巴戟天醇提物对大鼠脑缺血再灌注损伤组织TNF-αIL-6表达水平的影响

邓 强河南驻马店市中心医院神经外科 驻马店 463000

巴戟天醇提物对大鼠脑缺血再灌注损伤组织TNF-αIL-6表达水平的影响

邓 强
河南驻马店市中心医院神经外科 驻马店 463000

目的 探讨巴戟天醇提物（RMOEE）对大鼠脑缺血再灌注损伤组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）表达水平的影响。方法 40只健康雄性SD大鼠随机均分为假手术组、脑缺血再灌注损伤模型组、RMOEE 3.0g/（kg·d）组、RMOEE 1.5g/（kg·d）组4组，每组10只。RMOEE 3.0g/（kg·d）组、RMOEE 1.5g/（kg·d）组大鼠连续1周按相应剂量进行RMOEE灌胃，而假手术组和脑缺血再灌注损伤模型组大鼠仅进行同体积生理盐水灌胃。末次给药1h后采用改良的Zea-Longa线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型，测定各组大鼠脑组织含TNF-α、IL-6表达水平。结果 RMOEE 3.0g/（kg·d）组、RMOEE 1.5g/（kg·d）组脑组织TNF-α、IL-6表达水平较脑缺血再灌注损伤模型组低（P＜0.05）。RMOEE 3.0g/（kg·d）组、RMOEE 1.5g/（kg·d）组TNF-α、IL-6表达水平比较差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 RMOEE可通过减少TNF-α、IL-6表达而减轻大鼠脑缺血再灌注损伤。

巴戟天醇提物；缺血再灌注损伤；肿瘤坏死因子-α；白介素-6

脑缺血再灌注损伤是颅脑外伤、脑部手术等过程中的常见损伤，其发病与炎症反应关系密切［1］。巴戟天醇提物（radix morindae officinalis ethanolic extracts，RMOEE）是从双子叶植物茜草科植物巴戟天中提取出来的，其在心脏、肾脏缺血再灌注损伤过程中具有抗炎、抗氧化、抗凋亡等作用［23］。本文通过测定RMOEE对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤脑组织肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白介素-6（interleukin-6，IL-6）表达水平的影响，观察其对这种损伤的保护作用。

1 材料与方法

1.1 药品、试剂及仪器 巴戟天（一等品，广东省德庆县药材公司，RMOEE的提取和鉴定由河南省食品药品检验所完成）；TNF-α、IL-6ELISA试剂盒（美国Peprotech公司，批号分别为：20130922、20131107）；全自动酶联免疫分析仪（北京中西远大科技有限公司）。

1.2 实验分组及处理 40只健康雄性SD大鼠，体质量304～347g，由河南省实验动物中心提供，给予适应性喂养1周后，随机均分为假手术组、脑缺血再灌注损伤模型组、RMOEE 3.0g/（kg·d）组、RMOEE 1.5g/（kg·d）组4组，每组10只。RMOEE 3.0g/（kg·d）组、RMOEE 1.5g/（kg·d）组大鼠连续1周按相应剂量进行RMOEE灌胃，而假手术组和脑缺血再灌注损伤模型组大鼠仅进行同体积生理盐水灌胃。末次给药1h后采用改良的Zea-Longa线栓法［4-5］制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型。

1.3 TNF-α、IL-6测定 造模结束后，各组大鼠常规取出右侧大脑组织，称取约0.5g脑组织块，4℃预冷生理盐水冲洗组织块表面，滤纸吸干，精确称质量并以0.1g：0.9mL的比例制成生理盐水脑组织匀浆，4 000r/min于4℃条件下离心10min，取上清液，然后按照ELISA试剂盒说明测定TNF-α、IL-6水平。

1.4 统计学处理 采用SPSS 11.0处理数据，计量资料以±s表示，多组间比较采用单因素方差分析，组间比较采用LSD-t检验，检验水准α=0.05。

2 结果

脑缺血再灌注损伤模型组TNF-α、IL-6表达水平较假手术组高（P＜0.05）。RMOEE 3.0g/（kg·d）组、RMOEE 1.5g/（kg·d）组脑组织TNF-α、IL-6表达水平较脑缺血再灌注损伤模型组低（P＜0.05）。RMOEE 3.0g/（kg·d）组、RMOEE 1.5g/（kg·d）组TNF-α、IL-6表达水平比较差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 各组大鼠小脑组织中TNF-α、IL-6水平比较 （±s，pg/g）

表1 各组大鼠小脑组织中TNF-α、IL-6水平比较 （±s，pg/g）

注：与假手术组比较，＊P＜0.05；与脑缺血再灌注损伤模型组比较，＃P＜0.05；与RMOEE1.5g/（kg·d）组比较，※P＜0.05

组别 TNF-αIL-6假手术组254.31±28.61 89.33±11.25脑缺血再灌注损伤模型组 697.27±56.89＊205.74±22.84＊RMOEE1.5g/（kg·d）组 505.84±38.06＃149.60±17.34＃RMOEE3.0g/（kg·d）组 398.35±42.11＃※114.23±12.55＃※F值89.568 107.257 P值 ＜0.001 ＜0.001

3 讨论

目前，关于巴戟天的研究主要集中于缺血、缺血再灌注损伤、衰老、肾阳虚等病症的防治方面，本文所用RMOEE是从巴戟天中提取而来，已被证实具有抗氧化、抗炎、抗衰老、补肾壮阳等功效［2-3，6］。由于炎症反应已被证实参与了机体缺血再灌注损伤的发生发展过程，在这一过程中包括TNF-α、IL-6在内的众多炎症因子表达水平发生了变化。TNF-α是一种生物学功能多样的细胞因子，包括内皮细胞、免疫细胞、平滑肌细胞在内的多种细胞均能够分泌合成TNF-α，正常机体内存在微量的TNF-α，能够维持机体的正常生物学功能，若其表达水平异常升高，则会导致一系列机体异常，目前，已被证实其在恶性肿瘤、心脑血管疾病、衰老、风湿等多种疾病患者体内存在异常高表达［3，7］。IL-6来源于内皮细胞、巨噬细胞和T淋巴细胞，能够通过与其他细胞因子或其受体结合促进炎症反应的进展，在缺血再灌注损伤的进展过程中起促进作用［3，8］。

本文结果显示，脑缺血再灌注损伤模型组TNF-α、IL-6表达水平较假手术组高（P＜0.05），提示缺血再灌注损伤模型成功建立；RMOEE 3.0g/（kg·d）组、RMOEE 1.5g/（kg·d）组脑组织TNF-α、IL-6表达水平较脑缺血再灌注损伤模型组低（P＜0.05），证明RMOEE能够改善其损伤；RMOEE 3.0g/（kg·d）组、RMOEE 1.5g/（kg·d）组TNF-α、IL-6表达水平比较差异有统计学意义，且前者优于后者，提示RMOEE的作用可能与药物剂量有一定关系。总之，RMOEE可通过减少TNF-α、IL-6的表达而减轻大鼠脑缺血再灌注损伤，值得进一步深入探讨具体机制。

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［5］梁正羽，唐松山，周东.线栓法大脑中动脉阻塞模型及神经保护因子研究进展［J］.中国临床药理学与治疗学，2014，19（9）：1 069-1 074.

［6］何艳，程再兴，陈红，等.不同产地巴戟天盐制后补肾阳功效的比较研究［J］.时珍国医国药，2014，25（4）：856-858.

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（收稿2015-02-15）

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A

1673-5110（2015）13-0074-02