四季三黄片中栀子薄层鉴别研究

苏云艳，宁东兴

(昆明圣火药业(集团)有限公司，云南 昆明 650217)



四季三黄片中栀子薄层鉴别研究

苏云艳，宁东兴

(昆明圣火药业(集团)有限公司，云南 昆明 650217)

目的：研究四季三黄片中栀子薄层鉴别方法。方法：采用薄层鉴别法，以栀子苷为对照品，使用硅胶G薄层板，以正丁醇-三氯甲烷-甲醇-水(2∶2∶0.5∶0.1)为展开剂，10%硫酸乙醇溶液为显色剂105℃显色，对四季三黄片中栀子进行薄层鉴别。结果：供试品与对照品在相同位置呈现颜色一致的斑点，斑点圆整，Rf值适中。结论：此方法色谱斑点清晰、专属性强、重现性好、结果准确可靠，可用于四季三黄片的质量控制。

四季三黄片；栀子；薄层鉴别

四季三黄片由大黄、黄芩、黄柏、栀子四味药组成，具有消炎退热，通便利水的功能，用于口鼻生疮，咽疼齿痛，口干舌燥，头晕目眩，大便秘结，小便赤黄。现行质量标准中没有对栀子的质量控制，本文对栀子的主要成分栀子苷进行了薄层鉴别研究，以便更好地对四季三黄片进行质量控制。

1 材料与试剂

赛多利斯CPA225D十万分之一电子天平；100×100mm双槽薄层色谱展开缸；NC-101电热鼓风干燥箱。乙醚、正丁醇、氧化铝、乙醇、三氯甲烷、甲醇均为分析纯，水为超纯水；栀子苷对照品(批号：110749-200714，供含量测定用)，购于中国药品生物制品检定所。四季三黄片供试品：由昆明圣火药业(集团)有限公司提供(批号：20140901、20140902、20140903)。

2 方法与结果

2.1 实验条件

2.1.1 展开剂选择 采用①醋酸乙酯-丙酮-甲酸-水(5∶5∶1∶1或6∶4∶0.5∶0.5或10∶7∶2∶0.5)；②正丁醇-冰醋酸-水(7∶1∶1)；③苯-三氯甲烷-丙酮-甲醇-浓氨试液(4∶5∶4∶3∶0.8)[1]；④正丁醇-三氯甲烷-甲醇-水(2∶1∶0.5∶0.1或2∶2∶0.5∶0.1)为展开剂，发现以正丁醇-三氯甲烷-甲醇-水(2∶2∶0.5∶0.1)分离效果最好，斑点最为圆整，Rf值适中，重现性好，故选之。

2.1.2 显色剂选择 采用5%香草醛硫酸溶液、10%硫酸乙醇溶液、50%硫酸乙醇溶液作显色剂进行比较，结果发现5%香草醛硫酸溶液和50%硫酸乙醇溶液易吸潮。10%硫酸乙醇溶液作为显色剂斑点清晰且不易吸潮，故选10%硫酸乙醇溶液为显色剂。

2.2 实验方法

取本品12片，研细，置三角瓶中，加乙醇50mL，浸泡过夜，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加水20mL，微热使溶解，滤过，滤液置分液漏斗中，用乙醚提取3次，每次20mL，弃去乙醚液，再用水饱和的正丁醇提取3次，每次20mL，合并正丁醇提取液，用水洗涤3次，每次30mL，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加乙醇5mL分次使溶解，加于中性氧化铝柱(100～200目，3g，内径10mm)上，用乙醇50mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇1mL使溶解，作为供试品溶液。另取栀子苷对照品适量，加乙醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液。按照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录 Ⅵ B)试验，吸取上述2种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-三氯甲烷-甲醇-水(2∶2∶0.5∶0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液105℃显色。供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上显相同颜色的斑点。

2.3 阴性对照试验

取缺栀子的阴性样品同供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液，取栀子苷对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液按“2.2”项的实验方法进行薄层鉴别，结果表明阴性对照无干扰。

2.4 实验结果

取栀子苷对照品溶液、3批四季三黄片供试品溶液、阴性对照溶液点样，进行薄层鉴别检查，结果3批供试品在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。薄层色谱如图1所示。

图1 3批四季三黄片薄层色谱

3 讨论

3.1 供试品溶液的制备方法考察

由于本品处方中栀子量少，其它成分对栀子苷的鉴别干扰特别大，曾采用较简单的一些方法如：①醇直接提取；②醇提取后上氧化铝柱或D101型大孔吸附树脂柱或活性炭之后乙醇洗脱；③乙醚除杂后乙酸乙酯提取；④乙醚除杂后水饱和的正丁醇提取[2]。但这些方法制备的供试品溶液存在背景颜色太深、拖尾现象严重、斑点不清晰、点样困难等问题，用文中所述方法能避免其它成分的干扰，展开的色谱分离效果好，斑点圆整，Rf值适中。

3.2 吸附剂的选择

采用硅胶G薄层板、硅胶H薄层板、硅胶GF254薄层板，点样展开，发现硅胶G薄层板展开后斑点圆整，分离效果最好。

3.3 显色温度的选择

考察了100℃、105℃、110℃三种条件下的显色情况，结果表明105℃条件下显色斑点更为清晰圆整，故选105℃显色。

综上所述，本方法色谱斑点清晰、专属性强、重现性好、结果准确可靠，可用于四季三黄片的质量控制。

[1] 国家药典委员会.中国药典[S].一部.北京：化学工业出版社，2005:345.

[2] 国家药典委员会.药品标准中药成方制剂[S].第十一册.北京：中国医药科技出版社，1996:43.

(责任编辑：余 婷)

2014-12-14

苏云艳(1980-)，女，昆明圣火药业(集团)有限公司工程师，研究方向为药品质量标准。

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1673-2197(2015)07-0038-01

10.11954/ytctyy.201507017