血管紧张素Ⅱ-2型受体基因多态性与老年原发性高血压患者动态血压参数的相关性

寇学俊　王　磌　曹万才　张迅英

(山东省交通医院心内科，山东　济南　250031)



血管紧张素Ⅱ-2型受体基因多态性与老年原发性高血压患者动态血压参数的相关性

寇学俊王磌曹万才张迅英

(山东省交通医院心内科，山东济南250031)

〔摘要〕目的研究血管紧张素Ⅱ-2型受体(AT2R)基因A1675G多态性与老年原发性高血压(EH)患者动态血压参数的相关性。方法应用聚合酶链式反应(PCR)技术检测90例老年EH患者和83例正常老年人的AT2R A1675G多态性，同时对老年EH患者作24 h动态血压监测(24 h ABPM)。结果老年EH组AT2R A1675G基因G等位基因频率比正常血压家系组低(P<0.05)。AG、GG基因型EH患者24 h及白天、夜间的收缩压(SBP)、舒张压(DBP)和白天平均动脉压(MAP)水平显著低于基因型AA组(P<0.05)。结论AT2R基因A1675G多态性与老年EH患者动态血压参数具有相关性。

〔关键词〕原发性高血压；血管紧张素Ⅱ-2型受体；基因多态性

血管紧张素Ⅱ-2型受体(AT2R)是肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)的重要组成部分，通过与血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)结合介导一系列心血管作用。最新研究显示血管紧张素Ⅱ-2型受体(AT2R)具有拮抗AT1R的功能〔1〕，如AT2R可介导血管舒张、降低血压等〔2〕，可能是一种潜在的心脏、血管保护性受体，但AT2R与老年原发性高血压(EH)的关系目前尚无定论，因此本研究探讨AT2R基因多态性与老年EH的关系。

1材料与方法

1.1研究对象2012年选取潍坊市老年EH组和老年正常血压(NT)组。依照2009年《中国高血压防治指南》的诊断标准：在未服用抗高血压药物情况下收缩压(SBP)≥140 mmHg 和(或)舒张压(DBP)≥90 mmHg，并排除继发性高血压、肝肾疾患、糖尿病、妊娠性高血压及其他心脑血管疾病。NT组SBP≤140 mmHg 及DBP≤90 mmHg，经病史、体检、心电图及生化指标排除心脑血管疾病、糖尿病及肝肾疾患。两组间年龄、体重指数(BMI)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、空腹血糖(FPG)比较差异均无统计学意义(P> 0.05)。EH组SBP与NT组比较差异显著(P<0.05)；EH组舒张压与NT组比较差异显著(P<0.05)。见表1。

表1　两组一般临床资料±s)

与NT组比较：1)P<0.05

第一作者：寇学俊(1985-)，男，医师，硕士，主要从事高血压的发病机制及治疗方式研究。

1.2方法

1.2.1主要试剂全血基因组DNA提取试剂盒购自济南科瑞生物公司，PCR反应体系购自山东赛恩斯科技有限公司。

1.2.2基因检测用EDTA抗凝外周静脉血5 ml，采用低渗溶血-盐析法用DNA专用提取试剂盒抽提白细胞基因组DNA。PCR引物：上游序列ATTACGTCCCAGCGTCTGAG，下游序列ATAAATCAGCTTGCTTAGTGCC。PCR产物经12 %聚丙烯酰胺凝胶电泳，溴乙啶(EB)染色，紫外灯下观察结果。AA型：野生型(2个片段组成：390 bp，162 bp)；AG型：杂合突变型(3个片段组成：390 bp，270 bp，162 bp)；GG型：纯和突变型(2个片段组成：390 bp，270 bp)。对AT2R基因A1675G SNP进行测序，测序采用sanger双脱氧链终止法，利用上海华大基因有限公司3730测序仪和配套Bigdye测序试剂盒完成。

1.2.324 h动态血压(24 h ABPM)监测采用美国Suntech公司无创式动态血压仪。ABPM袖带固定于右上肢，白天(6AM~10PM)每30 min、夜间(10PM~6AM)每45 min自动测试一次，记录时间不少于23 h，得到至少42组数据。输入计算机，由Suntech软件处理数据，统计白天、夜间、24 h SBP、24 h DBP及平均动脉压(MAP)。

1.3统计学方法应用SPSS17.0 统计软件进行t及χ2检验。

2结果

2.1AT2R基因多态性AT2R A1675G基因可分为：AA型(野生型)、AG型(杂合突变型)、GG型(纯和突变型)。见图1，图2。

2.2两组AT2R A1675G基因基因型及等位基因分布比较EH组AA型、AG型和GG型频率与NT组比较差异显著(P< 0.05)；EH组等位基因A、G频率与老年NT组比较差异显著(P<0.05)。见表2。

2.3AT2R A1675G基因多态性与老年EH患者动态血压水平的关系白天、夜间及24 h SBP，白天、夜间及24 h MAP，白天的DBP在3种基因型间比较，差异显著(P均<0.05)；将AG与GG合并为一组与AA组进行比较，白天、夜间及24 h SBP，白天、夜间及24 h MAP，白天的DBP在AG+GG组明显低于AA组(P< 0.05)。见表3。

图1　扩增产物经12%聚丙烯酰胺凝胶电泳结果

图2　各基因型测序结果

组别n基因型〔n(%)〕AAAGGG等位基因频率(%)AGEH组8748(55.1)16(18.4)23(26.4)64.435.6NT组8323(27.7)18(21.7)42(50.6)38.661.4χ2/P值14.39/<0.05 11.34/<0.05

表3　不同基因型老年EH患者动态血压水平比较±s,mmHg)

与AA基因型比较：1)P<0.05；将AG与GG合并为一组与AA组进行比较：2)P<0.05

3讨论

高血压是导致老年人脑卒中、冠心病、充血性心力衰竭、肾衰竭、主动脉夹层等疾病的发病率和致死率增高的主要危险因素，严重影响老年人的健康和生活质量〔3〕。RAAS在高血压发病中起重要的作用，AngⅡ是RAAS的主要效应物质，AngⅡ的大多数功能与AT1R有关〔4〕，如血管舒缩、水盐代谢、心肌和血管壁纤维化、内皮素释放等〔5〕。近年来研究发现，AT2R与AT1R存在拮抗性交互作用〔6〕，AT2R可与G1蛋白相耦联抑制细胞增殖，使血管扩张，其在心肌肥厚、心肌梗死、心肌病、心力衰竭等病理状态下表达增加〔7，8〕。

本研究结果说明G等位基因具有保护作用，能够防止高血压的发生，这与国外有关报道相一致〔9〕，提示AT2R基因A1675G与山东省潍坊地区老年EH有相关性。对老年EH组行24 h ABPM，结果提示G等位基因对血压水平的影响，特别是与老年EH收缩压的降低有关。

RAS的活性随年龄的增长而呈下降趋势,老年EH多属收缩性高血压。AT2R通过缓激肽/NO依赖机制介导扩张血管及抑制心肌纤维化的功能〔10〕。而携带AT2R 1675G等位基因的个体可表达较多的AT2R蛋白质，从而在老年EH中起到保护作用〔11〕。本研究仅分析了1个多态位点与动态血压的关系，并且未排除低密度脂蛋白、高密度脂蛋白等因素对动态血压的影响造成的，因此有待于进行多基因突变位点联合分析AT2R基因位点多态性与老年EH患者动态血压的相关性。

4参考文献

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8Schmieder RE,Erdmann J,Delles C,etal.Effect of the angiotension Ⅱ type 2-receptor gene(+1675G/A)on left ventricular structure in humans〔J〕.J Am Coll Cardiol,2001;37(1):175-82.

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10刘智贤,丛洪良,崔让庄.血管紧张素受体基因多态性与高血压及其相关疾病〔J〕.天津医药,2008;36(1):72-4.

11Warnecke C,Mugrauer P,Surder D,etal. Intronic Ang Ⅱ type 2 receptor gene polymorphism 1675 G/A modulates receptor protein expression but not mRNA splicing〔J〕.Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol,2005;289(6):1729-35.

〔2013-09-01修回〕

(编辑安冉冉/曹梦园)

〔中图分类号〕R541

〔文献标识码〕A

〔文章编号〕1005-9202(2016)03-0575-03；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.03.026

·心、脑血管及代谢性疾病·