HPLC法测定不同采收期三七中有效成分含量

龙 扬

(川北医学院附属医院 中药房，四川 南充 637000)



HPLC法测定不同采收期三七中有效成分含量

龙 扬

(川北医学院附属医院 中药房，四川 南充 637000)

目的：采用HPLC法测定不同采收时间(2月、10月)三七中三七皂苷R1,人参皂苷Rg1及Rb的含量,比较2月三七和10月三七的质量差异。方法：色谱柱填料:十八烷基键合硅胶；流动相:乙氰-水(梯度洗脱);仪器：Waters 2487-1525-717高效液相色谱仪。 结果：10月三七的皂苷总含量比2月三七含量高。结论：在初秋采收三七较好。

三七；皂苷R1；人参皂苷Rg1；人参皂苷Rb1；HPLC法；采收期

三七是我国名贵中药材，是五加科人参属的一个种[1], 具有活血化瘀、活血定痛的功效,被誉为血症良药、伤科要药。产于我国云南、广西、贵州、四川等省[2]。许多复方制剂如云南白药、血塞通等中成药中均含有三七成分。三七含有多种人参皂苷类活性成分[3],如人参皂苷Rg1、Rb1及三七皂苷R1等,总皂苷成分含量可达8%以上。本实验采用HPLC法测定不同采收时间(2月、10月)三七中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1及Rb1的含量，对不同采收季节的三七进行质量评价。

1 仪器与试药

仪器：Waters 2487-1525-717高效液相色谱仪；粉碎机四号筛；100mL具塞锥形瓶(8个)、电子天平、水浴锅。

药材:三七根头(购于昆明菊花村中药材现代市场,经川北医学院药学院原料室鉴定,剪口三七由昆明制药集团提供);三七皂苷R1、人参皂苷Rg1及Rb1对照品由昆明制药集团提供(集团内部标定(R1：8.9%,Rg1：32.7%,Rb1：35%))；乙氰(进口色谱纯) ；甲醇为进口色谱纯；水为注射用水。

2 方法

2.1 色谱柱

AgilentC18色谱柱 ;PN:883700-704;流动相:乙氰-水(梯度洗脱); 流速:1.0mL/min ；柱温：35℃； 进样量:10μL； 检测波长:203nm。

2.2 供试品溶液的制备

取同一批不同位置三七药材十头,用粉碎机打碎,用四号过筛,取本品粉末(过四号筛)0.6g，加入甲醇50mL，称定重量，放置过夜, 于次日60℃水浴微沸2h，放冷后，重新称定重量，用甲醇补足所缺失的重量,摇匀滤过，取续滤液作为供试品溶液。

2.3 对照品溶液的制备

称取三七对照品适量，用甲醇配成含三七皂苷R1 0.1mg/mL,人参皂苷Rg1及Rb1 0.4mg/mL。依照“2.1”项下色谱条件及检测条件，测得三七对照品色谱。

2.4 理论塔板数及分离度计算

理论塔板数=5.54×4.65×4.65/0.1/0.1=11 979；分离度=2×(4.65-3.55)/(0.3+0.8)=2。经计算，理论塔板数大于药典所规定的4 000,且分离度较好。

2.5 不同生长年限的三七皂苷含量比较[4]

不同生长年限三七皂苷含量见表1。

表1 不同生长年限的三七皂苷含量比较

2.6 同一产地不同产期三七中总皂苷含量比较

三七均来自宝马药材经营部，根据收集的同一产地不同采挖期三七总皂苷含量对比可知,从9月份开始到12月份采挖的三七剪口含量较高,而在1-8月这段时间采收的三七剪口皂苷含量较低,基本符合二年生三七鲜干比重的变化。 见表2。(数据来源：川北医学院药学院原料室、仪器室)。

表2 同一产地不同产期三七中总皂苷含量比较 (%)

3 样品测定图谱、数据

3.1 图谱

图1 标准对照品文山HPLC色谱

图2 2月文山三七HPLC色谱

图3 10月文山三七HPLC色谱

3.2 数据

由表4可知,10月收挖的三七的皂苷总含量要比2月收挖的三七含量要高。详见表3。

表3 2月三七和10月三七相关成分含量测定比较 (%)

4 讨论

从本实验数据可知,在8、9月份采收的三七质量较好,比较重,而2-3月份、12月份所采收的三七质量较次。由此可见，三七在初秋采收较好。本实验也表明HPLC法测定三七中有效成分操作简单、结果准确。

[1] 明·李时珍.本草纲目(校点本) [M]. 第2版.北京:人民卫生出版社,1982:767.

[2] 王朝梁,崔秀明,朱艳.三七原产地考证[J].中药材,2000(23)(增刊):212.

[3] 杨崇仁,王国燕,伍明珠,等.三七芦头的皂苷成分[J].药学学报,1985,20(6):337-338.

[4] 何晶.三七的药理作用及研究进展[J].海峡药学,2002,14(5):47-48.

(责任编辑：宋勇刚)

2014-11-28

龙扬(1985-)，女，硕士，川北医学院附属医院中药师，研究方向为中药理论与应用。

R284.2

A

1673-2197(2015)07-0024-02

10.11954/ytctyy.201507012