EML4—ALK融合基因与EGFR基因突变在肺腺癌中的表达

肖胜霞 沈洋 郭丽霞 张国锋 周雷贵

【摘   要】 目的  探讨肺腺癌EML4-ALK融合基因与EGFR基因突变在肺腺癌中的表达。方法  选取我院2012年6月—2014年5月诊治的肺腺癌患者30例作为本次研究对象，采用原位荧光杂交法（FISH）对患者组织标本分别进行EML4-ALK融合基因与EGFR基因突变检测，并分析与临床病理特征的相关性。结果  肺腺癌病理组织中EML4-ALK融合基因阳性2例，阳性表达率为6.67%（2/30）;EGFR基因突变17例，基因突变率56.67%（17/30）;女性突变率70.59%（12/17），男性41.67%（5/12）;不吸烟者突变率68.75%（11/16），吸烟者42.86%（6/14）;60岁以下突变率78.57%（11/14），60岁及以上31.25%（5/16）。EML4-ALK融合基因与EGFR基因突变的相关性分析显示，二者之间呈负相关（R=-0.262，P=0.048）。结论  EML4-ALK融合基因在肺腺癌中低表达，EGFR基因突变高表达，两者呈负相关。

【关键词】 EML4-ALK融合基因;EGFR基因突变;肺腺癌

【中图分类号】 R734.2    【文献标识码】 A

肺癌是临床常见恶性肿瘤之一，其中NSCLC约占肺癌的4/5左右，严重威胁到患者的生命安全[1]。随着对肺腺癌研究的不断深入，特异性高、不良反应轻的分子靶向药物逐渐成为行业研究的新方向，也就是说，当前肺癌治疗的模式已经向基于基因组特征的个体化治疗模式转变[2]。本文将30例肺腺癌患者纳为研究对象，采用原位荧光杂交法对患者组织标本进行EML4-ALK融合基因与EGFR基因突变检测，探讨二者相关性。现将具体情况报导如下。

1  资料与方法

1.1  一般资料  ①对象选取：选取我院2012年6月—2014年5月诊治的肺腺癌患者30例作为本次研究对象;其中，男性患者13例，年龄最小34岁，最大74岁，平均年龄（53.5±3.5）岁;女性患者17例，最小年龄35，最大76岁，平均年龄（54.5±4.0）岁。②病情分布：30例研究对象经病理确诊为NSCLC，I期患者7例，II期患者9例，III期患者9例，IV期患者5例。③全30例研究对象的年龄、性别、病情程度等一般临床资料均经我院核实，符合客观性、科学性要求，具有观察、分析、研究价值。

1.2  方法  ①用EGFR基突变检测试剂盒检测表皮生长因子受体基因18-21外显子29种突变。②用原位荧光杂交法检测EML4-ALK融合基因。判断标准：计数100个完整细胞，异常细胞数量达到15个以上为阳性。

1.3  统计学方法  本次研究相关数据用SPSS13.0数据包进行处理，EML4-ALK阳性数量、EGFR基因突变数量均为客观研究数据，EML4-ALK阳性数比例、EGFR基因突变比例以率（%）表示，相关性分析用连续X2检验，以P<0.05差异为存有统计学意义。

2  结果

2.1  EML4-ALK  30例肺腺癌病理组织中共检出EML4-ALK融合基因阳性2例，阳性表达率为6.67%（2/30）。2例EML4-ALK融合基因阳性病人皆为女性，无吸烟史，年龄都<60岁。

2.2  EGFR基因突变  30例研究对象中，EGFR基因突变17例，基因突变率56.67%（17/30）。其中，女性突变率70.59%（12/17），高于男性的41.67%（5/12）;不吸烟者突变率68.75%（11/16），高于吸烟者42.86%（6/14）;60岁以下突变率78.57%（11/14），高于60岁及以上31.25%（5/16）。

2.3  EML4-ALK融合基因和EGFR基因突变在肺腺癌中的表达 30例研究对象中，共有1例对象的EML4-ALK和EGFR监测结果均为阳性。进行相关性分析后发现两者间存有一定的负相关关系（R=-0.262，P=0.048），但因研究數量较少，需要增加样本数量开展进一步验证。具体报告见表1。

3  讨论

EML4-ALK最初由Soda等于2007年发现，并于2008年建立了肺泡上皮细胞特异性表达EML4-ALK融合蛋白的转基因小鼠模型，证实 EML4-ALK融合基因可抑制肿瘤的生长，为肺腺癌的临床治疗提供的潜在靶点[3-5]。此后，Perner等将600例非小细胞癌患者纳为研究对象，采用原位荧光杂交法对患者的EML4-ALK基因情况进行检测，共发现融合基因16例，结果表明：融合基因的发生率为2.7/100，要比Soda之前报道的6.7/100低一些[6-8]。张绪超等对103例小细胞癌症患者的术后标本进行研究，使用RACE-PCR法检测出EML4-ALK阳性12例，占检测例数的11.6%，进一步分析显示与EGFR基因突变者相比，EML4-ALK融合基因更多发生于男性、无吸烟嗜好的患者;在具有这些临床特征但未检出EGFR基因突变肺癌患者中，约33%可能携带 EML4-ALK融合基因型[9，10]。

在本次研究中，30例肺腺癌病理组织中共检出EML4-ALK融合基因阳性2例，阳性表达率为6.67%（2/30）。2例EML4-ALK融合基因阳性病人皆为女性，无吸烟史，年龄都在60岁以上。30例研究对象中，EGFR基因突变17例，基因突变率56.67%（17/30）。其中，女性突变率70.59%（12/17），高于男性的41.67%（5/12）;不吸烟者突变率68.75%（11/16），高于吸烟者42.86%（6/14）;60岁以下突变率78.57%（11/14），高于60岁及以上31.25%（5/16）。EML4-ALK融合基因与EGFR基因突变在肺腺癌中的表达呈一定负相关，由于本研究样本量偏小，尚待扩大样本量后的进一步佐证。

参考文献

[1] 方平，封国红，林林，等.EML4-ALK融合基因与EGFR基因突变在肺腺癌中的表达[J].医学研究杂志，2013，（07）：109-112.

[2] 夏宁.EML4-ALK、EGFR、KRAS、c-Met基因在中国肺腺癌患者中基因状态的临床研究[D].中南大学，2012，（06）：10-12.

[3] 孟丽娟，王峻，樊卫飞，蒲骁麟，王琳，刘福银，杨民.经选择的肺腺癌患者中EML4-ALK融合基因发生率的研究[J].实用老年医学，2013（10）：819-822.

[4] 王殿军.肺腺癌组织学亚型与预后和EGFR突变相关性研究[D].中国人民解放军医学院，2013，（06）：14-15.

[5] 曾珠，吴一龙.EML4-ALK与EGFR基因突变共存型非小细胞肺癌研究进展[J].中国肺癌杂志，2011，（06）：880-884.

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[7] 林小梅，莫娟梅，邹敏，等.EGFR突变的非小细胞肺癌患者EML4-ALK融合基因的检测及其临床特征分析[J].中国病理生理杂志，2012，（06）：1135-1139.

[8] 李晨光.非小细胞肺癌癌基因突变和相关分子标记物的研究[D].复旦大学，2012，（06）：6-8.

[9] 赵明，宋勇.EML4-ALK在非小细胞肺癌中的研究进展[J].医学研究生学报，2012，（02）：200-203.

[10] 华红伟，丁罡.EML4-ALK融合基因在非小细胞肺癌中的研究进展[J].实用癌症杂志，2012，（04）：425-428.