白鹤藤化学成分研究

何光发，彭菲菲，邓秋怡，谭权芬，潘洁桃，尹永芹，严优芍

(广东药科大学 中药学院，广东 广州 510006)



白鹤藤化学成分研究

何光发，彭菲菲，邓秋怡，谭权芬，潘洁桃，尹永芹，严优芍

(广东药科大学 中药学院，广东 广州 510006)

摘要:目的 研究白鹤藤(Argyreia acuta Lour.)的化学成分。方法 采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、ODS柱色谱、MCI柱色谱、半自动制备液相色谱等手段进行分离纯化，通过理化性质和波谱解析鉴定化合物的结构。结果 从白鹤藤的乙酸乙酯部位和石油醚部位分离得到8个化合物，分别鉴定为3,4-O-二咖啡酰基奎宁酸甲酯(1)、3,4-O-二咖啡酰基奎宁酸乙酯(2)、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸丁酯(3)、3,4-O-二咖啡酰基奎宁酸丁酯(4)、木栓醇(5)、木栓酮(6)、菠甾醇(7)、豆甾醇(8)。结论 化合物1～7首次从该属植物中分离得到。

关键词:白鹤藤； 化学成分； 结构鉴定

白鹤藤(ArgyreiaacutaLour.)为旋花科银背藤属(Argyreia)植物，别名白牡丹、银背藤、银背叶、绸缎叶。银背藤属植物全世界约有90种，中国约有21种。白鹤藤始载于《本草求原》，《常用中草药手册》、《广西中草药》、《云南中草药》、《岭南草药志》等也有记载，在我国主要分布于广东、广西、海南、云南等地，是民间常用中草药，全藤入药，味微苦、甘，性平，具有祛风除湿、止咳化痰、止血生肌、舒筋活络、解毒消痈等功效。有关白鹤藤的化学成分，目前报道的主要有色素、总皂苷、甾体、黄酮和树脂糖苷等[1-5]。本文进一步对白鹤藤的化学成分进行研究，分别从乙酸乙酯部位分离得到4个咖啡酰基奎宁酸类化合物，分别为3,4-O-二咖啡酰基奎宁酸甲酯(1)、3,4-O-二咖啡酰基奎宁酸乙酯(2)、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸丁酯(3)、3,4-O-二咖啡酰基奎宁酸丁酯(4)，从石油醚部位分离得到4个甾体类化合物，分别是木栓醇(5)、木栓酮(6)、菠甾醇(7)、豆甾醇(8)，化合物1～7均为首次从该属植物中分离得到。

1材料与仪器

2450紫外-可见光分光光度计(日本岛津公司)；AVANCE 500超导核磁共振谱仪(德国Bruker公司)；AQUITYUPLC/Q-TOF micro液-质联用质谱仪(美国Waters公司)；LC-6AD半制备液相色谱仪(日本岛津公司)。

Sephadex LH-20葡聚糖凝胶(美国GE公司)；柱色谱硅胶(100～200、200～300目，青岛海洋化工有限公司)；GF254薄层层析用硅胶板(青岛海洋化工有限公司)；ODS(50～70 μm，天津键合相色谱有限公司)；MCI GEL(CHP 20P，日本三菱公司)。

白鹤藤药材2013年3月采自广西玉林，经广东药科大学李书渊教授鉴定为旋花科银背藤属(Argyreia)植物白鹤藤(ArgyreiaacutaLour.)。

2提取与分离

取白鹤藤地上部分5 kg，去杂，剪碎，加15倍量体积分数85%的乙醇加热回流提取3次，每次2 h，减压回收乙醇，得到粗浸膏2 kg，浸膏加适量水混悬，依次用石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇萃取，减压回收各部位溶剂，得石油醚部位浸膏50 g、三氯甲烷部位浸膏65 g、乙酸乙酯部位浸膏50 g和正丁醇萃取部位浸膏159 g。取乙酸乙酯部位浸膏50 g，进行硅胶(100～200 目)柱色谱分离，乙酸乙酯-甲醇梯度洗脱，TLC检识，得各组分再反复经Sephadex LH-20、ODS、MCI柱色谱纯化，再通过半制备液相制备得到化合物1(21 mg)、化合物2(20 mg)、化合物3(15 mg)和化合物4(17 mg)。取石油醚部位浸膏50 g，分别经硅胶(100～200目、200～300目)柱色谱分离，石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，TLC检识，合并相同组分，再进行重结晶，得到化合物5(20 mg)、化合物6(19 mg)、化合物7(50 mg)、化合物8(40 mg)。

3结构鉴定

化合物1：淡黄色粉末(甲醇)。TOF-MSm/z：529[M-H]-。13C-NMR谱显示该化合物含有26个碳，其中有1个甲氧基δ52.0。1H-NMR、13C-NMR数据见表1～表2。上述波谱数据与文献[6]对照一致，确定化合物1为3,4-O-二咖啡酰基奎宁酸甲酯(3,4-O-dicaffeoylquinic acid mehtylester)。

化合物2：淡黄色粉末(甲醇)。TOF-MSm/z：543[M-H]-。13C-NMR谱显示该化合物含有27个碳，其中δC61.0、14.0提示结构中具有—OCH2和—CH3。1H-NMR、13C-NMR数据见表1～表2。上述数据与文献[7]对照一致，确定化合物2为3,4二咖啡酰基奎宁酸乙酯(3,4-O-dicaffeoylquinic acid ethylester)。

化合物3：白色粉末(甲醇)。TOF-MSm/z：571[M-H]-。13C-NMR谱显示该化合物含有29个碳，其中δC64.6、30.6、19.2、14.0提示结构中具有—OCH2、—CH2×2和—CH3。1H-NMR、13C-NMR数据见表1～表2。上述波谱数据与文献[8]对照一致，确定化合物3为3,5-二咖啡酰基奎宁酸丁酯(3,5-di-Ocaffeoylquinicacid butylester)。

化合物4：白色粉末(甲醇)。TOF-MSm/z：571[M-H]-。13C-NMR谱显示该化合物含有29个碳，其中δC64.2、30.5、19.0、14.0提示结构中具有—OCH2、—CH2×2和—CH3。1H-NMR、13C-NMR数据见表1～表2。上述数据与文献[9]对照一致，确定化合物4为3,4-二咖啡酰基奎宁酸丁酯(3,4-di-O-caffeoylquinicacid butylester)。

表1化合物1～4的13C-NMR(125 MHz)数据

Table 1The13C-NMR (125 MHz) data of compounds 1-4

位置化合物1化合物2化合物3化合物4173.273.673.373.4237.736.736.038.2367.865.968.768.2472.172.865.072.6566.668.264.664.2636.238.136.038.27173.4173.3174.2173.41'/1″125.5/125.3125.9/125.7125.9125.9/125.82'/2″114.8/114.7115.3/115.2114.6/114.3115.3/115.23'/3″145.6/145.5146.1/146.0145.9/145.6146.1/146.04'/4″148.6/148.5149.1/149.0149.0/148.9149.1/149.05'/5″115.8116.3/116.2116.2116.36'/6″121.5/121.4121.9/121.8122.0/121.8121.9/121.87'/7″145.7/145.6147.1/127.0146.1146.18'/8″113.9/113.3114.3/113.8115.2/115.0114.3/113.89'/9″166.9/166.2166.4/165.7166.4/166.2166.9/166.71‴52.261.064.664.22‴14.330.630.53‴19.219.04‴14.014.0

表2　化合物1～4的1H-NMR(500 MHz)数据

化合物5：无色针晶(乙酸乙酯)，Liebermann-Burchard反应阳性。1H-NMR(500 MHz,CDCl3)δ：3.99(1H,d)，1.31(3H,s,28-CH3)，1.23(3H,s,27-CH3)，1.19(3H,s,29-CH3)，1.09(3H,s,26-CH3)，1.08(3H,s,30-CH3)，1.03(6H,s,23-CH3,24-CH3)，0.96(3H,s,25-CH3)。13C-NMR(125 MHz,CDCl3)δ：71.9(C-3)，62.3(C-10)，50.5(C-4)，49.0(C-8)，43.6(C-18)，42.8(C-6)，40.4(C-22)，39.9(C-5)，39.0(C-14)，38.9(C-13)，37.9(C-9)，37.0(C-2)，36.9(C-16)，36.5(C-11)，36.0(C-19)，35.5(C-30)，33.5(C-21)，33.0(C-15)，32.7(C-28)，31.3(C-12)，32.3(C-29)，30.7(C-17)，28.8(C-20)，20.7(C-27)，19.2(C-25)，19.0(C-26)，18.4(C-7)，17.4(C-24)，17.0(C-1)，12.9(C-23)。以上波谱数据与文献[10]对照一致，故鉴定化合物5为木栓醇(friedelin)。

化合物6：无色针晶(乙酸乙酯)，Liebermann-Burchard反应阳性。1H-NMR(500 MHz,CDCl3)δ：0.72(3H,s,CH3)，0.87(3H,d,J=6.4 Hz,H-23)，0.95(3H,s,CH3)，1.00(3H,s,CH3)，1.01(3H,s,CH3)，1.05(3H,s,CH3)，1.18(3H,s,CH3)。13C-NMR(125 MHz,CDCl3)δ：213.4(C-3)，59.7(C-10)，58.4(C-4)，53.3(C-8)，43.0(C-18)，42.4(C-5)，41.7(C-2)，41.5(C-6)，39.9(C-13)，39.5(C-22)，38.5(C-14)，37.7(C-9)，36.2(C-16)，35.8(C-11)，35.6(C-19)，35.2(C-29)，33.0(C-21)，32.6(C-15)，32.3(C-28)，32.0(C-30)，30.7(C-12)，30.2(C-17)，28.4(C-20)，22.5(C-1)，20.5(C-26)，18.9(C-27)，18.5(C-7)，18.2(C-25)，14.9(C-24)，7.0(C-23)。以上波谱数据与文献[11]对照一致，确定化合物6为木栓酮(friedelinol)。

化合物7：白色针晶(乙酸乙酯)，Liebermann-Burchard反应阳性。1H-NMR(500 MHz,CDCl3)δ：0.68(3H,d,J=5.4 Hz)，0.84、0.86、1.02、1.58(3H each,s)，3.54(1H,m,H-3)，5.36(1H,m,H-6)。13C-NMR(125 MHz,CDCl3)δ：141.0(C-8)，138.5(C-22)，129.5(C-23)，122.0(C-7)，72.0(C-13)，56.3(C-17)，56.2(C-14)，51.5(C-24)，50.36(C-9)，46.1(C-13)，42.5(C-20)，40.0(C-5,C-12)，39.9(C-4)，37.5(C-1)，34.2(C-10)，32.1(C-25)，31.9(C-2)，29.9(C-6)，29.2(C-16)，26.3(C-28)，23.3(C-15)，21.3(C-1)，21.2(C-11)，20.0(C-27)，19.6(C-26)，12.3(C-18)，12.2(C-19)，12.1(C-29)。以上波谱数据与文献[12]对照一致，确定化合物7为菠甾醇(spinasterol)。

化合物8：无色针晶(乙酸乙酯)，Liebermann-Burchard反应阳性。1H-NMR(500 MHz,CDCl3)δ：0.70，1.02(3H each,s)，0.82(3H,d,J=8.5 Hz)，0.85(3H,d,J=4.5 Hz)，0.93(6H,d,J=8.0 Hz)，3.51(1H,m)，5.04(1H,dd,J=19.0,10.5 Hz)，5.18(1H,dd,J=19.0,10.5 Hz)，5.35(H,d,J=6.5 Hz)。13C-NMR(125 MHz,CDCl3)δ：141.0(C-5)，138.6(C-22)，129.5(C-23)，122.0(C-6)，70.1(C-3)，56.3(C-14)，56.2(C-17)，51.5(C-24)，50.4(C-9)，42.4(C-4,C-13)，40.0(C-20)，39.1(C-12)，36.7(C-1)，36.4(C-10)，33.6(C-25)，32.1(C-8)，31.9(C-7)，30.5(C-2)，28.5(C-16)，25.6(C-28)，24.5(C-15)，22.4(C-11)，21.4(C-26)，21.3(C-27)，19.0(C-21)，12.3(C-19)，12.2(C-29)，12.1(C-18)。以上波谱数据与文献[13]对照一致，确定化合物8为豆甾醇(tigmasterol)。

参考文献:

[1] 罗泳林，唐燕青，丘丹萍，等．白鹤藤色素的提取及其稳定性研究[J]．中国酿造，2009(11)：66-68.

[2] 罗泳林，丘丹萍，唐燕青，等．白鹤藤总皂苷提取条件优化[J]．化工技术与开发，2010，39(1)：4-5.

[3] 杨海船，李嘉，李红，等.一匹绸的化学成分研究[J].中国民族民间医药杂志,2014，23(5)：10.

[4] YIN Yongqin,PAN Jietao,YU Bangwei,et al. Two pentasaccharide resin glycosides fromArgyreiaacuta[J]. Natural Product Research,2016,30(1):1-5.

[5] 曾凡林．白鹤藤化学成分研究[J]．亚太传统医药，2013，9(4)：31-32.

[6] 靳鑫，时圣明，张东方，等．穿心莲化学成分的研究(Ⅱ)[J].中草药，2014，45(2)：164-169.

[7] 关焕玉，兰燕宇，廖尚，等．羊耳菊中咖啡酰基奎宁酸类化学成分研究[J]． 天然产物研究与开发，2014，26(12)：1948-1952.

[8] 杨炳友，蒋艳秋，孟颖，等．青龙衣正丁醇部位化学成分研究[J]．中草药，2015，46(4)：481-485.

[9] WEI Xiaoyi,HUANG Hongjuan,WU Ping,et al. Phenolic constituents fromMikaniamicrantha[J]. Biochem Syst Ecol,2004,32:1091-1096.

[10] 林材，曹佩雪，梁光义．马兰化学成分的研究[J]．中国药学杂志，2000，41(4)：251-253.

[11] 李钦，沈月毛，李萍．黄背栎的脂溶性化学成分研究[J]．林产化学与工业，2008，28(1)：92-94.

[12] 陆兔林.中药莪术有效物质及饮片规范化研究[D].南京：南京中医药大学,2013.

[13] 孙珍，李泠鸰，院珍珍，等．小蓟中甾体类化合物的分离及结构鉴定[J]．食品科学，2012，33(19)：124-127.

(责任编辑：陈翔)

Study on chemical constituents fromArgyreiaacutaLour.

HE Guangfa,PENG Feifei,DENG Qiuyi,TAN Quanfen,PAN Jietao,YIN Yongqin，YAN Youshao

(SchoolofTraditionalChineseMedicine，GuangdongPharmaceuticalUniversity，Guangzhou510006，China)

Abstract:Objective To study the chemical constituents of Argyreia acuta Lour. Methods The compounds were isolated by chromatography on silica gel column, Sephadex LH-20 column,ODS column,semi-preparative chromatography，and their structures were identified on the basis of physicochemical properties and spectroscopic data. Results Eight compounds were isolated and identified as 3,4-O-dicaffeoylquinic acid methylester (1),3,4-O-dicaffeoylquinic acid ethylester (2),3,5-di-Ocaffeoylquinicacid butylester (3),3,4-di-O-caffeoylquinicacid butylester (4),friedelin (5),friedelinol (6),spinasterol (7),tigmasterol (8). Conclusion Compounds 1-7 were isolated from Argyreia acuta Lour for the first time.

Key words:Argyreia acuta Lour.; chemical constituents; structural identification

DOI:10.16809/j.cnki.1006-8783.2015112002

中图分类号:R284.2

文献标志码:A

文章编号:1006-8783(2016)02-0135-04

作者简介：何光发(1996—)，男，2012级本科生，Email：2642125159@qq.com；通信作者：尹永芹(1977—)，女，博士，副教授，从事中药及天然药物有效成分及其谱效相关性研究，电话：020-39352179，Email：yongqinyin@126.com。

基金项目：国家自然科学基金项目(81202885)；广东省自然科学基金项目(2015A030313585)；广东省大学生创新训练项目(201410573034)

收稿日期：2015-11-20

网络出版时间：2016-03-31 15:22网络出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/44.1413.R.20160331.1522.006.html