苜蓿草粉对松辽母猪血清生化和抗氧化酶性能指标影响的研究

■ 姜海龙 赵金波 蒙洪娇 秦贵信

（1.吉林农业大学，吉林长春 130118；2.黑龙江省畜牧研究所，黑龙江齐齐哈尔 161005）

松辽黑猪是吉林省农业科学院畜牧分院培育的具有自主知识产权的适合北方饲养的瘦肉型品种，它以吉林本地猪为母本、丹系长白猪为第一父本、美系杜洛克为第二父本,采用三元杂交育种法进行培育。该品种具有耐寒、耐粗饲的优良特点，能够采食大量的粗纤维类饲料[1]。郭海燕等（2007）[2]选用 63 头试验母猪，饲喂高、中、低三种水平的日粮，发现初产母猪妊娠早期血清和子宫液中胰岛素样生长因子-Ⅰ（IGF-Ⅰ）、胰岛素以及生长素与采食不同营养水平日粮高度相关。而Geisert等（2002）[3]也发现母猪采食饲粮后，影响妊娠早期胚胎成活率主要通过影响血清中胰岛素分泌，胰岛素影响孕激素、雌激素的分泌和调节。加之，超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量两种重要的氧化系统的酶类，是机体清除自由基的重要手段，超氧化物歧化酶活性的不断增加，丙二醛含量的降低是机体清除代谢废物良性表现，表明机体维持良好的稳态，是健康的。研究苜蓿草粉对松辽母猪血清生化和抗氧化指标对合理调控松辽黑猪繁殖性能的营养调控技术具有十分重要的意义，能进一步丰富完善松辽黑猪能大量利用粗纤维饲料的理论依据。

1 材料和方法

1.1 试验方法

试验采用单因子试验设计，见表1。将10头松辽黑母猪随即分为两个处理组，试验组和对照组，每个处理组5个重复，每个重复1头，单栏饲喂，配置基础日粮，两个处理组分别在基础日粮基础上添加以苜蓿草为纤维源粗纤维水平7.2%和以小麦麸为纤维源粗纤维水平为3.8%的基础对照组日粮，预饲期为7 d，试验期为150 d。

表1 试验设计

1.2 试验日期与场地

试验期共计150 d，饲养试验在吉林省农业科学院畜牧分院原种猪场进行。

1.3 试验日粮

试验日粮和对照日粮以玉米和豆粕为主要原料，按照《中国母猪饲养标准》（2008）的各个营养成分和营养价值表配置日粮。对照组和试验组除了粗纤维水平不同之外，其他营养成分都根据饲养标准的要求来配置日粮。对照组不添加苜蓿草的粗纤维水平应为3.8%，试验组添加以苜蓿草为粗纤维水平的应为7.2%，详见表2。

表2 试验饲粮配方及主要营养水平（风干基础）

1.4 日常管理

试验母猪采用单栏饲养，母猪采用自由饮水，免疫程序按照吉林农业科学院原种猪场提供的程序进行免疫，每天饲喂两次，上午8：00一次，下午16：00一次，每次饲喂量采用分阶段饲养模式中参考的饲喂量，妊娠早期饲喂量为2.00 kg，妊娠中期饲喂量为3.00 kg，妊娠后期饲喂量采用自由采食的方式来满足母猪体内胎儿的生长发育的需要。每天清粪两次。并且每天观察母猪的行为状态。

2 测定指标

2.1 血清中尿素氮含量的测定

采用二乙酰一肟法测定血清尿素氮的含量，二乙酰一肟根据双乙酰与尿素在强酸条件下形成粉红色二嗪化合物（Fearon反应）。

2.2 血清中总蛋白含量的测定

采用双缩脲法测定血清总蛋白的含量，尿素被加热，则两分子的尿素放出一分子氨而形成双缩脲，双缩脲在碱性环境中能与硫酸铜结合成紫色化合物。

2.3 血清中胰岛素、IGF-Ⅰ及甲状腺激素含量的测定

采用生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法测定猪胰岛素的水平、IGF-Ⅰ水平及甲状腺激素水平，基本过程：酶标板-加入样本—温育—生物素标记抗样本抗体—链霉素结合—温育和洗涤—加入底物A、B—观察颜色。

2.4 血清丙二醛（MDA）含量的测定

MDA是过氧化脂质的降解产物，它可以与硫代巴比妥（TBA）产生缩合反应，反应出现的现象是形成红色产物，532 nm处有光吸收峰，丙二醛测定的方法采用硫代巴比妥酸法测定血清中丙二醛的含量。

2.5 血清超氧化物歧化酶活性的测定

测定血清中超氧化物歧化酶活性的主要方法是通过分光光度计来测量血清的吸光度，

3 试验统计

试验数据采用SPSS（17.0）软件方差分析和相关性分析 。显著性水平用“P＜0.05”表示。各组试验数据均以“平均值±标准误”表示。

4 结果与分析

4.1 日粮纤维对松辽母猪妊娠前期血液生化指标的影响（见表3）

由表3可知，在本试验条件下，对照组与试验组的总蛋白含量差异不显著（P＞0.05），在尿素氮、胰岛素含量之间存在显著性差异（P＜0.05），IGF-Ⅰ含量试验组则显著高于对照组（P＜0.05），甲状腺激素含量中，对照组高于试验组，存在显著性差异（P＜0.05）。总蛋白和尿素氮含量是两个反映机体蛋白质代谢状况的指标，妊娠前期母猪在总蛋白和尿素氮含量上，对照组分别比试验组高4.75 g/l、2.01μg/ml。胰岛素、甲状腺素含量是两个反映机体营养物质代谢状况以及与繁殖激素分泌相关的生化指标，试验组较对照组低6.65 μg/l、28.78 ng/ml。

表3 日粮纤维对母猪妊娠前期血液生化指标的影响

4.2 日粮纤维对松辽母猪妊娠中期血液生化指标的影响（见表4）

表4 日粮纤维对母猪妊娠中期血液生化指标的影响

由表4可知，在本试验条件下，妊娠中期饲喂的高纤维水平的松辽黑母猪在胆固醇生化指标存在显著差异（P＜0.05）；胰岛素、IGF-Ⅰ、甲状腺激素含量上，对照组高于试验组，并且存在显著性差异（P＜0.05）。

4.3 日粮纤维对松辽母猪妊娠后期血液生化指标的影响（见表5）

表5 日粮纤维对松辽母猪妊娠后期血液生化指标的影响

由表5可知，在本试验条件下，妊娠后期饲喂高水平日粮的松辽黑母猪，试验组的胆固醇、甲状腺激素的血液生化指标显著低于对照组日粮（P＜0.05），而试验组中的IGF-Ⅰ含量稍高于对照组日粮，尿素氮和总蛋白的含量上，对照组显著高于试验组（P＜0.05）。

4.4 日粮纤维对松辽母猪妊娠前期血清抗氧化酶活性的影响（见表6）

由表6可知，在本试验条件下，妊娠前期母猪采食纤维日粮，对照组与试验组在血清中超氧化物歧化酶活性和丙二醛的含量之间存在显著性差异（P＜0.05），对照组明显高于试验组，分别高出6.66 U/ml、0.20 nmol/ml。

表6 日粮纤维对母猪妊娠前期血清抗氧化性能的影响

4.5 日粮纤维对松辽母猪妊娠中期血清抗氧化酶活性的影响（见表7）

表7 日粮纤维对母猪妊娠中期血清抗氧化性能的影响

由表7可得，在本试验条件下，在血清超氧化歧化酶活性上，对照组与试验组之间差异不显著（P＞0.05），但丙二醛的含量对照组高于试验组，并且存在显著性差异（P＜0.05），相比妊娠前期血清抗氧化酶的活性，对照组超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量都有下降的趋势。

4.6 日粮纤维对松辽母猪妊娠后期血清抗氧化酶活性的影响

表8 日粮纤维对母猪妊娠后期血清抗氧化性能的影响

由表8可知，在对照组与试验组在血清中超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量上存在显著性差异（P＜0.05），试验组明显高于对照组，分别高6.08 U/ml、0.58 nmol/ml。对照组的妊娠后期与其妊娠前期和中期血清超氧化物歧化酶活性、丙二醛的含量有所降低。试验组的妊娠后期与其妊娠前期和中期的超氧化物歧化酶活性相比有所增加。

5 讨论

在本试验条件下，研究发现，对照组妊娠前期、中期、后期，妊娠母猪血清超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量随着妊娠期不断增加，而逐渐的下降。试验组超氧化物歧化酶活性随着妊娠期的不断增加有所提高，且在妊娠后期显著高于对照组（P＜0.05）；丙二醛含量随妊娠期的增加而降低，但在妊娠前期和中期的含量显著低于对照组（P＜0.05），而在妊娠后期含量显著高于对照组（P＜0.05）。这可能由于苜蓿草粉具有改变血清中抗氧化酶活性的作用，提高机体抗氧化能力。另外，苜蓿草粉含有大量的皂角、黄酮等天然抗氧化物质也可以影响机体抗氧化水平，提高松辽黑猪的机体的氧化还原状态。关于松辽黑猪血清生化指标方面的研究结果与葛德军[4]研究结果基本一致，这样结果表明日粮纤维具有影响机体胰岛素、IGF-Ⅰ分泌水平，对不同妊娠时期，血液生化指标影响较大，这种原因的出现可能是妊娠母猪所处的不同生理阶段所致。