大肠息肉患者CD24、TK1表达水平与其临床病理的关系

庞念德，黄文财，屈燕铭，饶泽珍

(深圳市盐田区人民医院消化内科，广东 深圳 518083)

大肠息肉患者CD24、TK1表达水平与其临床病理的关系

庞念德，黄文财，屈燕铭，饶泽珍

(深圳市盐田区人民医院消化内科，广东 深圳 518083)

目的 研究大肠息肉临床病理与CD24、胸苷激酶(TK1)表达的关系。方法选取我院消化内科2014年1月至2015年9月期间收治的88例大肠息肉患者，其中炎性息肉、管状腺瘤、管状绒毛状腺瘤、绒毛状腺瘤各22例，同时选取同期住院的正常大肠黏膜和腺癌各22例作为对照组；观察CD24、TK1的表达水平与息肉组织类型、息肉异型增生、息肉大小及息肉数量的关系。结果CD24、TK1水平的表达随着组织类型的递增而逐渐增高(P＜0.05)，正常黏膜、炎性息肉、管状腺瘤、管状绒毛状腺瘤、绒毛状腺瘤、腺癌CD24水平阳性率分别为0(0/22)、0(0/22)、27.3%(6/22)、40.9%(9/22)、45.5%(10/22)、90.9%(20/22)，TK1水平阳性率分别为0(0/22)、0(0/22)、9.1%(2/22)、18.2%(4/22)、27.3%(6/22)、50.0%(11/22)；随着异型增生程度的增加，CD24、TK1水平的阳性表达也逐渐增加(P＜0.05)，无增生、轻度增生、中度增生、重度增生CD24水平阳性率分别为0(2/22)、50.0%(11/22)、72.7%(16/22)、90.9% (20/22)，TK1水平阳性率分别为0(2/22)、45.5%(10/22)、59.1%(13/22)、90.9%(16/22)；随着息肉直径的增加，CD24、TK1水平的阳性表达率逐渐增加，且呈现相关性(P＜0.05)，直径≤1.0 cm、1.1～1.9 cm、≥2.0 cm CD24水平阳性率分别为18.2%(4/22)、50.0%(11/22)、81.8%(18/22)，TK1水平阳性率分别为22.7%(5/22)、45.5%(10/22)、90.9%(16/22)；单发、多发CD24水平阳性率分别为4.5%(1/22)、68.2%(15/22)，TK1水平阳性率分别为9.1%(2/22)、63.6%(14/22)，差异均有统计学意义(P＜0.05)。结论CD24、TK1水平在大肠息肉中呈高表达，而增生的程度不一、大小不一、数量不同、病理类型不同的腺瘤，其表达的程度也不同。

CD24水平；胸苷激酶水平；大肠息肉；病理关系；临床价值

大肠息肉是临床消化系统的常见疾病，多见于直肠和乙状结肠，其发病率较高，且发病率会随着年龄的增长而逐渐增高，同时，大肠息肉还具有一定的恶变倾向，恶变率约为10%，严重威胁患者的生命安全，因此，进行早期癌风险筛查具有重要的临床意义[1]。有研究显示，胸苷激酶(TK1)是早期筛查癌风险的敏感性指标，可在恶性肿瘤与诸多癌前疾病中呈现高表达；CD24水平也被认为在结直肠癌中有高表达。因此，本文旨在探讨CD24、TK1水平与大肠息肉临床病理的关系，现报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取我院消化内科2014年1月至2015年9月期间收治的88例大肠息肉患者，其中男性68例，女性20例；年龄20～70岁，平均(62.3±7.8)岁。所有患者均进行手术切除，并经肠镜检查和病理学确诊，其中炎性息肉、管状腺瘤、管状绒毛状腺瘤、绒毛状腺瘤各22例；同时选取同期住院正常的大肠黏膜和腺癌各22例作为对照组。排除有贫血疾病史和女性月经期者。

1.2 方法 HE染色：采用常规苏木精-伊红(HE)染色法，将标本组织连续切片，厚度为4µm；免疫组化染色：按照最佳浓度1:200配备CD24、TK1水平，磷酸盐缓冲液(PBS)做空白对照，同时将已知的阳性片做阳性对照。具体内容为：①脱蜡、水化：于二甲苯液体中放置所制的切片，浸泡10 min后更掉二甲苯溶液，再次浸泡10 min；依次置于无水乙醇、95%乙醇、75%乙醇中浸泡5 min。②抗原、修复：于pH 6.0的柠檬酸钠缓冲液(SSC)容器中放置组织切片，在700 W的微波加热10 min，进行修复抗原。冷却至室温后冲洗3次，每次3 min。③加一抗：将血清CD24、TK1抗体滴加在切片上，然后在低温(4℃)环境下孵育24 h，在37℃温箱中复温15 min，之后使用PBS缓冲液冲洗3次，每次3 min。④加二抗：方法同上。⑤使用DAB显色：以1:50的DAB显色，之后在镜下观察染色程度，染色满意后进行封片。

1.3 观察指标与判定方法 观察CD24、TK1水平的表达与息肉组织类型、息肉异型增生、息肉大小及息肉数量的关系情况。结果判定[2]：阳性：镜下可见棕黄色或黄色的颗粒；随机选取五个切片，于高倍的显微镜下进行计数。依据染色的程度记为：棕黄色3分、黄色2分、浅黄色1分、不着色0分；依据阳性细胞的数量记为：阳性细胞数在70%以上为3分、阳性细胞数在(30%～70%)间为2分、阳性细胞数在(10%～30%)间为1分、阳性细胞数小于10%为0分；根据染色程度+阳性细胞数之和分为四级：0分为阴性(-)，1～2分为弱阳性(+)，3～4分为阳性(++)，5～6分为强阳性(+++)。

1.4 统计学方法 应用SPSS18.0统计软件进行数据分析，计量资料以均数±标准差(±s)表示，组间比较采用t检验，计数资料用百分比(%)表示，组间比较采用χ2检验，以P＜0.05为差异具有统计学意义，

2 结 果

2.1 CD24、TK1水平的表达与大肠息肉组织类型的关系 CD24、TK1水平的表达随着组织类型的递增而逐渐增高，差异均有统计学意义(P＜0.05)，见表1。正常黏膜组织及癌组织CD24、TK1水平的表达见图1～图4。

表1 CD24、TK1水平与息肉组织类型的关系[例(%)]

图1 正常黏膜组织CD24的表达(×400)

图2 癌组织CD24的表达(×200)

2.2 不同息肉异型增生组织CD24、TK1的表达 随着异型增生程度的增加，CD24、TK1水平的阳性表达也逐渐增加，差异均有统计学意义(P＜0.05)，见表2。

2.3 息肉大小对CD24、TK1水平的影响 随着息肉直径的增加，CD24、TK1水平的阳性表达率逐渐增加，且呈现相关性(P＜0.05)；直径≤1.0 cm和直径≥2.0 cm的息肉其CD24、TK1水平表达率比较，差异具有统计学意义(χ2=17.818、11.003，P＜0.05)，见表3。

图3 正常黏膜组织TK1的表达(×200)

图4 癌组织TK1的表达(×200)

表2 不同息肉异型增生组织CD24、TK1的表达[例(%)，n=22]

表3 息肉大小对CD24、TK1水平的影响[例(%)，n=22]

2.4 息肉数量对CD24、TK1水平的影响 在单发息肉和多发息肉中，CD24、TK1水平的阳性表达率差异有统计学意义(P＜0.05)，见表4。

表4 CD24、TK1水平的表达与息肉数量的关系[例(%)，n=22]

3 讨 论

大肠息肉是临床常见的疾病，临床上分为肿瘤性和非肿瘤性两大类。而腺瘤性息肉又是腺癌的重要癌前病变，其大小、数量、部位、增生程度及病理类型成为癌变的重要因素。因此，对腺瘤性息肉尤进行早期筛查诊断尤为重要[3]。目前临床上常采用原癌基因蛋白产物、抑癌基因的表达来诊断，但这些蛋白基因对早期的癌症诊断效果不佳，而腺瘤演变成腺癌则需5～10年的时间。本研究探讨CD24、TK1水平与大肠息肉临床病理的关系，CD24主要存在在早期的上皮细胞、淋巴细胞及神经细胞等，是一种低分子高度糖基化的粘附分子，参与造血分化和成熟及细胞的分化[4]。近些年有研究显示，在结直肠癌患者中也存在高水平的CD24；TK1是一种嘧啶补救途径的激酶，可在某种条件下转化为腺胸苷酸，且TK1还与细胞周期、DNA合成均密切相关，可在肿瘤细胞的G1/S期交界、G2或M期表现为开始升高至持续性升高，已成为一种评价肿瘤进展的新的标志物[5]，在某些恶性肿瘤和癌前病变中呈现高表达，是早期筛查癌风险的敏感性指标[6]。本次研究探讨CD24、TK1水平与大肠息肉临床病理的关系，研究结果显示：CD24、TK1水平的阳性表达与大肠息肉病理类型密切相关(P＜0.05)；而CD24、TK1水平在腺瘤与腺癌、正常黏膜与腺瘤中差异也有统计学意义(P＜0.05)；CD24、TK1水平的阳性表达率与异性增生程度和单发、多发息肉直径均具有相关性，差异具有统计学意义(P＜0.05)。故CD24与息肉恶变的重要因素密切相关，可以作为评价息肉组织恶变倾向的指标之一，为结直肠癌的预防和治疗提供有效的帮助。但CD24在大肠息肉恶变中的机制尚不明确，需进一步研究。

综上所述，CD24、TK1在大肠息肉中呈高表达，而增生程度不一、大小不一、数量不同、病理类型不同的腺瘤，其表达的程度也不同。

[1]徐大州.结直肠息肉患者的临床和内镜特征研究[J].河北医学, 2014,20(11):3272-3273.

[2]范秀秀.XRCC 2和XRCC 3在大肠癌及大肠息肉中表达的临床意义[J].当代医学,2014,10(15):45-47.

[3]刘淑娟.大肠息肉EGFR、KRAS蛋白表达的临床意义[D].大连:大连医科大学,2014.

[4]王少军.大肠高危腺瘤和癌变息肉的临床分析及decorin在腺瘤中的表达与意义[D].合肥:安徽医科大学,2010.

[5]徐从荣,郑登滋,魏建成,等.大肠息肉患者胸苷激酶检测结果分析[J].检验医学与临床,2011,8(7):239-241.

[6]陈出新,高赫男,孙艳,等.结直肠息肉中CD24、TK1水平的表达及其临床价值[J].海南医学,2013,24(12):290-292.

Correlation of serum CD24 and TK1 expression levels with clinicopathological features in patients with colorectal polyps.

PANG Nian-de,HUANG Wen-cai,QU Yan-ming,RAO Ze-zhen.Department of Gastroenterology,People's Hospital of Yantian District of Shenzhen,Shenzhen 518083,Guangdong,CHINA

Objective To study the correlation of serum CD24 and TK1 expression levels with clinicopathological features in patients with colorectal polyps.MethodsA total of 88 patients with colorectal polyps(including inflammation polyp,tubular adenoma,tubular villous adenoma,and villous adenoma,with 22 cases in each type),who admitted to Department of Gastroenterology of our hospital from January 2014 to September 2015,were selected as the research objects.At the same time,22 cases of normal colorectal mucosa and 22 cases of adenocarcinoma were chosen as the control group.The correlation of serum CD24 and TK1 expression levels with types of polyps,polyp dysplasia,polyp size and number of polyps were observed and compared.ResultsThe expression levels of CD24 and TK1 increased gradually with tissue type(P＜0.05);CD24 positive rates,in normal mucosa,inflammatory polyp,tubular villous adenoma, villous adenoma,adenoma were respectively 0(0/22),0(0/22),27.3%(6/22),40.9%(9/22),45.5%(10/22),90.9% (20/22),and TK1 positive rates in normal mucosa,inflammatory polyp,tubular villous adenoma,villous adenoma, adenoma were respectively 0(0/22),0(0/22),9.1%(2/22),18.2%(4/22),27.3%(6/22),50.0%(11/22).With the increase of the degree of dysplasia,the positive expression levels of CD24 and TK1 gradually increased(P＜0.05);CD24 positive rates in non-hyperplasia,mild hyperplasia,moderate hyperplasia and severe hyperplasia were respectively 0(2/22),50.0% (11/22),72.7%(16/22),90.9%(20/22),and TK1 positive rates in these were respectively 0(2/22),45.5%(10/22),59.1% (13/22),90.9%(16/22).With the increase of the diameter of polyps,the positive expression levels rate of CD24 and TK1 increased gradually(P＜0.05);CD24 level positive rate of＜1.0 cm in diameter,1.1～1.9 cm,≥2.0 cm were respectively 18.2%(4/22),50.0%(11/22),81.8%(18/22),and TK1 level positive rates of these diameter were respectively 22.7%(5/22),45.5%(10/22),90.9%(16/22).There was significant difference between the single polyps(4.5%(1/22) vs 9.1%(2/22))and polyposis(68.2%(15/22)vs 63.6%(14/22))in the level positive rate of CD24 and TK1(P＜0.05).ConclusionThe expression levels of TK1 and CD24 were high in colorectal polyps,but with the differences in the degree of hyperplasia,pathological types,number and size of the tumors,the expression levels were different.

CD24 level;TK1 level;Colorectal polyps;Pathological relationship;Clinical value

R574.6

A

1003—6350（2016）19—3109—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.19.004

2016-04-06)

广东省深圳市盐田区2014年度科技计划资助项目(编号：20140001)

庞念德。E-mail：pangniande@163.com