培美曲塞联合顺铂化疗方案对老年非小细胞肺癌患者外周血淋巴细胞表型变化的影响

培美曲塞联合顺铂化疗方案对老年非小细胞肺癌患者外周血淋巴细胞表型变化的影响

胡伟华陈振平1王磊1肖卫1许菊秀1

(长江大学临床医学院，湖北荆州434000)

摘要〔〕目的探讨培美曲塞联合顺铂(CDDP)化疗方案对老年非小细胞肺癌(NSCLC)外周血淋巴细胞亚群的影响。方法选择年龄≥60岁的NSCLC 患者64例，给予培美曲塞500 mg/m2，第1天静脉滴注，顺铂25 mg/m2，第1～3天静脉滴注，21 d为1个周期，每例患者至少治疗治疗两个周期。另以同期健康查体者作为对照组，流式细胞仪检测外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD16+56+及CD19+细胞百分率和CD4+/CD8+比值。 结果老年NSCLC患者化疗前CD4+、CD16+56+细胞百分率及CD4+/CD8+比值显著低于健康对照组(P<0.05)，CD3+、CD8+及CD19+细胞百分率变化与对照组比差异较无统计学意义(P>0.05)；化疗后CD4+、CD16+56+细胞百分率及CD4+/CD8+比值较化疗前明显升高(P<0.05)，CD3+、CD8+及CD19+细胞百分率较化疗前后无显著差异(P>0.05)。结论培美曲塞联合顺铂化疗可改善老年NSCLC患者的免疫功能。

关键词〔〕培美曲塞;顺铂;非小细胞肺癌;淋巴细胞表型

中图分类号〔〕R732〔文献标识码〕A〔

通讯作者：陈振平(1966-)，男，副主任医师，硕士，主要从事眼科疾病临床研究。

1长江大学附属第一医院呼吸内科

第一作者：胡伟华(1977-)，女，硕士，主治医师，主要从事肺癌及COPD研究。

由于老年患者器官功能减退，并且常伴发多种其他系统疾病，因此，老年非小细胞肺癌(NSCLC)患者的治疗越来越受到关注。培美曲塞为多靶点叶酸拮抗剂，可抑制多种代谢酶，导致嘌呤和嘧啶合成障碍来发挥其抗肿瘤作用〔1~3〕，2008年美国食品药品监督局(FDA)批准培美曲塞联合顺铂作为治疗非鳞癌NSCLC患者的一线化疗方案〔4,5〕。由于该化疗方案高效、低毒等特点，可应用于老年NSCLC患者的治疗。本研究旨在观察培美曲塞联合顺铂(CDDP)化疗前后老年NSCLC患者外周血淋巴细胞亚群的变化。

1对象与方法

1.1研究对象选择2011年10月至2012年2月来我院就诊的老年NSCLC患者64例，均有测量病灶，年龄60～89〔平均(68.1±8.6)〕岁，男40例，女24例。所有患者根据美国联合癌症分类委员会(AJCC)和国际抗癌联盟(UICC)2007年制定的TNM分期第7版，分为Ⅳ期。ⅠB期2例，ⅡA～ⅡB期8例，ⅢA期14例，ⅢB～Ⅳ期40例。病理类型为腺癌41例、鳞癌18例、腺鳞癌5例。所有患者Karnofsky评分≥60分，预计生存≥3个月，均无免疫系统疾病，化疗前心电图、肝肾功能均正常，既往1个月内未行其他抗肿瘤治疗。入选同一时期于我院查体的38例健康者作为健康对照组，男24例，女14例，平均年龄(54.2±9.3)岁。两组研究对象在性别、年龄分布无差异。

1.2治疗方法培美曲塞500 mg/m2，第1天静脉滴注，顺铂25 mg/m2，第1～3天静脉滴注，21 d为1个周期，每例患者至少治疗治疗两个周期。化疗期间给予5-HT3受体拮抗剂和其他止吐药物，以减轻消化道反应。

1.3检测方法健康对照组于清晨空腹抽取静脉血约3 ml(肝素抗凝)，64例老年NSCLC患者于化疗前2 d及化疗结束后第7天分别空腹抽取静脉血约3 ml(EDTA抗凝)。淋巴细胞及其亚群表面抗原表达采用直接免疫荧光标记全血溶血法进行测定，包括CD3+、CD4+、CD8+、CD16+56+及CD19+，并计算CD4+/CD8+比值。将肝素抗凝的外周血100 μl，分别加入不同荧光标记的单克隆抗体(mAb)各20 μl，避光条件下反应15 min后加入细胞裂解液，使红细胞溶解破裂，PBS液洗涤2次。采用用流式细胞仪(美国BD公司，FACS Calibur)对样品进行检测，每份待测样品同步做同型对照，在直方图中框出淋巴细胞群，Cellquest软件分析数据，分别计算出10 000个淋巴细胞中个阳性细胞的百分比。

1.4统计学方法采用SPSS16.0统计学软件进行分析，定量资料组间比较行t检验。

2结果

2.1CDDP化疗方案对NSCLC患者外周血淋巴细胞表型的影响与健康对照组比较，老年NSCLC患者化疗前CD4+、CD16+56+细胞百分率及CD4+/CD8+比值显著降低(P<0.05)，CD3+、CD8+及CD19+细胞百分率变化与健康对照组无统计学差异(P>0.05)；化疗前后CD4+、CD16+56+细胞百分率及CD4+/CD8+比值较化疗前明显升高(P<0.05)，而CD3+、CD8+及CD19+细胞百分率较化疗前无显著差异(P>0.05)。见表1。

2.2CDDP化疗方案对不同类型NSCLC患者外周血淋巴细胞亚群的影响化疗前，腺癌、鳞癌及腺鳞癌三组患者CD4+、CD16+56+细胞百分率及CD4+/CD8+比值明显低于对照组(P<0.05)，CD3+、CD8+及CD19+细胞百分率变化与对照组无统计学差异(P>0.05)；化疗后，CD3+、CD4+、CD8+、CD16+56+及CD19+细胞百分率和CD4+/CD8+比值与对照组比较无统计学差异(P>0.05)；与化疗前比较，三组患者化疗后CD4+、CD16+56+细胞百分率及CD4+/CD8+比值明显升高(P<0.05)，然而与化疗前比较，CD3+、CD8+及CD19+细胞百分率变化无统计学差异(P>0.05)。

表1　CDDP化疗方案治疗老年NSCLC患者外周血淋巴细胞表型的变化 ± s)

与健康对照组比较：1)P<0.05;与本组治疗前比较：2)P<0.05，下表同

表2　CDDP化疗方案对不同类型NSCLC患者外周血淋巴细胞亚群影响 ± s，%)

3讨论

培美曲塞是抑制新型多靶点抗叶酸药物，作用于叶酸依赖性代谢途径中的胸苷酸合成酶、二氢叶酸还原酶和甘氨酰胺核苷甲酰基转移酶等，抑制嘌呤和嘧啶核苷酸合成，控制肿瘤细胞生长，具有高效、低毒等特点〔6,7〕，可用于治疗老年NSCLC患者。

肺癌的发生、发展及转归与机体免疫功能状态密切相关，研究发现，以T淋巴为主的细胞免疫对肿瘤细胞的防御和清除发挥着关键的作用，其比例失调与肿瘤的发生密切相关〔8,9〕。T细胞亚群中CD3+T淋巴细胞代表总成熟T细胞水平，其水平下降表示机体免疫功能低下；CD4+辅助性T细胞具有免疫调节作用，辅助B细胞产生抗体，其数量减少反映机体免疫反应诱导及效应不足，抗肿瘤能力下降〔10〕；CD8+T淋巴细胞又称细胞毒性T淋巴细胞(TCL)，其活化后分泌可溶性抑制因子，从而抑制CD4+T细胞与B细胞功能，使肿瘤逃避免疫攻击，与肿瘤的存在、发展及肿瘤宿主的免疫抑制状态密切相关〔11〕；CD4+/CD8+比值动态平衡是维持机体细胞免疫功能稳定的重要基础，比值降低可反映T细胞亚群失衡致机体免疫功能低下；CD16+56+为NK细胞的特异性标记，可直接杀伤肿瘤细胞或病毒感染的细胞，是抗肿瘤的第一道防线；CD19+是B淋巴细胞表型，负责机体的体液免疫〔12〕，因此，老年NSCLC患者外周血淋巴细胞亚群的变化可有效反映机体肿瘤免疫能力的变化。

本研究表明老年NSCLC患者体内T淋巴细胞亚群水平的改变以及NK细胞免疫功能的降低，与先前研究一致〔13〕，可能是导致机体异常细胞逃避宿主免疫监视并诱发肿瘤发生和发展的主要原因。然而，CODP化疗后老年NSCLC患者机体免疫微环境得到明显改善。

综上所述，CODP化疗方案能够改善老年NSCLC患者T细胞亚群及NK细胞水平，对机体免疫微环境具有一定的优化作用。同时，可将外周血淋巴细胞亚群作为一项判断老年NSCLC患者预后的指标，为老年患者化疗药物应用及治疗效果提供参考价值。

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〔2013-09-19修回〕

(编辑曹梦园)