参归多维口服液对小鼠抗疲劳功能的影响

单晓会，苑广信，赵南晰，杜培革，安丽萍

(1.北华大学药学院，吉林 吉林　132013；2.北华大学附属医院，吉林 吉林　132011)



参归多维口服液对小鼠抗疲劳功能的影响

单晓会1，2，苑广信1，赵南晰1，杜培革1，安丽萍1

(1.北华大学药学院，吉林 吉林132013；2.北华大学附属医院，吉林 吉林132011)

摘要：目的 研究参归多维口服液对正常小鼠抗疲劳功能的影响.方法以参归多维口服液浓缩液0.1，1.0，3.0 mL/kg作为低、中、高剂量组，小鼠连续灌胃给药30 d，末次给药30 min后，小鼠负荷5%体质量，进行负重游泳实验，观察小鼠负重游泳时间及对小鼠增重的影响；末次给予参归多维口服液30 min、游泳90 min、休息60 min后采血，进行血清尿素含量测定；末次给予参归多维口服液30 min后处死小鼠取肝脏，测定肝糖原；末次给予参归多维口服液30 min后采血，不负重游泳10 min，在游泳后立即(游泳后0 min)和游泳后休息20 min采血，测定以上3个时间点的血乳酸值.结果参归多维口服液各剂量组小鼠增重与阴性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)，高剂量组游泳时间明显长于阴性对照组(P<0.01)；参归多维口服液高剂量组小鼠游泳后血清尿素低于阴性对照组(P<0.05)；与阴性对照组比较，参归多维口服液各剂量组肝糖原储备比较差异无统计学意义(P>0.05)；与阴性对照组比较，参归多维口服液高剂量组小鼠游泳后3个时间点血乳酸曲线下面积有所降低.结论参归多维口服液具有缓解体力疲劳的功能.

关键词：参归多维口服液；抗疲劳；乳酸；肝糖原

【引用格式】单晓会，苑广信，赵南晰，等.参归多维口服液对小鼠抗疲劳功能的影响[J].北华大学学报(自然科学版)，2016，17(2)：196-199.

疲劳是一个涉及许多生理、生化因素的综合性生理过程，是机体脑力或体力到达一定阶段时必然出现的一种正常的生理现象，它既标志着机体原有工作能力的暂时下降，又可能是机体发展到疾病状态的一个先兆[1].如果人体长期处于一种疲劳状态，会产生反应迟钝、注意力减退和记忆力下降等症状，严重影响生活质量，甚至产生病理性损害.因此，开发安全、有效、可长期服用的功能食品来延缓疲劳并加速疲劳消除一直是研究的热点[2-3].

我国有着传统中医药的丰富资源，“药食同源”理论是我国发展功能食品的独特优势.本研究的参归多维口服液是根据中医药理论，采用现代营养学、药理学的理论和方法，将多种药食同源的中药材进行组合，以人参、生姜、大枣、甘草、桂皮、白芍、陈皮、当归和牛磺酸为主要原料，并辅以3种维生素的中药营养素组方.本组方及其制备工艺已经获得国家授权发明专利[4].本文利用小鼠负重游泳为模型实验，观察实验动物的行为学特点，并检测生化指标，评价参归多维口服液抗疲劳功能，为该功能食品的应用提供理论和实验依据.

1材料

1.1样品

参归多维口服液浓缩液，由本实验室自制.

1.2实验动物与分组

选用SPF级ICR雄性小鼠(长春市亿斯实验动物技术有限责任公司)，体质量18～22 g，进行适应性喂养3 d，随机分组，每组10只.以口服液浓缩液0.1，1.0，3.0 mL /kg，分别取1.0，10.0，30.0 mL浓缩液加蒸馏水至200 mL作为低、中、高剂量组，各组小鼠灌胃量均为0.2 mL/10 g，连续灌胃30 d.本样品试验不需设置糖对照组.

1.3仪器与试剂

游泳箱(50 cm×50 cm×40 cm)；尿素测定试剂盒(深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司)；肝糖原试剂盒(南京市建成生物工程研究所)；SBA-40C型生物传感分析仪 、TBA-120FR型全自动生化分析仪等(日本东芝).

2实验方法

2.1负重游泳试验

末次给予参归多维口服液30 min后，将小鼠尾根部负荷5%体质量的铅皮，于水深约30 cm，水温(25±1)℃游泳箱中游泳.记录小鼠游泳时间(min)、小鼠自游泳开始至死亡时间.

2.2血清尿素测定

末次给予参归多维口服液30 min，于(30±0.5)℃温度水中游泳90 min后，再休息60 min采血，2 000 r/min离心10 min，取血清，采用全自动生化分析仪测定尿素含量.

2.3肝糖原测定

末次给予参归多维口服液30 min后处死小鼠，取肝脏，精确称取肝脏75 mg，按试剂盒说明书步骤进行操作，在620 nm处波长进行比色测定，并按试剂盒说明书提供的公式换算肝糖原含量.

2.4血乳酸测定

末次给予参归多维口服液30 min后采血20 μL后，于(30±0.5)℃温度水中不负重游泳10 min，立即(游泳后0 min)采血20 μL，游泳后休息20 min再采血20 μL，测定以上3个时间点的血乳酸值.计算3个时间点血乳酸曲线下面积来判断结果.

2.5统计学分析

数据采用SPSS 11.5中单因素方差分析进行均值比较，方差齐时，各组间两两比较用LSD法；方差不齐时，各组间两两比较采用Tamhane法.

3结果

3.1参归多维口服液对小鼠负重游泳时间及小鼠增重的影响

经口给予小鼠不同剂量的参归多维口服液30 d，与阴性对照组比较，各剂量组小鼠增重差异无统计学意义(P>0.05)，高剂量组游泳时间明显长于阴性对照组(P<0.01).见表1.

3.2参归多维口服液对小鼠血清尿素及小鼠增重的影响

与阴性对照组比较，参归多维口服液各剂量组小鼠增重差异无统计学意义(P>0.05)，高剂量组小鼠游泳后血清尿素低于阴性对照组(P<0.05).见表2.

3.3参归多维口服液对小鼠肝糖原含量及小鼠增重的影响

与阴性对照组比较，参归多维口服液各剂量组小鼠增重差异无统计学意义(P>0.05)，各剂量组肝糖原储备差异无统计学意义(P>0.05).见表3.其中,肝糖原质量分数计算公式如下：

肝糖原质量分数(标准液葡萄糖浓度)×测定前稀释倍数(100×10)×1.11.

注：与阴性对照组比较，**：P<0.01

表2　参归多维口服液对血清尿素及小鼠增重的影响

注：与阴性对照组比较，*：P<0.05

表3　参归多维口服液对小鼠肝糖原含量及小鼠增重的影响

注：与阴性对照组比较，*：P<0.05

3.4参归多维口服液对小鼠血乳酸值及小鼠体质量的影响

与阴性对照组比较，参归多维口服液对各剂量组小鼠增重差异无统计学意义(P>0.05)，高剂量组小鼠游泳后3个时间点血乳酸曲线下面积降低(P<0.05).见表4和表5.其中：3个时间点血乳酸曲线下面积=5×(游泳前血乳酸值+3×游泳后0 min血乳酸值+2×游泳后休息20 min血乳酸值).

表4　参归多维口服液对小鼠血乳酸值的影响

表5　参归多维口服液对小鼠血乳酸曲线下面积及小鼠增重的影响

注：与阴性对照组比较，*：P<0.05

4讨论

参归多维口服液由八种中药、牛磺酸和3种维生素组成，其中人参、生姜和大枣都有明确的抗疲劳作用，并且牛磺酸可以改善机体内分泌系统的状态、调节机体代谢、增强免疫力和抗疲劳的作用[5-9].本实验选择小鼠负重游泳实验为疲劳实验动物模型，观察小鼠游泳至力竭的时间，发现参归多维口服液高剂量组可以明显增加小鼠游泳时间，提示参归多维口服液可以提高小鼠体能，这与参归多维口服液多种组分有抗疲劳作用有关.小鼠增重在给药后无明显变化，说明参归多维口服液对小鼠增重没有影响.检测小鼠血清尿素结果提示：参归多维口服液高剂量组显著低于阴性对照组，说明在小鼠力竭运动后，参归多维口服液可以促进血清尿素的清除，有利于机体从疲劳状态得到恢复.并且参归多维口服液高剂量组小鼠游泳后3个时间点血乳酸曲线下面积降低，说明其可以减少乳酸堆积，加速乳酸的清除，能够缓解疲劳，这与参归多维口服液高剂量组可以延长小鼠游泳时间相一致.并且参归多维口服液各剂量组肝糖原储备并没有明显改变，说明其抗疲劳作用并不是通过动用肝糖原的储备实现的.

综上所述，参归多维口服液可以延长小鼠负重游泳时间，促进疲劳小鼠的体力恢复，具有抗疲劳作用.参归多维口服液组方中的多种中药为长白山道地药材，开发其为抗疲劳功能食品，即可以解决疲劳人群的亚健康状态，又可以拉动地方经济发展，具有一定的社会和经济价值.

参考文献：

[1] 张颖捷，杜万红.国内外抗疲劳研究进展[J].实用预防医学，2012，19(7)：1112-1116.

[2] 潘志琴，白子捷.中国功能性食品添加剂的研究现状与发展趋势[J].北京农业，2015，29(11)：696-700.

[3] 马超.功能食品概况及展望[J].中国果菜，2012，35(11)：3356-3357.

[4] 北华大学.一种具有抗疲劳作用的复方制剂[P].中国，医药技术领域，201210198977.X.

[5] Qi B，Liu L，Zhang H，etal.Anti-fatigue effects of proteins isolated from Panax quinquefolium[J].J Ethnopharma- col，2014，153(2)：430-434.

[6] 曹智，张燕娣，许永华，等.人参有效成分及其药理作用的研究新进展[J].人参研究，2012(2)：39-43.

[7] 韩燕全,洪燕.姜的炮制、质控和药理研究进展[J].中国现代中药，2011，30(20)：1569-1573.

[8] 赵明明，范秋领.牛磺酸营养液对小鼠免疫功能影响的研究[J].食品与药品，2011，13(3)：97-99.

[9] 陈冠敏，陈润，张荣标，等.硫酸氨基葡萄糖对正常小鼠免疫功能的影响[J].卫生研究，2011，20(2)：36-38.

【责任编辑：陈丽华】

Influence of ShenGuiDuoWei Oral Liquid on the Anti-fatigue Function of Normal Mice

Shan Xiaohui1,2，Yuan Guangxin1，Zhao Nanxi1，Du Peige1，An Liping1

(1.CollegeofPharmacy，BeihuaUniversity，Jilin132013，China；2.AffiliatedHospitalofBeihuaUniversity，Jilin132011，China)

Abstract：Objective To study the influence of ShenGuiDuoWei oral liquid on the anti-fatigue function of normal mice.Methods ShenGuiDuoWei oral liquid with 0.1，1.0，3.0 mL/kg BWD was administrated by intragastric administration as low，middle and high dose group on mice for 30 days.At 30 min after the last administration，mice with 5% body weigh were forced to load swim.The swimming time of the mice and mice weight heavy were observed.After the last administration of ShenGuiDuoWei oral liquid for 30 min，then to swim for 90 min，rest for 60 min，the mice serum urea was detected.The mice were killed after 30 minutes ShenGuiDuoWei oral liquid was given for the last time，and then the liver was taken，the glycogen was determined.After the last administration of drug for 30 min and blood collection，then to swimming for 10 min but no loading，and blood lactic acid of three time points were detected respectively for swimming immediately and swimming rest for 20 min.Results Compared with the negative control group，mice weight gain was no significant difference between the each experiment group of ShenGuiDuoWei oral liquid and the negative control group(P>0.05).The swimming time of the high dose group was longer than that of the negative control group，and the difference was significant(P<0.01).ShenGuiDuoWei oral liquid for the high dose group of mice after swimming serum urea is lower than that in negative control group，and the difference was significant(P<0.05)；Hepatic glycogen reserve is no significant difference between the ShenGuiDuoWei oral liquid in each dose group and the control group (P>0.05)；ShenGuiDuoWei oral liquid for the high dose group of mice after swimming three time points of area below blood lactic acid curve decreased，there was significant difference(P<0.05)compared with the negative control group.Conclusion ShenGuiDuoWei oral liquid had anti-physical fatigue effect.

Key words：shenGuiDuoWei oral liquid；anti-fatigue；lactic acid；liver glycogen

中图分类号：R285

文献标志码：A

作者简介：单晓会(1987-)，女，硕士研究生，主要从事药物分析学研究,E-mail：1175307068@qq.com；通信作者：安丽萍(1973-)，女，博士，副教授，硕士生导师，主要从事中药活性物质分析学研究，E-mail：alp960@126.com.

基金项目：吉林省医药产业发展专项资金计划项目(20150311029YY；20140311043YY).

收稿日期：2015-12-09

文章编号：1009-4822(2016)02-0196-04

DOI：10.11713/j.issn.1009-4822.2016.02.011