菜粕替代鱼粉对虹鳟(Oncorhynchus mykiss)生长、体组成和血液学指标的影响

■崔存河 杨成辉 卜宪勇 唐白冰 杨雨虹

（1.哈尔滨市农业科学研究院水产分院，黑龙江哈尔滨 150078；2.东北农业大学动物科学技术学院，黑龙江哈尔滨 150030）

鱼粉是水产动物的第一大蛋白源。通常在肉食性鱼类饲料中鱼粉的添加量达到50%以上[1]。但世界鱼粉资源逐年短缺，价格昂贵，使得寻找可替代鱼粉的优质蛋白源已迫在眉睫。近些年来，因豆粕拥有相对平衡的氨基酸，以及其良好的适口性，已经成为水产配合饲料中的第二大蛋白源，常用来替代鱼粉作为主要蛋白源，但随着豆粕的需求量不断加大，价格也处于飞速上涨的状态。菜粕和豆粕一样是一种植物性蛋白原料，含有32%以上的粗蛋白，其富含较为平衡的氨基酸且价格较为低廉。但菜粕中含有抗营养因子，如硫代葡萄糖甙、植酸和芥子碱等，这些有毒物质可产生刺激性气味，造成菜粕适口性差，降低动物摄食率，故其营养水平低于豆粕和鱼粉。尽管如此，大量的研究表明，菜粕可应用于奥尼罗非鱼[2]、六须鲶[3]、大菱鲆[4]的饲料中。由此看来，在合理利用蛋白源的基础上，利用更廉价的植物蛋白源作为饲料的蛋白源之一已成趋势，故合理利用菜粕在饲料中的应用是势在必行的。本文以虹鳟(Oncorhynchus mykiss)为试验对象，研究不同比例的菜粕替代鱼粉后对虹鳟生长性能和体成分的影响，为水产动物营养研究和菜粕在水产配合饲料生产中的合理应用提供理论基础。

1 材料方法

1.1 试验饲料

试验选用的原料均购自哈尔滨饲料大市场。试验饲料组成及营养水平见表1。对照组不含菜粕，含有43.96%的粗蛋白，以鱼粉和玉米蛋白为主要的蛋白源，以（1∶1）的鱼油和豆油为主要脂肪来源，对照组饲料中含有鱼粉的比例为45%，试验组饲料中分别含有6.93%、13.86%、20.77%、34.61%、48.46%的菜粕，相应替代10%、20%、30%、50%、70%的鱼粉蛋白，添加蛋氨酸和赖氨酸，共配制成6种等氮、等能饲料，维生素预混料及矿物质预混料参照NRC(2003)标准配制。

表1 试验饲料组成及营养水平(干物质基础，%)

1.2 饲养管理

试验用虹鳟鱼购自中国水产科学研究院牡丹江试验站。正式试验前，采用基础饲料驯养虹鳟鱼两周，使其适应试验饲料。然后挑选出体格健壮、规格一致、(9.80±0.04)g的试验鱼进行分组试验。采用单因素完全随机分组，450尾虹鳟鱼，按每组3个重复随机分为6个组，每个重复放养25尾鱼。采用容积为150 L的玻璃缸，循环水的流量控制在2.1 L/min，水温(15±1)℃，溶氧＞8.0 mg/l，氨氮＜0.10 mg/l，pH值为7.6～8.0。以表观饱食法进行投喂，每天09:00和16:00各投喂1次，准确记录摄食量。以重复组为单位，每30 d对全部试验鱼进行称重。每周对试验缸进行清洗、消毒2次，试验期持续90 d。

1.3 样品采集与分析

饲养试验结束后，将鱼禁食1 d后进行称重，在每组中随机取出6尾鱼，分别测量每尾鱼的体重、体长以及肝脏的重量，并计算肥满度、脏体比和肝体比等指标，从鱼体侧面取出肌肉，用封口袋包装后放入-20℃冰箱中保存，以备分析肌肉营养组成。另随机取6尾鱼作全鱼体成分分析。

1.4 分析方法

全鱼与肌肉的粗蛋白质、粗脂肪、粗灰分均采用AOAC国际标准方法（AOAC，1995）。采用凯氏定氮法进行粗蛋白质的测定（N×6.25）；采用索氏提取法进行粗脂肪的测定（以乙醚为溶剂）；采用灼烧法测定粗灰分的含量（将样本在550℃马弗炉中灼烧）。

1.5 计算公式

增重率(WG,%)=100×(末体质量-初体质量)/初体质量；

特定生长率(%/d)=100×（ln终末体重-ln初始体重）/试验天数；

饲料系数(FCR)=摄食饲料总量/鱼体增重量；

蛋白质效率(PER)=鱼体增重量/蛋白质摄取量；

成活率(SR，%)=(试验结束时尾数)/(试验开始时尾数)×100；

肝体比(%)=（肝脏重量/鱼体重量）×100；

脏体比(%)=（内脏重量/鱼体重量）×100；

肥满度(g/cm3)=[鱼体重量(g)/体长3(cm3)]×100；

1.6 数据处理

采用SAS 9.12统计软件对数据进行统计学分析，试验结果用“平均数±标准差(means±SEM)”表示，先对数据作单因素方差分析(ANOVA)后进行多重比较，显著水平为P＜0.05。

2 结果

2.1 菜粕替代鱼粉对虹鳟生长的影响（见表2）

表2 菜粕替代鱼粉对虹鳟生长及饲料利用的影响

由表2可知，随着饲料中菜粕含量的增加，虹鳟鱼的增重率呈先上升后降低的趋势，其蛋白质效率以及特定生长率同增重率趋势，在RSR20组出现最大值。饲料系数呈先降低后升高的趋势，RSR50和RSR70组的饲料系数显著高于其他各组(P＜0.05)，RSR20组的饲料系数最低。肝体比、脏体比、肥满度在RSR0～RSR30组无显著差异(P＞0.05)，RSR70组显著低于对照组(P＜0.05)。

2.2 菜粕替代鱼粉对虹鳟体成分的影响（见表3）

以全鱼、肌肉的主要营养成分对虹鳟品质进行评定。由表3可知，随着饲料中菜粕含量的增加，全鱼的粗蛋白、粗脂肪和粗灰分在各组间均无显著差异（P＞0.05）；肌 肉的粗 蛋 白、粗脂 肪 、粗 灰分在RSR0～RSR30组无显著差异，RSR70组的粗蛋白、粗脂肪和粗灰分显著低于对照组(P＜0.05)。

表3 菜籽粕替代鱼粉对虹鳟体成分的影响(干物质基础)(%)

2.3 菜粕替代鱼粉对虹鳟血液指标的影响（见表4）

由表4可知，随着菜粕在饲料中替代比例的增加，谷草转氨酶活性、谷丙转氨酶活性呈现上升趋势，RSR0～RSR30组间无显著差异，RSR50和RSR70组与对照组相比显著升高(P＜0.05)。血清中总蛋白的含量在RSR0～RSR30组无显著差异，RSR50组较对照组有所降低但差异不显著（P＞0.05），RSR70组血清中总蛋白为31.50 g/l，显著低于对照组(P＜0.05)。甘油三酯的含量呈现上升趋势，RSR50和RSR70组的甘油三酯显著高于对照组(P＜0.05)。

表4 菜籽粕替代鱼粉对虹鳟血液学指标的影响

3 讨论

3.1 菜粕替代鱼粉对虹鳟生长的影响

水产饲料中的动植物蛋白比例对鱼类生长有至关重要的影响，其合理的比例与动物种类和动物食性等多种因素密切相关，评定养殖效果的指标通常选用其生长效率及动物机体对饲料的利用率[5]。为了降低养殖成本，用植物蛋白源部分甚至全部替代鱼粉，减少鱼粉的使用量，进而获得更大的经济效益，成为了国内外研究水产动物营养的热点。

在本试验条件下，当替代比例为20%时，虹鳟的生长效果最佳。饲料中适量的动物蛋白源与植物蛋白源产生互补效应，使饲料中氨基酸更加平衡，且必需氨基酸的平衡程度得到提高，更加利于鱼体的吸收与利用。适量的菜籽粕和鱼粉使饲料中的蛋白源平衡，进而提高鱼体生长性能。李二超等[6]研究发现，饲料中合适的动植物蛋白比例可显著影响凡纳滨对虾的生长和成活率，单一的动物性蛋白或者鱼粉的使用，并不能获得最佳的生长性能。本试验中，当菜籽粕替代鱼粉比例达到30%时，并未影响鱼体生长以及饲料利用，说明该替代比例可用于虹鳟饲料中，进而降低饲料成本；但当替代比例达到50%时，增重率和蛋白质效率显著降低，肝体比与对照组之间开始出现显著差异，说明高含量菜粕饲料对虹鳟的肝脏发育产生负影响。这可能与菜粕中的抗营养因子有关。有研究发现，菜粕中的抗营养因子如硫代葡萄糖甙、单宁、芥子酸、植酸等可影响饲料的适口性，降低鱼体生长性能和饲料利用，引起机体代谢紊乱和生长受阻等不良现象[7]。本试验中，以生长性能和饲料利用率来评价，虹鳟稚鱼饲料中菜粕替代比例不宜超过30%。这一结果与Webster等[8]在斑点叉尾鮰(Ictalueus punctatus)、王忠等[9]在鲤(Cyprinus carpio)和 Higgs等[10]在大鳞大马哈鱼(Oncorhynchus tshawytscha)等鱼类试验结果基本一致。

3.2 菜粕替代鱼粉对虹鳟体成分的影响

鱼体的营养组成作为重要的生长指标可以反映鱼类的生长水平和生理状态。本试验选用虹鳟全鱼以及肌肉的粗蛋白、粗脂肪和粗灰分对试验鱼品质进行综合评定。试验结果表明，随着饲料中菜粕替代比例的增加，全鱼的营养成分在各组间均无显著差异；肌肉的营养成分在RSR0～RSR30组没有明显变化，RSR70组的粗蛋白、粗脂肪和粗灰分显著低于对照组。鱼体肌肉中粗蛋白和粗脂肪含量在RSR70组时最低，可能是由于菜粕影响了饲料的适口性，造成鱼体摄食量降低，使得摄入的蛋白质和脂肪不能满足生长需求，造成其在肌肉中的沉积减少。这与其他学者在大菱鲆(Psetta maxima)和奥尼罗非鱼(Oreochromis niloticus×O.aureus)等鱼类试验结果基本相似[11]。

3.3 菜粕替代鱼粉对虹鳟血液学指标的影响

作为重要的生化指标，血液中的谷草转氨酶和谷丙转氨酶能够反映动物机体的健康情况和生理状况。谷草转氨酶和谷丙转氨酶是细胞内酶，在肝、肾、心肌、脑及其它组织中均存在，在健康动物的血清中活力很小。当机体因组织病变或受损伤的组织范围较大时引起细胞的通透性增高，使细胞内的转氨酶大量释放到血清中，使血清中转氨酶浓度大大增高，通过测量血清中转氨酶的含量来判断机体是否出现非健康状况。谷丙转氨酶活性的升高常反映肝功能障碍，谷草转氨酶活性的升高常反映心脏或肌肉组织发生障碍；血清中总蛋白质的降低表示动物机体的肝功能发生了障碍；甘油三酯反映出动物体内脂肪的代谢状况，甘油三酯的含量升高，表明在肝脏中脂肪堆积较多，易导致脂肪肝、肝脏肥大等症状。

本试验中，随着菜籽粕在饲料中替代比例的增加，谷草转氨酶活性、谷丙转氨酶活性呈现上升趋势，RSR0～RSR30组间没有显著差异，RSR50和RSR70组与对照组相比显著升高。血清中总蛋白质的含量在RSR0～RSR30组间无显著差异，RSR70组血清中总蛋白质含显著低于对照组。甘油三酯的含量呈现上升趋势，RSR50和RSR70组的甘油三酯显著高于对照组。试验结果说明饲料中添加高比例的菜粕使虹鳟的肝功能和脂肪代谢发生障碍，对肝功能、心脏及肌肉组织产生了负面影响，这与赵会宏等[12]和章怀云等[13]的研究相似。

4 结论

本试验条件下，在0～30%替代比例内，菜粕不会对虹鳟稚鱼的生长性能及饲料利用、体组成以及血液学指标产生显著影响；但当替代比例达到50%并超过50%时，虹鳟稚鱼的增重率、蛋白质效率、特定生长率显著降低，饲料系数显著升高，血液学指标受到显著影响，鱼体的正常生长受到明显抑制，严重妨碍动物机体正常的生理机能。综合考虑养殖成本及鱼体生长效果，虹鳟稚鱼饲料中菜粕的添加量为30%时可获得最大收益，并可以应用到实际养殖生产中。