylprednisolone [30 mg/kg] once post-injury）. SCI was generated by using NYU injury device with a 10-g weight dropped from a height of 25 mm. Sham group and SCI group were treated with intravenous injection of 1 ml normal saline from 1 to 7 days post-injury at the same time.（1）Spontaneous locomotion and sensory function of all animals were assessed by the Basso， Beattie， and Bresnahan（BBB）open feld locomotor test and hot plate test. Transcardiac perfusion fxation were done at 1， 4 and 8 weekspost-SCI. Sections of T9spinal cord were collected. Then the T9spinal cord tissue stained with Cresyl Violet for Nissl staining and stained with hematoxylin and eosin for HE staining. Microglia in the injured spinal cord were marked by immunohistochemistry at 7 days and 8 weeks post-SCI. Results（1）Hindlimb motor function of TIIA group（1.91±0.31）and MP group（3.10±0.41）was signifcantly improved 3 days post-surgery， but MP group was more effective（P＜0.05）；at 8 weeks post-surgery， hindlimb motor function of MP group（17.00±0.41）was still more effective than in TIIA group（15.50±0.43）（P＜0.05）.（2）Sensory function of MP group（4.06± 0.26）recovered faster than TIIA group（4.59±0.71）3 days post-surgery， and the difference was statistically signifcant（P＜0.05）. But TIIA group（3.06±0.13）showed a trend that sensory function recovers faster than MP group（3.14±0.13）at 2 weeks post-surgery， almost reached statistical signifcance（P＞0.05）.（3）In each group， except sham group，microglia contract their processes and transformed from a ramifed to an ameboid morphology at 7 days post-surgery. Changes of morphology in TIIA group and MP group were relatively smaller， but the integrated optical density（IOD）of macrophage/microglia in TIIA group（11.61±2.64）and MP group（11.88±1.47）was reduced signifcantly compared with SCI group（27.22±3.04）， and the difference was statistically signifcant（P＜0.05）.（4）In each group， except sham group， microglia transformed from an ameboid to a ramifed morphology at 8 weeks post-surgery. The IOD of macrophage/microglia increased in TIIA group（2.89±0.12）and MP group（2.93±0.15）compared with SCI group（1.58±0.20）， and the difference was statistically signifcant（P＜0.05）. Conclusions（1）TIIA possibly promotes the recovery of motor and sensory function of hindlimb in rats after SCI.（2）TIIA plays a positive role in the recovery of neurological disorder by infuencing the macrophage/microglia.

【Key words】Tanshinone； Spinal cord injuries； Neuroglia； Nervous system