结直肠癌中SCC-S2的表达及意义

赵婷婷　刑鹏　李继光

·论著·

结直肠癌中SCC-S2的表达及意义

赵婷婷刑鹏李继光

【摘要】目的SCC-S2是近期发现的一种在多种癌症中过表达，并且与癌细胞的恶性生物学行为关系密切的物质。但是在结直肠癌中，SCC-S2的表达和生物学作用未见报道。本研究目的是探索SCC-S2在结直肠癌及其癌旁正常组织中的表达水平，探讨SCC-S2与结直肠癌患者临床病理特征的关系。方法本研究应用免疫组化分析了SCC-S2在136例结直肠癌组织中的表达情况，使用SPSS 18.0软件进行统计分析。结果67例(49.26%)结直肠癌标本SCC-S2过表达。SCC-S2的过表达与结直肠癌的TNM分期显著相关(P<0.01)；与淋巴结转移显著相关(P<0.05)；与细胞增殖指数显著相关(P>0.01)。结论SCC-S2在结直肠癌中表达升高，并与结直肠癌侵袭和淋巴结转移密切相关。SCC-S2在结直肠癌的发生发展中可能发挥着重要作用。

【关键词】结直肠肿瘤；免疫组织化学；SCC-S2

作者单位：110000沈阳，中国医科大学肿瘤研究所

在发达国家，结直肠癌病死率已位居恶性肿瘤第一位[1]。目前，手术切除结合术后辅助放化疗仍然是结直肠癌治愈的唯一途径，但这种方法对于进展期或者已经发生转移的直结肠癌来说并不理想。为了突破传统治疗方法的限制，使发生转移的直结肠癌患者达到长期生存，我们仍需要发现新的治疗策略。在这方面，基因治疗已经被证明能增加细胞毒性药物在癌症治疗的效率。因此，探索能作为肿瘤标记物预测直结肠癌进展风险的靶基因是非常重要的。

SCC-S2(基因名TNFAIP8)最早是通过比较来源于同一患者的原发头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)与相对应的转移的头颈部鳞癌细胞系而发现的[2]。SCC-S2核酸序列结构中开放阅读框架氨基末端包含着与调控细胞死亡蛋白FLIP(fas-associated death domain-like interleukin-1-β-converting enzyme-inhibitory protein)中死亡效应结构域II(death effector domain II，DEDII)高度同源的序列，其表达可诱导TNF-α和转录激活NF-κB，并在人体的多种肿瘤组织中都有表达[2-4]。有研究表明，SCC-S2在糖皮质激素介导的胸腺细胞凋亡过程中发挥关键作用[5]。Kumar等[6]认为SCC-S2作为抗凋亡分子，其过表达可促进乳腺癌细胞增生和迁移能力。Dong等提出SCC-S2在非小细胞癌中过表达，并与其恶性程度和淋巴结转移密切相关，提示SCC-S2是非小细胞癌的一个重要的癌基因[7]。

尽管SCC-S2与肿瘤的发生发展关系密切，但其对人直结肠癌的作用尚未明确。该研究旨在阐明SCC-S2在直结肠癌中的表达情况及其与临床病理特点的关系，为今后直结肠癌治疗提供新的靶点。

资料与方法

一、一般资料

收集2006年至2008年中国医科大学附属第一医院136例原发性结肠癌手术切除标本。所有患者术前均未行放、化疗。组织学分类和分化程度根据WHO分类标准进行判定。所有136例结肠癌患者根据WHO组织学分类标准划分：Ⅰ级31例，Ⅱ级49例，Ⅲ级44例，Ⅳ级12例。临床分期根据第七版直结肠癌TNM分期标准划分。

二、方法

采用免疫组化SP法进行染色，按SP试剂盒(福州迈新公司)方法操作。外科切除标本经10%中性福尔马林固定、石蜡包埋。将石蜡组织块4μm厚切片，经二甲苯脱蜡，再于梯度酒精水化。经PBS漂洗后，在0.01M柠檬酸盐缓冲液(PH 6.0)里高压2分钟进行抗原修复。然后在PBS中冷却至室温。PBS漂洗，加入一滴内源性过氧化物酶阻断剂，室温下放置10min。PBS漂洗，用含10%山羊血清的PBS液室温下封闭20min。加兔SCC-S2的多克隆抗体(1：200，Abcam公司，美国)和Ki-67鼠单克隆抗体(1：500稀释，Abcam，美国)4℃过夜。经PBS冲洗后加二抗在室温下孵育10min，PBS冲洗后加链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶1滴，室温静置10 min，然后行DAB染色3~10 min，苏木素染色3~5 min，1%盐酸乙醇脱色3sec，梯度脱水脱乙醇后用中性树胶封片，固定后于显微镜下观察结果。实验中，用兔IG作为阴性对照。

两位病理专家随机双盲观察染色结果，于显微镜下随机取5个不同的视野，每个视野计数100个细胞，计算阳性染色细胞所占得比例。按细胞质着色的百分比分为0-4个级别：0级为无染色；1级为1~25%；2级为26~50%；3级为51~75%；4级为≥76%。同时判定染色强度：0级为无染色；1级为中度染色；2级为强染色。着色细胞数得分乘以着色强度得分为SCC-S2得分。计算统计结果，<4分为阴性，≥4分为阳性。

Ki-67免疫组化染色结果基于阳性染色细胞比例，阳性染色细胞比例≥40%为Ki-67阳性表达，<40%为Ki-67阴性表达。

三、统计学分析

以P<0.05为差异有统计学意义。

结　　果

采用免疫组化SP法检测SCC-S2蛋白在136例结肠癌及其癌旁正常结肠组织中的表达。SCC-S2在正常结肠组织中均未着色，表现为阴性。136例结肠癌组织中SCC-S2阳性率为49.26%(67例)，阳性信号主要定位于肿瘤细胞的胞质中(图1)。

对临床病理因素进行分析发现，SCC-S2阳性与患者年龄、性别、分化、肿瘤位置、T分期无明显相关(P>0.05)，但与TNM分期(P<0.01)、淋巴结转移(P<0.05)及Ki-67表达(P<0.01)明显相关(表1)。与SCC-S2阴性表达患者相比，SCC-S2阳性表达的患者，其TNM分期更晚，淋巴结转移和Ki-67阳性的概率明显增加。

注：a图为SCC-S2在肿瘤组织中免疫组织化学染色阴性表达图像；b图为SCC-S2在肿瘤组织中免疫组织化学染色阳性表达图像图1　SCC-S2在肿瘤组织中免疫组织化学染色表达图像

讨　　论

目前，SCC-S2已经被证实在人的多种肿瘤组织存在过表达，并且其与肿瘤的增生和侵袭密切相关。该蛋白自首次发现以来，已相继被研究发现在卵巢癌、乳腺癌、前列腺癌、肺癌等组织恶性肿瘤高表达。然而SCC-S2在结肠癌中的表达及其与临床病理因素的关系未见报道。

在本研究中，我们选择了136例手术切除的结肠癌患者，对SCC-S2的表达与临床病理因素的关系进行探讨，发现SCC-S2在癌旁的正常结肠组织中均为阴性，而在结肠癌中SCC-S2阳性率为49.26%，提示SCC-S2可能与直结肠癌的发生发展密切相关。进而，我们分析了SCC-S2的表达与临床病理资料的关系，结果发现SCC-S2的表达上调与结肠癌的TNM分期、淋巴结转移以及Ki-67表达明显相关。这些结果与SCC-S2在其他肿瘤中的表达情况相一致，说明SCC-S2在结肠癌的增殖和侵袭中也发挥着重要作用。这个结果也提示了SCC-S2可能是治疗直结肠癌的一个新的靶点。

表1　SCC-S2的表达与结肠癌的临床病理因素关系情况表

参考文献

[1]Jemal A，Murray T，Ward E，et al.Cancer statistics，2005.CA Cancer J Clin，2005，55：10-30.

[2]Kumar D，Whiteside TL，KasidU.Identification of a novel tumor necrosis factor-alpha-inducible gene，SCC-S2，containing the consensus sequence of a death effector domain of fas-associated death domain-like interleukin-1beta-converting enzyme-inhibitory protein.J BiolChem，2000，275：2973-2978.

[3]Horrevoets AJ，Fontijn RD，van Zonneveld AJ，et al.Vascular endothelial genes that are responsive to tumor necrosis factor-alpha in vitro are expressed in atherosclerotic lesions，including inhibitor of apoptosis protein-1，stannin，and two novel genes.Blood，1999，93：3418-3431.

[4]You Z，Ouyang H，Lopatin D，et al.Nuclear factor-kappa B-inducible death effector domain-containing protein suppresses tumor necrosis factor-mediated apoptosis by inhibiting caspase-8 activity.J BiolChem，2001，276：26398-26404.

[5]Woodward MJ，de Boer J，Heidorn S，et al.Tnfaip8 is an essential gene for the regulation of glucocorticoid-mediated apoptosis of thymocytes.Cell Death Differ，2010，17：,316-323.

[6]Kumar D，Gokhale P，Broustas C，et al.Expression of SCC-S2，an antiapoptotic molecule，correlates with enhanced proliferation and tumorigenicity of MDA-MB 435 cells.Oncogene，2004，23：,612-616.

[7]Dong QZ，Zhao Y，Liu Y，et al.Overexpression of SCC-S2 correlates with lymph node metastasis and poor prognosis in patients with non-small-cell lung cancer.Cancer Sci，2010，101：1562-1569.

(本文编辑：马天翼)

赵婷婷，刑鹏，李继光.结直肠癌中SCC-S2的表达及意义[J/CD].中华结直肠疾病电子杂志，2015，4(1)：54-57.

Expression and the significance of SCC-S2 in colorectal cancer

ZHAOTing-ting，XINGPeng，LIJi-guang

.TumorResearchInstituteofChinaMedicalUniversity，Shenyang110013，China.

Correspondingauthor：LIJi-guang，Email：13898829926@163.com.

【Abstract】ObjectiveSCC-S2 was recently reported to be overexpressed in various cancers and associated with the malignant behavior of cancer cells.However，the expression of SCCS2 and its biological roles in colorectal cancers have not been reported.The aim of this study is to investigate the expression and clinical significance of SCC-S2 in colorectal cancers.MethodsThe expression pattern of SCC-S2 in 136 colorectal cancer tissues was analyzed by immunohistochemistry.The statistic analysis was performed by SPSS 18.0.ResultsSCC-S2 was overexpressed in 67(49.26 %)of 136 colon cancer specimens.There was a significant association between SCC-S2 overexpression and TNM stage(P<0.01)，lymph node metastasis(P<0.05)，and proliferation index(P<0.01).ConclusionsSCC-S2 is overexpressed in colorectal cancers and contributes to invasion and lymph node metastasis.SCC-S2 may play an important role as tumor-promoting factor in colorectal cancer.

【Key words】Colorectal neoplasms；Immunohistochemistry；SCC-S2

(收稿日期：2015-01-15)

通讯作者：李继光，Email：13898829926@163.com

基金项目:国家自然科学基金(81272718)

DOI：10.3877/cma.j.issn.2095-3224.2015.01.12