HPLC测定白鲜皮配方颗粒中梣酮含量

孙晶波，姜国志

(1.石药集团恩必普药业有限公司，河北 石家庄 052160；2.中药注射剂研发国家地方联合工程实验室，河北 石家庄 051430)



HPLC测定白鲜皮配方颗粒中梣酮含量

孙晶波1，姜国志2*

(1.石药集团恩必普药业有限公司，河北 石家庄 052160；2.中药注射剂研发国家地方联合工程实验室，河北 石家庄 051430)

目的：考察HPLC测定白鲜皮配方颗粒中梣酮含量的分析方法。方法：DIONEX Acclaim®120 C18(4.6mm×250mm，5μm)色谱柱，以甲醇-水(55∶45)为流动相；检测波长为236nm。结果：梣酮的线性范围为0.06056～2.4224μg，含量为42mg/g，回收率为98.5%，RSD为0.86%。结论：该法简便准确，适用于白鲜皮配方颗粒的质量控制。

HPLC；白鲜皮；配方颗粒；梣酮；含量测定

中药配方颗粒是根据处方中药物的不同性质选用不同制剂工艺制备而成的颗粒状剂型，具有快捷、简单、方便、卫生的特点[1]。白鲜皮配方颗粒由芸香科植物白鲜DictamnusdasycarpusTurcz.的干燥根皮制成配方颗粒，有清热燥湿、祛风解毒的作用，用于治疗湿热疮毒、黄水淋漓、湿疹、风疹、疥癣疮癞、风湿热痹、黄疸尿赤等症[2]。梣酮是白鲜皮的主要化学成分之一，具有良好的保肝降酶和抑制肝纤维化、抑菌、杀虫等活性[3]，其含量测定主要采用HPLC法[4]，本研究重点考察白鲜皮配方颗粒中梣酮含量HPLC法检测的可行性。

1 实验材料

高效液相色谱仪：戴安U3000(带二极管阵列检测器)；DIONEX Acclaim®120 C18(4.6mm×250mm，5μm)色谱柱；赛多利斯股份公司CPA225D电子分析天平(德国)；甲醇为色谱纯试剂(Fisher Scientific)，水为纯化水；梣酮对照品购自中国食品药品检定研究院(批号：1117000-200501)，白鲜皮配方颗粒样品(3批，批号：100209,100210,100211)由神威药业集团有限公司提供。

2 方法与结果

2.1 对照品溶液配制

称取梣酮对照品30.28mg置于100mL量瓶中，用甲醇溶解、定容、摇匀，即得对照品储备液；再精密量取此储备液5mL置25mL量瓶中，用甲醇定容、摇匀，即得对照品溶液。

2.2 供试品溶液制备

取白鲜皮配方颗粒适量，研细，精密称定3g，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25mL，称定重量，加热回流1h，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.3 色谱试验

以甲醇-水(55∶45)为流动相；检测波长为236nm。分别取上述对照品溶液和供试品溶液各10μL，注入色谱仪，结果见图1、图2。

图2 供试品溶液HPLC图谱

2.4 线性关系考察

精密吸取梣酮对照品溶液1.0、5.0、10μL，梣酮对照品

储备液4.0、6.0、8.0μL，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定，以峰面积积分值为纵坐标，梣酮进样量(μg)为横坐标，得回归方程为Y=43.363X+1.005，R=0.999 95，结果梣酮在0.060 56～2.422 4μg范围内呈良好的线性关系。

2.5 精密度实验

精密吸取对照品溶液(60.4μg/mL)10μL，连续进样6次，按上述色谱条件测定峰面积，结果梣酮峰面积RSD=0.26%，表明仪器精密度良好。

2.6 稳定性试验

分别精密吸取同一供试品溶液10μL，每隔2h进样1次，测得梣酮的峰面积RSD为0.86%(n=5)，表明梣酮在8h内稳定性良好。

2.7 重复性实验

取同一批白鲜皮样品，按上述方法制备供试品溶液6份，在上述色谱条件下吸取10μL进样，测定梣酮含量，结果其峰面积RSD为0.98%(n=6)，表明重复性良好。

2.8 加样回收试验

分别向6个具塞锥形瓶中加入上述梣酮对照品储备液5、5、10、10、20、20mL，挥干溶剂，再精密称取白鲜皮配方颗粒细粉约1.5g，加入锥形瓶中，按“2.2”制备回收率试验供试品溶液，在上述色谱条件下进样分析，梣酮的平均回收率为98.5%，RSD为0.86%，结果见表1。

表1 回收率试验结果

2.9 样品测定

取3批样品，按“2.2”制备供试品溶液，在上述色谱条件下进样分析，计算白鲜皮配方颗粒中梣酮含量，见表2。

表2 样品含量测定结果

3 讨论

本研究旨在寻找白鲜皮配方颗粒中梣酮含量的质量控制方法，经过查找文献、初步试验，确定药典方法可用于此配方颗粒的含量测定。梣酮在190～400nm做全波长扫描，其最大吸收波长在236nm处；流动相甲醇-水(55∶45)经过比例调节，确定此比例评价最佳；经过多品牌C18色谱柱的试验，确定DIONEX Acclaim®120 C18(4.6 mm×250mm，5μm)色谱柱效果最佳。研究表明，DIONEX Acclaim®120 C18(4.6 mm×250mm，5μm)色谱柱，以甲醇-水(55∶45)为流动相；检测波长为236nm的色谱条件适用于白鲜皮配方颗粒梣酮含量的测定。

[1] 符颖.浅谈中药配方颗粒的优势和存在的问题[J].中国热带医学，2006，6(4)：682-683.

[2] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].一部.北京：中国医药科技出版社,2010：102-103.

[3] 李翔，张新中，邓赟，等.从白鲜皮中同时制备梣酮、白藓碱、黄柏酮单体的方法[J].四川大学学报，2007,39(4)：68-72.

[4] 原春兰，杨得锁.RP-HPLC测定白鲜皮中梣酮含量[J].中国中药杂志，2006,31(12)：992-994.

(责任编辑：魏 晓)

Determination of Fraxinellone in Dittany Bark Dispensing Granules by HPLC

Sun Jingbo1，Jiang Guozhi2*

(1.CSPC NBP Pharmaceutical Co.,Ltd,Shijiazhuang 052160,China；2. State-Local Joint Engineering Laboratory of New Drugs Development Technology for TCM Injection，Shijiazhuang 051430，China)

Objective:To determine the content of Fraxinellone in Dittany bark dispensing granules by HPLC.Methods:DIONEX Acclaim®120 C18(4.6mm×250mm，5μm) column was used，Mobile phase consisted of methanol-Water(55∶45)；UV detector wavelength was set at 236nm. Results:The linearity was from 0.06056 to 2.4224μg for fraxinellone，The content is more than 42mg/g，the average recovery was 99.8%，RSD 1.39%.Conclusion:The method is handy and accurate, and can be used for the quality control of Dittany bark dispensing granules

HPLC，Dictamnus Dasycarpus Turcz，Dispensing granules，Fraxinellone，Content Determinlation

2014-11-14

河北省科技计划项目(中药配方颗粒制备工艺及质量标准研究项目)[14272504D]

孙晶波(1982-)，女，石药集团恩必普药业有限公司工程师，研究方向为药品研发。

姜国志(1981-)，男，中药注射剂研发国家地方联合工程实验室工程师，研究方向为药品工艺、质量研究及产业化。E-mail：15931199089@163.com

R284.2

A

1673-2197(2015)07-0016-02

10.11954/ytctyy.201507008