厚朴皮、叶、花水提液抗炎作用的比较研究*

胡冬根黄芳辉梁生林

厚朴皮、叶、花水提液抗炎作用的比较研究*

胡冬根①黄芳辉②梁生林③

目的：探讨并比较厚朴皮、叶、花的抗炎作用强弱。方法：采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀炎症模型，观察高、低剂量厚朴皮、叶、花水提取液的抗炎作用。结果：厚朴根皮、干皮、枝皮、叶和花水提取液高、低剂量组对小鼠耳廓涂抹二甲苯所致炎症均有明显的抑制作用，与蒸馏水模型组比较差异均有统计学意义（P<0.01、P<0.05）；与厚朴干皮所对应剂量组比较，厚朴根皮、枝皮、叶和花水提取液高、低剂量组比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论：厚朴各部位的皮（根、干、枝皮）以及花和叶水提取液都具有一定的抗炎作用，而且在抗炎方面可以采用枝、根皮以及叶和花代替干皮使用。

厚朴皮、叶、花；水提物；抗炎；耳肿法

厚朴是一种常用的中药，属于国家二级保护野生药材，为木兰科植物厚朴或凹叶厚朴经过干燥处理的根、干及枝的皮。性味苦、辛、温，归脾胃、肺以及大肠经。主要功效为燥湿消痰、下气除满[1]。大量的药理实验研究显示，厚朴具有镇吐作用、促进消化性溃疡愈合作用、促进胃肠平滑肌蠕动作用[2-8]；减轻炎症作用、对炎症性疼痛具明显止痛作用、对G+、G-菌具有抑制作用[9-14]；还具有减轻咳嗽、排出痰液作用等[15-17]。长时间以来由于厚朴的过度采伐，使得厚朴资源消耗过度而日渐减少，因而扩大厚朴抗炎药用部位的研究和寻找新的抗炎药用资源显得非常迫切。本实验采用致炎剂二甲苯涂擦小鼠耳廓造成的小鼠耳廓肿胀急性炎症模型，来研究厚朴花和叶水提物的抗炎作用，并就其抗炎作用的强

弱与厚朴干皮进行了比较，比较它们在抗炎方面是否无差异，其目的为扩大厚朴的抗炎药用部位、寻找新的药用资源提供实验依据。

1 实验材料

1.1 实验动物 KM小鼠，SPF级，体重20 g左右，雌雄各半，购买于湖南斯莱克景达实验动物有限公司，许可证号：SCXK（湘）2011-0003。

1.2 实验药物 厚朴皮（根、干、枝皮）、花和叶，均从生长于井冈山上，具有30年树龄的厚朴树上所采，经井冈山大学基础医学与药学院药用植物教研室鉴定为木兰科植物厚朴（Magnolia officinalis Rehd. et Wils.）；阿司匹林片，规格0.1 g，批号BJ04931，拜耳医药保健有限公司（进口分装）。

1.3 主要仪器 RE-52A旋转蒸发器，上海亚荣生化仪器厂；SHB-ⅢA循环水式多用真空泵，上海豫康科教仪器设备有限公司；DG160C型中药粉碎机，浙江瑞安飞达药材器械厂；YLQ-Q4耳肿打耳器，山东省医学科学院设备站；JA2003N电子天平，上海精密科学仪器有限公司；计时器。

1.4 实验方法

1.4.1 药物的制备

1.4.1.1 厚朴干皮水提取液的制备 称取150 g干燥的厚朴干皮，用中药粉碎机适度粉碎后，用蒸馏水浸泡0.5 h，加12倍的蒸馏水用文火煎煮1 h，静止过滤，滤渣再用10倍量蒸馏水用文火煎煮2次，每次各0.5 h，静止过滤。合并3次滤出液，用旋转蒸发仪旋转蒸发浓缩为100 mL，得到浓度为生药1.5 g/mL的溶液，以此作为小鼠灌胃给药时的高剂量组的给药浓度，低剂量组的灌胃给药浓度生药0.5 g/mL用时用蒸馏水稀释配制。

1.4.1.2 厚朴根皮水提取液制备 称取150 g干燥的厚朴根皮，用中药粉碎机适度粉碎后，用蒸馏水浸泡0.5 h，加12倍的蒸馏水用文火煎煮1 h，静止过滤，滤渣再用10倍量蒸馏水用文火煎煮2次，每次各0.5 h，静止过滤。合并3次滤出液，用旋转蒸发仪旋转蒸发浓缩为100 mL，得到浓度为生药1.5 g/mL的溶液，以此作为小鼠灌胃给药时的高剂量组的给药浓度，低剂量组的灌胃给药浓度生药0.5 g/mL用时用蒸馏水稀释配制。

1.4.1.3 厚朴枝皮水提取液制备 称取150 g干燥的厚朴枝皮，用中药粉碎机适度粉碎后，用蒸馏水浸泡0.5 h，加12倍的蒸馏水用文火煎煮1 h，静止过滤，滤渣再用10倍量蒸馏水用文火煎煮2次，每次各0.5 h，静止过滤。合并3次滤出液，用旋转蒸发仪旋转蒸发浓缩为100 mL，得到浓度为生药1.5 g/mL的溶液，以此作为小鼠灌胃给药时的高剂量组的给药浓度，低剂量组的灌胃给药浓度生药0.5 g/mL用时用蒸馏水稀释配制。

1.4.1.4 厚朴叶水提取液制备 称取150 g干燥的厚朴叶，用中药粉碎机适度粉碎后，用蒸馏水浸泡0.5 h，加12倍的蒸馏水用文火煎煮1 h，静止过滤，滤渣再用10倍量蒸馏水用文火煎煮2次，每次各0.5 h，静止过滤。合并3次滤出液，用旋转蒸发仪旋转蒸发浓缩为100 mL，得到浓度为生药1.5 g/mL的溶液，以此作为小鼠灌胃给药时的高剂量组的给药浓度，低剂量组的灌胃给药浓度生药0.5 g/mL用时用蒸馏水稀释配制。

1.4.1.5 厚朴花水提取液制备 称取150 g干燥的厚朴花，用中药粉碎机适度粉碎后，用蒸馏水浸泡0.5 h，加12倍的蒸馏水用文火煎煮1 h，静止过滤，滤渣再用10倍量蒸馏水用文火煎煮2次，每次各0.5 h，静止过滤。合并3次滤出液，用旋转蒸发仪旋转蒸发浓缩为100 mL，得到浓度为生药1.5 g/mL的溶液，以此作为小鼠灌胃给药时的高剂量组的给药浓度，低剂量组的灌胃给药浓度生药0.5 g/mL用时用蒸馏水稀释配制。

1.4.2 厚朴皮、叶、花水提液对小鼠耳肿法的抗炎实验 取144只体重为20 g左右的雌雄各半的清洁级昆明种小鼠[18]，按性别和体重随机分为十二组：蒸馏水阴性对照组（10 mL/kg），阿司匹林阳性对照组（0.5 g/kg），厚朴根皮水提取液高剂量（生药15 g/kg）组和低剂量（生药5 g/kg）组，厚朴干皮水提取液高剂量（生药15 g/kg）组和低剂量（生药5 g/kg）组，厚朴枝皮水提取液物高剂量（生药15 g/kg）组和低剂量（生药5 g/kg）组，厚朴叶水提取液高剂量（生药15 g/kg）组和低剂量（生药5 g/kg）组，厚朴花水提取液高剂量（生药15 g/kg）组和低剂量（生药5 g/kg）组，每组12只。给药途径每鼠均为灌胃给药，灌胃体积均为10 mL/kg，1次/d，连续灌胃5 d。最后一次灌胃给药1 h后，将100%二甲苯0.05 mL均匀涂抹在每鼠左耳廓两面致炎，以右耳作对照。0.5 h后拉断颈椎将小鼠处死，从小鼠的耳根部剪下两耳，用小鼠用鼠耳打孔器（直径为8 mm）分别在左右两耳的相同部位打下耳片，用电子天平称其重量，以左耳片重量减去右耳片重量之差值作为炎症指标耳肿胀度，计算肿胀抑制率。耳肿胀抑制率（%）=（蒸馏水组肿胀度-给药组肿胀度） / 蒸馏水组肿胀度×100%。

1.5 统计学处理 应用统计学软件Stata 8.0分析处理实验数据，计量资料以（±s）表示，采用单因素方差分析对组间进行比较，以P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

与蒸馏水模型组比较，厚朴根皮水提取液高剂量（生药15 g/kg）组和低剂量（生药5 g/kg）组明显抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀，与蒸馏水模型组相比差异显著（P<0.01）；厚朴干皮水提取液高剂量（生药15 g/kg）组和低剂量（生药5 g/kg）组明显抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀，与蒸馏水模型组相比差异显著（P<0.01）；厚朴枝皮水提取液高剂量（生药15 g/kg）组和低剂量（生药5 g/kg）组明显抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀，与蒸馏水模型组相比差异明显（P<0.01、P<0.05）；厚朴叶水提取液高剂量（生药15 g/kg）组和低剂量（生药5 g/kg）组明显抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀（P<0.01、P<0.05），与蒸馏水模型组相比差异明显（P<0.01、P<0.05）；厚朴花水提取液高剂量（生药15 g/kg）组和低剂量（生药5 g/kg）组明显抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀，与蒸馏水模型组相比差异显著（P<0.01）；且它们对小鼠耳廓肿胀的抑制程度与所用的剂量之间呈现正相关。阿司匹林（0.5 g/kg）组也显著抑制二甲苯所引起的小鼠耳廓肿胀（P<0.01）。与阿司匹林组相比，厚朴根皮、干皮、枝皮、叶及花水提取液高剂量组和低剂量组差异均无统计学意义（P>0.05）。与厚朴干皮所对应剂量组比较，厚朴枝皮、根皮、叶及花水提取液组差异均无统计学意义（P>0.05），见表1。

表1 厚朴根皮、干皮、枝皮、叶和花水提液对二甲苯所致小鼠耳肿胀的抑制作用

3 讨论

厚朴是一种常用的中药，为国家二级保护中药材。由于中国制药业采用厚朴配方的中西成药多达200多种，长时间以来由于厚朴的过度采伐，使得厚朴资源消耗过度而日渐减少，因而扩大厚朴的抗炎药用部位研究和寻找新的抗炎药用资源显得非常迫切。本实验采用二甲苯刺激小鼠耳廓致耳廓肿胀炎症模型，研究比较了厚朴皮（根、干、枝皮）、花和叶水提取液对小鼠耳肿胀的抑制作用。

本实验采用化学致炎剂二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀是一种以血浆渗出及组织水肿为主的急性炎症反应[18]，本抗炎实验结果表明厚朴皮（根、干、枝皮）、花和叶水提取液高低剂量灌胃给药均明显抑制二甲苯所引起的小鼠耳廓肿胀，说明厚朴皮、叶、花水提取液灌胃给药对急性炎症均具有显著抑制作用。厚朴根皮、干皮、枝皮、叶和花都含有酚性成分厚朴酚和和厚朴酚，且总酚量依次为根皮>干皮>枝皮>花>叶[19-21]；厚朴酚及和厚朴酚可显著抑制COX-2活性，从而对前列腺素生物合成产生影响[22]；厚朴酚还可通过抑制IκB激酶（IKK）发挥抗炎作用[23]。由于厚朴根皮、干皮、枝皮、叶、花中酚性成分含量不同，因而呈现的抗炎作用强度也有所差异。

实验结果还表明对小鼠耳肿法所致炎症的抗炎作用，厚朴干皮与各对应剂量组的根皮、枝皮、叶和花水提取液比较均无统计学差异，说明在抗炎方面厚朴根皮、枝皮、花和叶可以代替厚朴干皮使用。

综上，在抗炎方面，厚朴皮（根、干、枝皮）、花和叶水提取液灌胃给药均明显，而且在抗炎方面厚朴枝及根皮、花和叶可以代替厚朴干皮使用，为厚朴在抗炎方面的药用部位的扩大提供了实验依据。

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Comparative Study on the Anti-inflammatory Effects of Magnolia Officinalis Bark，Leaf and Flower Water Extract in Mice

HU Dong-gen，HUANG Fang-hui，LIANG Sheng-lin.//Medical Innovation of China，2015，12（33）：014-017

Objective：To investigate and compare the anti-inflammatory effect of Magnolia officinalis bark， leaf，flower in mice.Method： By using the ear edema induced by xylene in mice， the anti-inflammatory effect of high and low doses of Magnolia officinalis root， stem and branch bark， flower， leaf water extract were observed.Result：High and low doses of Magnolia officinalis bark （root， stem and branch bark）， flower and leaf water extract could inhibit ear edema in mice， compared with the distilled water model group the differences were statistically significant （P<0.01，P<0.05）. High and low doses of Magnolia officinalis root and branch bark， flower and leaf water extract with the corresponding doses of stem bark water extract had no statistical significance （P>0.05）.Conclusion：The results shows Magnolia officinalis bark （root， stem and branch bark）， flower and leaf water extract possesses the anti-inflammatory effects， Magnolia officinalis root bark， branch bark， leave， flower could replace Magnolia officinalis stem bark for anti-inflammatory.

Magnolia officinalis bark， leaf， flower；Water extract；Anti-inflammatory；Ear edema

10.3969/j.issn.1674-4985.2015.33.005

2015-09-07）（本文编辑：蔡元元）

国家科技支撑计划课题（2012BAC11B02-6）

①江西省吉安市永丰县八江乡卫生院 江西 永丰 331502

②江西省吉安市妇幼保健院

③井冈山大学基础医学与药学院

梁生林

First-author’s address： Yongfeng County Eight River Health Hospital， Yongfeng 331502， China