曾建涛 李泉 杨丹
(1.重庆市长寿区人民医院;2.重庆市长寿区中医院,重庆 401220)
梅毒螺旋体是一种密螺旋体,感染人体可引起梅毒。检测梅毒螺旋体的方法很多,血清学实验仍然是最主要的方法[1]。其中梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)特异性和敏感性较高[2]。但TPPA试验也存在一定的假阳性率,笔者于2014年7月收治1例TPPA 试验假阳性的病例,现报告如下。
1.1 临床资料 患者,男,44岁,主诉:梅毒复诊。患者3年前在外院诊断为梅毒。
1.2 仪器与试剂(1)TPPA 试剂由富士瑞比欧株式会社生产,自身抗体谱试剂由欧蒙公司提供。(2)IgG、IgA、IgM、补体C3,C4、RF、ASO 和CRP 应用罗氏全自动生化分析仪检测。
1.3 实验方法 TPPA 试验和自身抗体谱检测严格按照试剂说明书操作。吸收试验方法为:取未致敏粒子0.95mL至小试管中,加入患者血清50μL混匀,室温放置30min。离心5min后,吸取上清液进行对倍稀释。最后在第3 孔加入未致敏粒子25μL,第4孔加入致敏粒子25μL,振荡混匀,室温静置2h后观察结果。
TPPA 试验未致敏孔显示为阳性,致敏孔显示为弱阳性(图1),此结果表明TPPA 试验受到干扰,结果为假阳性。吸收试验结果显示未致敏孔和致敏孔均为阴性(图1),确定该患者TPPA 试验为阴性。
图1 TPPA 试验结果
为研究TPPA 假阳性的原因,笔者对常见的干扰因素进行了分析。患者血清IgG 10.57g/L,IgA 2.08g/L、IgM 3.23g/L、补体C3 1.13g/L和补体C4 0.45g/L;RF 14.00IU/mL,ASO 41IU/mL,CRP 1.00mg/L;其中除IgM 升高外,其他结果均正常。检测吸收试验后的血清,换算后IgM 为3.19g/L,无明显变化,表明干扰并非由IgM 引起。为排除自身免疫抗体的干扰,应用免疫印迹法对患者血清进行自身抗体谱的检测,结果均为阴性。
梅毒是由梅毒螺旋体引起的一种性传播疾病,TPPA 是针对梅毒特异性抗体的试验,其原理为梅毒特异性抗体与包被在明胶颗粒上纯化的梅毒螺旋体Nichols株发生凝集反应。
明胶颗粒是直径3 μm 左右的球体。相比TPHA 试验中用红细胞做载体,明胶颗粒稳定性更好,免疫原性较弱,可减少非特异性反应的发生。
目前对引起明胶颗粒非特异性反应的物质并不十分清楚[3],文献[4-5]报道的常见干扰因素有RF、Ds-DNA 和免疫球蛋白制剂等。本文检测了常见的干扰因素,仍未找到真正原因。未找到干扰因素时可通过未致敏粒子提供的抗原表位对干扰物质进行吸收试验,从而得到准确的实验结果。
在明胶粒子凝集反应的其他试验,包括肺炎支原体抗体、HIV 抗体等的检测中,也存在类似的干扰。在临床试验中必须重视未致敏孔结果的观察,才可避免错误报告的发生。
[1]Morshed MG.Current trend on syphilis diagnosis:issues and challenges[J].Adv Exp Med Biol,2014,808:51-64.
[2]顾友祥,姜俊.多种梅毒抗体检测方法的比较[J].检验医学与临床,2012,9(4):391-392.
[3]隆维东,刘万彬,李坚.血清不明抗体干扰TPPA 试验一例[J].海南医学,2013,24(1):142-143.
[4]Serwin AB,Chodynicka B.Serological diagnosis of syphiliscurrent problems and controversies[J].Przegl Epidemiol,2009,63(4):519-523.
[5]Lautenschlager S.Diagnosis of syphilis:clinical and labo-ratory problems[J].Dtsch Dermatol Ges,2006,4(12):1058-1075.