气相色谱仪性能验证方法的建立及应用

王冠杰，黄海伟，项新华，张河战，肖镜，田利

（中国食品药品检定研究院，北京 100050）

气相色谱仪性能验证方法的建立及应用

王冠杰，黄海伟，项新华，张河战，肖镜，田利

（中国食品药品检定研究院，北京 100050）

建立气相色谱仪性能验证新方法，为申请WHO药品预认证提供保障。根据欧洲药品质量管理局《质量控制文件》提供的方法，结合《中国药典》要求，与我国计量检定规程进行对比，总结气相色谱仪性能验证参数要求，建立气相色谱仪性能验证检测方法，并用该方法对5台气相色谱仪进行检测，结果符合实际。

气相色谱仪；性能验证；WHO预认证

世界卫生组织药品预认证项目(Prequalification Programmer，简称为“WHO预认证”)是国际上各个国家及相关组织对大宗药品进口采购的免检通行证。通过WHO预认证的实验室，其药品质量能够得到有效保证［1］。

仪器设备是WHO预认证必须检查的重要项目之一，由于气相色谱仪广泛应用于兴奋剂等违禁药物检测［2-4］和药物中溶剂残留检测［5］，气相色谱仪的性能验证是WHO预认证的检查重点之一。目前我国气相色谱仪的性能指标按照国家计量检定规程JJG 700-1999《 气相色谱仪》［6］进行验证，而WHO对气相色谱仪性能验证要求按照欧洲官方药品控制实验室网络（OMCL）《质量控制文件》［7］要求进行检查。

笔者针对WHO对气相色谱仪性能验证的要求，与我国相关计量检定规程进行比较，在满足国家检定规程技术指标的基础上，加入柱温精度和进样口残留限度及检测方法，建立气相色谱仪性能验证新方法，为药品企业及检测机构申请国外认证提供参考。

1 气相色谱仪性能验证指标要求

国家计量检定规程JJG 700-1999《 气相色谱仪》是我国目前对气相色谱仪性能验证要求的唯一国家性规程，该规程适用于热导（TCD）、火焰离子化（FID）、火焰光度（FPD）、电子俘获（ECD）、氮磷（NPD）为检测器的气相色谱仪的检定。规程主要从载气流速、柱温箱、程序升温、基线、灵敏度、检测限、定量重复性等几个方面检测。而欧洲医药管理局（OMCL）《质量控制文件》主要根据药品检测的特点，从气相色谱的进样、柱温箱、检测器3个模块和仪器整体技术指标进行检测。《中国药典》［8］在符合国家检定规程的基础上，提出柱温箱控制精度在±1℃。根据上述文件总结出气相色谱仪性能验证指标要求（表1）。

2 气相色谱仪性能验证方法

依据国家检定规程确立的技术指标，按照该规程规定的方法检测。以下重点介绍柱温箱温度精度和进样口残留的检测方法。

2.1 主要仪器与试剂

秒表：分度值小于0.03 s；

注射器：满量程10 μL，需校准，若取得检验合格证书可直接使用；

铂电阻温度计：Pt100型，准确度不大于0.3℃；

数字多用表：电压测量不确定度为5 μV，电阻测量不确定度为0.04 Ω(电流1 mA)，或专用温度检定测量仪（温度精度在150℃内为±0.5℃）；

正辛醇-正己烷溶液标准物质：正辛烷体积分数为1%，应使用经国家计量行政部门批准颁布，并具有相应标准物质《制造计量器具许可证》的单位提供的标准物质。

表1 气相色谱仪性能验证指标要求

2.2 环境条件

室温：5～35℃；室内相对湿度：20%～85%。

2.3 柱温箱温度精度检测方法（9）

把铂电阻温度计连线连接到数字多用表(色谱仪检定专用测量仪)上，然后把温度计的探头固定在柱箱的中部。设定柱箱温度为70℃，加热升温，待温度稳定后，观察10 min，每变化一个数记录一次，求出数字多用表最大值与最小值所对应温度差值，记录数字多用表读数和仪器读数，计算两者的差值，即为柱温箱精密度。

2.4 进样口残留检测方法（8）

2.4.1 分流模式测试条件

色谱柱：SPB-1柱(30 m×0.32 mm，0.25 μm)；载气：氦气（或氮气），流速为25 cm/s；分流比：1∶100；进样体积：1 μL；进样器温度：220℃；柱温箱温度：100℃恒温；检测器：FID；检测器温度：300℃。

取正辛醇-正己烷溶液标准物质作为供试品溶液，重复进样2次，记录主峰面积，另取正己烷空白溶液，同法进样1次，记录正辛醇相同保留时间处色谱峰的峰面积。正辛醇的保留时间约为5 min。

2.4.2 不分流模式下测定条件

色谱柱：SPB-1柱(30 m×0.32 mm，0.25 μm)；载气：氦气（或氮气）；流速：30 cm/s；分流比：1∶100；进样体积：0.2 μL；进样器温度：220℃；柱温箱温度：60℃保持4 min，以15℃/min升至135℃，保持1 min后结束；检测器：FID；检测器温度：300℃。

取正辛醇-正己烷溶液标准物质10 mL，用正己烷稀释至100 mL，作为供试品溶液，重复进样2次，记录主峰面积，另取正己烷空白溶液，同法进样1次，记录正辛醇相同保留时间处色谱峰的峰面积。正辛醇的保留时间约为8 min。

2.4.3 进样口残留量计算

空白溶液所得色谱图中正辛醇峰相应保留时间处所得色谱峰的峰面积除以供试品溶液所得色谱图中正辛醇峰的平均峰面积，即得。

3 评定案例

利用上述方法对中国食品药品检验研究院5台气相色谱仪开展性能验证，结果显示5台设备均符合相关指标要求，检定结论合格率为100%。具体情况见表2。

4 结语

气相色谱仪在药物临床研究、药物代谢动力学研究、兴奋剂等违禁药物检测、药物中的溶剂残留检测和中草药挥发油成分的分离及结构鉴定等方面都发挥着非常重要的作用［10］。目前，出口药企为了满足WHO预认证的要求，普遍采取原厂家检测的办法，一台设备需花费几千美金［11］，并且需要周期进行，不利于推广［12-15］。而气相色谱仪性能验证规程的建立，在符合国家检定规程的基础上，结合药品检测的特点，符合WHO预认证要求，避免了重复检测。此检测方法成本低，操作简单，易于推广。

表2 气相色谱仪（FID）性能验证检测结果

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［6］ JJG 700-1999 气相色谱仪［S］.

［7］ PA/PH/OMCL (11)04 OMCL Network of the Council of Europe QUALITY MANAGEMENT DOCUMENT（Annex 6）［S］.

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一种混合材料中纤维素硝酸酯含量的快速分析方法

公开号：CN104833652A；公开日：2015.08.12

申请人：北京理工大学

摘要：本发明涉及一种混合材料中纤维素硝酸酯含量的快速分析方法，属于炸药检测、近红外光谱定量分析技术领域。具体步骤包括：收集与制备某浓度范围样品；化学法分析纤维素硝酸酯含量；采集所有样品光谱，由光谱残留F值剔除异常光谱；采集纯组分光谱，经分析选择建模波段；采用偏最小二乘法建立模型；由均方根预测误差，PRESS值/维数曲线，确定最优模型的波段，预处理方式为矢量归一化；由预测标准差与定标标准差的比值评判模型的稳健性；由配对t检验、重复性检测标准偏差评估方法的精确性；加入其它浓度范围的样品光谱，可扩充方法的检测限。本发明可替代已有化学分析方法，能够快速获得分析结果，不使用任何溶剂，可降低人力成本、材料成本。

一种测定保健食品中食用色淀含量的方法

公布号：CN104833730A；公布日：2015.08.12

申请人：江苏艾兰得营养品有限公司

摘要：本发明公开了一种测定保健食品中食用色淀含量的方法，属于食品分析领域。包括下述步骤：（1）样品溶液的配制：取20粒或20 g样品，研磨成细粉，准确称取1.0 g，置于50 mL聚丙烯离心管中，加入10 mL稀硫酸溶液和20 mg EDTA，饱和碳酸钠调节至pH 6，以10 000 r/min离心10 min，取上清液，通过预先用3 mL甲醇和3 mL水活化好的固相萃取小柱；（2）对照品的配制：称取适量对照品分别配制成不同浓度的供试品溶液；（3）HPLC法分析：取供试品溶液和对照品溶液进行HPLC分析。本发明采用高效液相色谱这一常规的色谱分析仪器来检测保健食品中的色淀含量，方法检测限低，准确度高，非常适合保健食品中色淀的批量检测。

Establishment and Application of GC Performance Verification Method

Wang Guanjie, Huang Haiwei, Xiang Xinhua, Zhang Hezhan, Xiao Jing, Tian Li
(National Institute for Food and Drug Control, Beijing 100050, China)

GC performance verification method was set up to apply for WHO prequalification provides evidence. According to the method provided by European Directorate for the Quality Control of Medicines and the requirement of Chinese Pharmacopoeia, and compared with Chinese meterage rules, performance validation of gas chromatography was established by summarying the parameters level of the gas chromatograph. five instruments was tested by the method and the detection results accord the reality.

gas chromatograph; performance verification; prequalification programmer of WHO

O657.1

：A

：1008-6145(2015)05-0085-03

10.3969/j.issn.1008-6145.2015.05.023

联系人：黄海伟；E-mail: wanggj@nicpbp.org.cn

2015-07-23