多菌灵对香菇菌丝生长影响及在子实体的残留研究*

刘新锐，黎志银，谢宝贵，高 敏，邓优锦，江玉姬

（1.福建农林大学菌物研究中心，福建 福州 350002；2.福建农林大学生命科学学院，福建 福州 350002；3.福建农林大学食品科学学院，福建 福州 350002；4.福建省莆田市药品检验所，福建 莆田 351100）

多菌灵对香菇菌丝生长影响及在子实体的残留研究*

刘新锐1，2，黎志银1，2，谢宝贵1，2，高 敏4，邓优锦1，2，江玉姬1，3**

（1.福建农林大学菌物研究中心，福建 福州 350002；2.福建农林大学生命科学学院，福建 福州 350002；3.福建农林大学食品科学学院，福建 福州 350002；4.福建省莆田市药品检验所，福建 莆田 351100）

以香菇9319为材料，在拌料和出菇阶段使用多菌灵，研究多菌灵对香菇菌丝生长和子实体残留的影响。结果表明，多菌灵对香菇菌丝生长有明显抑制作用。在出菇期喷洒300 g/667m2的多菌灵，其在子实体的半衰期为0.67 d，出菇阶段按100 g/667m2的量喷洒子实体1次，间隔7 d和3 d检测其含量低于1 mg·kg－1，但高于0.1 mg·kg－1，若量超过100 g/667m2的量使用，子实体的残留量易超过1 mg·kg－1。因此，在香菇生产中应谨慎使用多菌灵。

香菇；多菌灵；农药残留；无公害；绿色食品

香菇 [Lentinula edodes(Berk.)Sing.]是仅次于双孢蘑菇的世界第二大类食用菌，是中国食用菌生产的一个重要组成部分，也是我国出口创汇的主要品种[1]。目前我国香菇栽培主要是以大棚季节性栽培为主，栽培方式比较粗放，在香菇栽培每一个环节中，均可能受到真菌、细菌、粘菌、放线菌、病毒和虫害等的危害，轻者降低菌棒成活率，影响香菇产量及品质，重者导致菌棒报废，产量绝收，严重影响经济效益[2-4]。而采用化学药剂进行防治常常是病虫害防治工作中最有效、最直接的手段，但如果使用不当，容易对香菇造成药害，产品不合格进而对人体健康构成危害[5]。

多菌灵（Carbendazim）曾是国内登记可在食用菌上使用的农药产品（http://www.chinapesticide.gov. cn/），为苯并咪唑类广谱内吸性杀菌剂，对许多真菌（子囊荫、半知菌和担子菌） 有抑制和杀灭作用[6]，胡建伟等[7]的研究结果表明毛霉、根霉、木霉、曲霉和青霉菌丝对多菌灵较敏感。要海兰等[8]通过室内与棚内试验，发现多菌灵WP500倍、l 000倍两种浓度处理对绿色木霉菌、黑根霉菌有极显著的抑制效果，因而有时被用于食用菌的生产中。

本文针对香菇生产的特点，选择在菌棒制作和出菇管理这两个重要环节中使用多菌灵，以研究其对香菇生长发育的影响以及在子实体中残留的情况，探讨多菌灵在香菇生产中的合理使用及残留控制，为香菇的安全生产、产品质量的控制提供技术支撑。

1 材料与方法

1.1供试菌株

香菇9319，中高温型品种，福建省龙岩市香菇栽培场种植品种。

1.2培养基

PDA培养基：马铃薯（去皮） 20%、葡萄糖2%、琼脂2%。

种植培养基：木屑78%、麦麸20%、石膏2%，含水量60%。

1.3农药

50%多菌灵可湿性粉剂，购于福州市植保站。

1.4多菌灵对香菇菌丝生长的影响

1.4.1 PDA平板测定

将50%多菌灵可湿性粉剂按0.5 g·kg-1、1 g·kg-1、2 g·kg-1的量直接溶于灭菌的PDA培养基，倒平皿，香菇菌丝接种于平板中，以不加多菌灵的作对照，于25℃下培养，待对照组快长满时，测量各个处理菌落直径大小，计算生长速度。

1.4.2 种植培养基测定

在种植培养基中，每千克干料分别拌入多菌灵0.5 g、1 g、2 g、4 g、8 g，以不加多菌灵的栽培料为对照，常压灭菌24 h，冷却后接入香菇菌种，置于25℃下培养，测量菌丝生长速度。

1.5多菌灵拌料在香菇子实体中残留量测定

根据多菌灵拌料对香菇菌丝生长影响的试验结果，设计每千克干料拌入多菌灵1 g、2 g和4 g三个处理，以不加多菌灵作对照，出菇后采收第1潮子实体检测多菌灵的残留量。

1.6多菌灵喷施香菇子实体残留消解动态试验

根据NY/T 788-2004《农药残留试验准则》中多菌灵的使用规范，设计其使用剂量为使用说明推荐最高用量的1.5倍，即300 g/667m2。在香菇菌棒开袋后子实体长至离成熟期1/3大小时开始喷施，施药后2 h、1 d、2 d、3 d、4 d、5 d采样，检测子实体中多菌灵的含量。

1.7多菌灵不同喷施方法的残留试验

设计多菌灵的使用量分别为100 g/667m2、200 g/667m2、300 g/667m2，施药次数1次，子实体采收间隔期分别为7 d、3 d、2 d、1 d；施药2次，则间隔5 d第2次施药，在施药后2 d进行采收。

1.8检测方法

多菌灵的检测方法，参照GB/T 23380-2009《水果、蔬菜中多菌灵残留的测定高效液相色谱法》。

2 结果与分析

2.1多菌灵对香菇菌丝生长的影响

PDA培养基及种植培养基中不同浓度多菌灵对香菇菌丝生长影响见表1、表2。

表1 PDA培养基中不同浓度多菌灵对香菇菌丝生长影响Tab.1 The effects of carbendazim on mycelia growth of Lentinula edodes in PDA medium

表2 种植培养基中不同浓度多菌灵对香菇菌丝生长影响Tab.2 The effects of carbendazim on mycelia growth of Lentinula edodes in artificial medium

从表1和表2可以看出，在PDA和种植培养基中添加多菌灵，均对香菇菌丝生长产生很强的抑制作用，且达到极显著水平。随着多菌灵添加量的增加，对香菇菌丝生长的抑制作用加强。添加同浓度的多菌灵，PDA培养基中菌丝生长抑制率高于种植培养基中，这可能是由于在PDA培养基中，多菌灵可湿性粉剂直接添加，未经高温灭菌，而在种植培养基中，多菌灵经高温灭菌，多菌灵含量可能有所降解，因此对菌丝的毒性降低。

2.2多菌灵拌料栽培对香菇子实体农药残留量影响

每千克香菇种植培养料干重中分别拌入1 g、2 g和4 g的50%多菌灵可湿性粉剂，新鲜香菇子实体均可检测到多菌灵，其含量分别是0.028 mg·kg-1、0.036 mg·kg-1、0.021 mg·kg-1，符合我国 《NY/T 749-2003绿色食品食用菌》限定的0.1 mg·kg-1要求。

2.3多菌灵喷施香菇子实体残留消解动态

待香菇子实体长到1/3大小时开始喷施多菌灵，其在香菇子实体中的残留量情况见表3，并以2 h（1/12 d）为对照。

表3 香菇中多菌灵的消解动态Tab.3 Degradation of carbendazim in Lentinula edodes

由表 3可见，消解方程为 y=17.2866e-1.0395x，R2为0.9647。多菌灵在香菇子实体中消解比较快，其 T1/2为 0.67 d，喷施 2 h的残留量为16.191 mg·kg-1，经过1 d后消解至4.585 mg·kg-1，消解量达11.606 mg·kg-1。喷施4 d后，多菌灵在子实体中的残留量仅为0.022 mg·kg-1，远远低于0.1 mg·kg-1，达到绿色食品要求。

2.4不同施药方法与香菇子实体农药最终残留量的关系

根据香菇的栽培特点，从施药剂量、施药次数及采收间隔期这三方面考察多菌灵在香菇子实体中的残留情况。多菌灵在香菇子实体上的施药方法及残留结果见表4。

由表4可见，喷施3种剂量多菌灵7 d后采收的香菇子实体，多菌灵的残留量均小于0.1 mg·kg-1，达到绿色食品要求。喷施剂量100 mg·kg-1，采收间隔期3 d，其残留量为0.736 mg·kg-1，只符合无公害限量要求。而其它施药方法，香菇子实体中多菌灵的残留均超过限量要求，施药次数2次的残留量远远高于施药1次的，随着施药剂量的提高，其残留量也增加，同时施药后采收的间隔期越短，多菌灵的残留量也越大，易造成香菇子实体的残留量严重超标。因此，要在香菇生产中安全使用多菌灵，必需间隔7 d或以上才能采收。

表4 不同施药方法香菇子实体中多菌灵残留量Tab.4 The residues of carbendazim with different dosage in Lentinula edodes

3 结论与讨论

多菌灵因高效低毒被广泛使用于作物上，已有的研究结果表明其也是食用菌生产中常见污染菌木霉等杂菌的有效防治药剂[8]。张浩等[9]用50%多菌灵可湿性粉剂喷洒平菇子实体，研究多菌灵的残留动态，结果发现原始沉积量为3.214 mg·kg-1时的半衰期为2.58 d。本文使用50%多菌灵可湿性粉剂喷洒香菇子实体原始沉积量16.19 mg·kg-1时的半衰期为0.67 d，表明子实体和施药量的不同将影响农药半衰期，此外，平菇一般栽培于温度较低季节，香菇9319栽培于温度较高的夏、秋季节，可能环境温度的不同也是影响农药半衰期长短的重要因素之一。

喷洒使用浓度、使用次数和采收间隔期对多菌灵的残留量影响显著。本次试验中使用100 g/667m2的量，并且使用1次，采收间隔期在3 d以上，产品能达到无公害残留的标准。而使用同样剂量、喷洒2次，由于采收间隔期缩短，导致残留量高，为6.474 mg·kg-1，远高于无公害残留的标准。喷洒量在200 g/667m2以上且间隔期低于3 d时都将引起多菌灵残留量的超标。从实验结果可知，夏秋栽培香菇9319时，使用合适剂量的多菌灵，在采收间隔期保证7 d及以上时，多菌灵在香菇子实体中的残留符合无公害要求或绿色标准。多菌灵在香菇栽培过程中的降解，时间是一个非常重要的影响因素。

在培养料中拌入多菌灵，可以降低培养菌棒的污染率，但也会影响香菇菌丝的生长，使用浓度越高，对香菇菌丝生长的抑制越强，在拌药量为0.5 g·kg-1时，菌丝抑制率为10%，达到显著效果。暴纪春等[10]的研究结果也表明，多菌灵对香菇菌丝生长影响较强，在生产中不宜使用或要严格控制拌料时的浓度。同时从实验结果可知，在拌料中使用多菌灵含量低于4 g·kg-1，香菇子实体多菌灵的含量未超过1 mg·kg-1。

综上分析，在香菇生产中拌料使用多菌灵容易影响香菇菌丝的生长，在出菇阶段喷洒多菌灵，剂量使用不当、采收时间间隔期缩短都容易造成子实体残留的超标，因此多菌灵在香菇生产中应慎重使用。食用菌在生产过程中一般不用或较少使用农药，但有些季节性生产的菇类，有时会发生较为严重的有害生物为害，应尽量采用物理或生物的方法防控。农药的使用即影响食用菌菌丝的生长，又容易造成食用菌产品农残超标，特别是产品要求达到绿色食品以及产品定位对外贸易时应杜绝使用，从源头上控制污染，这样产品才能符合日本、欧盟等对多菌灵极低限值，避免遭受贸易损失。

[1]谢福泉，谢宝贵，羿红，等.福建省袋栽香菇主要菌株交配型测定及品种鉴别[J].福建农林大学学报，2004，33（4）：521-526.

[2]陈俏彪，吴全聪，吴应淼.浙江省代料香菇病虫害调查[J].食用茵学报，2006，13（2）：69-73.

[3]胡清秀，宋金娣，管道平.食用菌病虫害危害分析与防治关键控制点[J].中国农学通报，2008，24（12）：401-406.

[4]刘建密，李晶，上官舟建.代料香菇病虫害及其防治[C]//海峡两岸第十届菌物学暨第三届食药菌学术研讨会论文集.武汉：华中农业大学，2011：339-343.

[5]吴应淼，陈俏彪，毛可红，等.代料香菇病虫害综合防治技术[J].中国食用菌，2006，25（5）：51-52.

[6]肖奎，叶华智.多菌灵对茶树菇菌丝生长的影响及其在子实体中的残留[J].中国食用菌，2008，27（3）：31-33.

[7]胡建伟，龚明福，彭英，等.多菌灵和石灰对5种霉菌的抑制效果[J].中国蔬菜，2003（3）：41.

[8]要海兰，把存芳，贾秀芬，等.食用菌主要杂菌—绿色木霉、黑根霉药剂防治试验[J].食用菌，2010，32（4）：60-61.

[9]张浩，张祥辉，逯忠斌，等.食用菌中多菌灵和噻菌灵残留动态的研究[J].食用菌，2009，31（2）：36-37.

[10]暴纪春，赵桂云，赵洪彬，等.不同浓度度的多菌灵对食用菌菌丝生长的影响[J].中国林副特产，2006（1）：12，49.

木耳炒腊肉

黑木耳味甘性平，有凉血、止血作用，主治咯血、吐血、衄血、血痢、崩漏、痔疮出血、便秘带血等，因其含铁量高，可以及时为人体补充足够的铁质，所以是一种天然补血食品。黑木耳含有维生素k和丰富的钙、镁等矿物质，能减少血液凝块，预防血栓等症的发生，有防治动脉粥样硬化和冠心病的作用。

主料：干黑木耳、腊肉、胡萝卜、青辣椒

辅料：植物油、盐、姜、味极鲜、鸡精、蒜苗

做法：

1把木耳用温水泡，去蒂洗净，腊肉泡3小时，用蒸锅蒸30分钟，晾一会切片。

2胡萝卜洗净去皮切菱形、姜切末，蒜苗、青辣椒洗净切段。

3热锅凉油，油热8成，下姜末、胡萝卜翻炒出香味，下木耳、辣椒、盐翻炒均匀。

4加腊肉、少许水焖炒2分钟，加蒜苗、味极鲜、鸡精翻炒均匀即可。

黑木耳最好用温水泡；腊肉多泡可减少咸味；先加少许盐翻炒木耳、胡萝卜，这样腊肉不用加盐。

中国食用菌信息网

2015.04.30

Effects of Carbendazim on Mycelia Growth of Lentinula edodes and Residue in Fruit Body

LIU Xin-rui1,2,LI Zhi-yin1,2,XIE Bao-gui1,2,GAO Min4,DENG You-jin1,2,JIANG Yu-ji1,3
(1.Mycological Research Center,Fujian Agriculture and Forestry University,Fuzhou 350002,China;2.College of life sciencer, Fujian Agriculture and Forestry University,Fuzhou 350002,China;3.College of Food Science,Fujian Agriculture and Forestry University,Fuzhou 350002,China;4.Putian institute for drug control,Putian 351100,China)

The effect of carbendazim on mycelia growth of Lentinula edodes strain 9319 and residue in fruit body were studied, and carbendazim was used in the artificial medium and fruiting phase.The results showed that mycelia growth of Lentinula edodes strain 9319 was restrained obviously.In the mushroom phase carbendazim was sprayed on fruit body 300 g per 667 m2one time,then its half－life in fruit body was 0.67 day.While spraying carbendazim on fruit body 100 g per 667 m2one time and then after three day and seven day,the carbendazim in fruit body was less than 1 mg·kg－1,but over 0.1 mg·kg－1.The carbendazim in fruit body would be over 1 mg·kg－1if the carbendazim used over 100 g per 667 m2.So it should be careful use the carbendazim in Lentinula edodes cultivation.

Lentinula edodes;carbendazim;pesticide residue;non－pollution;green food

A

1003-8310（2015）03-0068-04

10.13629/j.cnki.53－1054.2015.03.017

国家支撑计划项目（2013bad16b03）；福建省现代农业食用菌产业技术体系项目（K83139295）。

刘新锐（1980－），男，硕士，助理研究员，主要从事食用菌方面研究。E－mail:liuxr3623@163.com

**通信作者：江玉姬（1965－），女，博士，教授，主要从事食用菌栽培、安全生产方面研究。E－mail:jyj1209@163.com

2015－03－10