瓦松颗粒剂制备工艺的研究

乔　鹏，袁　琦，李　佳，田小杏，杨　强，蒲晓辉

(河南大学 药学院，河南 开封 475004)

瓦松颗粒剂制备工艺的研究

乔鹏，袁琦，李佳，田小杏，杨强，蒲晓辉*

(河南大学 药学院，河南 开封 475004)

摘要：目的提取瓦松中的黄酮类有效成分，制备成颗粒剂，建立质量标准。方法运用不同方法来提取瓦松中的黄酮类成分，采用湿法制粒技术将其制成口服用的颗粒剂，并对其相关项目进行质量检查。结果连续回流法与超声提取法的平均出膏率分别为5.0%、11.1%；制备的颗粒剂粒度均匀，外观良好，各项指标均符合要求。结论该颗粒剂制备工艺简便，质量稳定。

关键词：瓦松；总黄酮；连续回流法；超声法；颗粒剂；含量测定

瓦松(Orosta.chys fimbriatus(Turcz)Berg)为景天科瓦松属植物，全国各地均有分布。全草均可入药，味苦、性寒、有毒，具有抗炎、清热解毒、止血、利湿、消肿之功效，用于吐血、鼻衄、血痢、疟疾、痔疮、湿疹、痈毒、疔疮等症[1]。该药材经过数千年的民间临床应用，表现出了良好的效果，在民间有着广泛的应用基础。现代药理研究表明该植物具有抗病毒、抗癌、抗炎、抗菌、强心等作用，但国内外对其化学成分研究较少。

由于颗粒剂携带方便，依从性好，易溶解、易吸收，生物利用度优于片剂，制备工艺又比片剂、针剂少，所以颗粒剂发展很快。中药颗粒剂是由中药提取物加适量辅料或部分药材细粉而制成的一种剂型，中药颗粒的制备工艺通常为：选料→处理→提取→浓缩→干燥→制粒。制粒是颗粒剂制备过程中关键的工艺技术，直接影响颗粒剂的质量。中药颗粒剂技术主要分为：湿法制粒、干法制粒、快速搅拌制粒和流化喷雾制粒[2]。其中湿法制粒技术适用于对湿热稳定的药物，水溶性中成药颗粒一般选用湿法制粒，因此，我们实验也采用湿法制粒。湿法制粒的关键技术步骤是制软材[3]，而制备软材通常需要一些辅料如稀释剂、黏合剂等，有时根据需要加入崩解剂。

1仪器与试剂

1.1　仪器

托盘天平，蒸发皿，尼龙筛(20目)，烧杯，量筒，抽滤器，索氏提取器，超声波清洗器，坩埚等；JY-3002型分析天平(福州华志科学仪器有限公司)；G2X-DH500-Ⅱ烘箱(北京中兴伟业仪器有限公司)；UV-2000型紫外分光光度仪(上海洪富仪器仪表有限公司)；RE-2000型旋转蒸发仪(上海洪旋实验仪器有限公司)。

1.2　试剂

醋酸(天津市富宇精细化工有限公司，20120915)；三氯化铝(东台市永泰化工有限公司，20100325)；硬脂酸镁(高密东方化工有限公司，20120910)；滑石粉(高密东方化工有限公司，20120608)；乙醇(天津市德恩化学试剂有限公司，20110712)；亚硝酸钠(天津市福晨化学试剂厂，20121023)；氢氧化钠(开封市东大化工有限公司试剂厂，20120618)；硝酸铝(天津市福晨化学试剂厂，20121025)；芦丁标准品(中国药品生物制品检定所，20110918)；淀粉(河南开封，20121106)；瓦松全草(购自安徽省毫州市和平药业有限公司，由河南大学药学院中药教研室李钦教授鉴定为景天科植物瓦松Orosta.chys fimbriata(Turcz.)Berg.的干燥地上部分)。

2方法与结果

2.1　提取方法的筛选

2.1.1乙醇连续回流提取法取干燥的瓦松全草约20 kg，捣碎，包入滤纸，放入索氏提取器内，加石油醚400 mL加热回流至提取液无色，放冷，弃去石油醚液。加体积分数95%乙醇200 mL，提取6 h，将提取液转移到100 mL烧杯中，加热浓缩，先称取蒸发皿重量，将提取物转入蒸发皿中，蒸干即得，并称取总重。

2.1.2超声提取法取干燥的瓦松全草约20 kg，捣碎，放入大烧杯中，加入1000 mL体积分数40%的乙醇浸没24 h，再经超声波萃取45 min，将提取液转移到100 mL烧杯中，加热浓缩，先称取蒸发皿重量，将提取物转入蒸发皿中，蒸干即得，并称取总重。

2.1.3 出膏率计算公式：

出膏率%=干浸膏重/药材重量×100%(1)

经测定，连续回流法与超声提取法的平均出膏率分别为5.0%、11.1%。因此，超声法提取物将被制成颗粒剂作进一步研究。

2.2　制粒

2.2.1处方瓦松提取物4.0 g，滑石粉16 g，淀粉10 g，淀粉浆10%8.6 g，体积分数70%乙醇水溶液23 mL，硬脂酸镁2.0 g，制成100 g颗粒。

2.2.2颗粒剂的制备实验取瓦松提取物浸膏干粉，与淀粉、滑石粉等处方中辅料混合均匀后，加入适量的黏合剂制软材，将制得的软材过20目筛制湿颗粒。颗粒立即干燥，在50~60 ℃干燥(约1 h)，以防止结块或受压变形。将干燥后的颗粒通过筛分法进行整粒与分级，一方面使结块、粘连的颗粒散开，另一方面获得均匀颗粒。

2.3　颗粒剂的质量检查

2.3.1外观颗粒干燥、均匀、色泽一致，无吸潮、软化、结块、潮解等现象。

2.3.2粒度取5袋包装好的颗粒剂，称定重量，分别置于一号筛和五号筛中过筛。取不能通过一号筛和能通过五号筛的颗粒及粉末，称定重量，计算所占比例。

经测定，实验制得的颗粒剂不通过一号筛(2000 μm)和能通过五号筛(180 μm)的总和不超过供试量的15%，满足药典要求。

2.3.3水分中药及其制剂、提取物都要检查水分，因为水分含量过高，可结块、霉变或有效成分的水解。我们实验采用Chp2010一部附录收载的烘干法进行水分测定。取供试品2~5g，平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中，厚度不超过5 mm，疏松供试品不超过10 mm，精密称定，打开瓶盖在100~105℃干燥5 h，将瓶盖盖好，移至干燥器中，冷却30 min，精密称定，再在上述温度干燥1 h，冷却，称重，至连续2次称重的差异不超过5 mg为止。根据减失的重量，计算供试品中的含水量(%)。

由结果可知：根据减失的重量计算可得供试品中的含水量为0.8%<6.0%，符合要求。(按照水分测定法测定，中药颗粒剂的含水量不得超过6.0%。)

2.3.4溶化性依据溶化性的相关规定检查，对所制得的颗粒剂的溶化性进行测定。取10 g所制得的颗粒剂，加入200 mL热水，5 min后全部溶解，无异物存在，即所制得颗粒剂的溶化性符合规定。

2.3.5干燥失重按照干燥失重测定法要求，不含糖颗粒应于105 ℃干燥至恒重，含糖颗粒应在80 ℃减压干燥，减失重量不得超过2.0%。我们实验取供试品(大颗粒先研细)平铺于扁形称量瓶中，放入干燥箱在105 ℃进行干燥5 h，瓶盖盖好，移至干燥器中，冷却30 min，精密称定，再在上述温度干燥1 h，冷却，称重，至连续2次称重的差异不超过0.3 mg为止。根据减失的重量，按公式(2)计算得出供试品中的干燥失重，见表1。

干燥失重%=减失的重量/样品重×100%

(2)

表1　水分的测定和干燥失重

注：按照干燥失重的计算公式可得供试品的干燥失重比为1.1%<2.0%，符合要求。

2.4　含量测定方法的建立

2.4.1样品溶液的配制对照品溶液的配制：精密称取在120 ℃干燥至恒重的芦丁对照品25 mg，置于50 mL量瓶，加乙醇适量，超声处理使溶解，放冷，加体积分数70%乙醇至刻度，摇匀。精密量取20 mL，置于50 mL量瓶中，加水至刻度，摇匀，制成每1 mL中含芦丁0.2 mg的溶液。

供试品溶液的配制：取颗粒剂0.5 g，精密称定，置于250 mL量瓶中，用乙醇100 mL超声使溶解，放冷，加乙醇至刻度，摇匀，即得。

2.4.2线性关系考察精密量取上述对照品溶液1、2、3、4、5、6、7、8 mL分别置于25 mL量瓶中，各加水3 mL，加亚硝酸钠溶液1 mL，摇匀，静置6 min，加硝酸铝溶液1 mL，摇匀，放置6 min，加入1.0 mol/L氢氧化钠溶液10 mL，用蒸馏水定容至25 mL，放置15 min，以相应试剂为空白，在波长500 nm处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线[4]。结果表明，芦丁在7.456 μg/mL～59.648 μg/mL范围内线性关系良好，符合比尔定律，得线性回归方程为：A=0.012 3C+0.033 7，相关系数r=0.9996。

2.4.3加样回收率实验精密称取已知含量的供试品，精密加入对照品适量(高、中、低3个水平，各3份)，按2.4.2方法测定总黄酮含量[5]，计算回收率，结果见表2。

表2　总黄酮的加样回收率

2.4.4精密度实验取本品，按“供试品溶液的配制”项下制备供试品溶液，精密量取0.5 mL，置于25 mL量瓶中，按2.4.2“各加水3 mL”起依法操作，在波长500 nm处测定吸光度，重复操作5次，吸光度(A)的RSD为1.40%。

2.4.5稳定性实验取同一份供试品溶液0.5 mL，置于25 mL量瓶中，按“2.4.2各加水3 mL”起依法操作，分别在15、20、25、30、45 min时对其吸光度进行测定，RSD为1.62%，说明供试品溶液在制样后45 min内稳定。

2.4.6样品含量的测定精密量取供试品溶液0.5 mL，置于25 mL量瓶中，按2.4.2“各加水3 mL”起依法操作，在波长500 nm处测定吸光度，并计算含量，结果见表3。

表3　含量测定结果

3讨论

3.1　总黄酮的提取及测定

我们实验所提取的黄酮类化合物溶液用显色法测定时会产生浑浊现象，给测定结果带来误差，但可通过平行操作，多次测定求平均值等方法使结果更加准确。荧光分析法直接测定总黄酮含量虽然操作简便，成本低，但荧光强度易受溶剂、pH值、表面活性剂和放置时间的影响。高效液相色谱法虽然使用较多，准确度相对可靠，但仪器比较昂贵，色谱柱易被污染，且污染后难于清洗，使色谱柱的使用寿命缩短，不便于大量样品快速检验。我们采用紫外法测定，方法简单，能满足灵敏度及精密度的要求，且准确度高。

3.2　制备

①建立了瓦松颗粒剂的质量控制标准，从外观、粒度、水分、溶化性、干燥失重5个方面全面评价瓦松颗粒剂的质量。②提取物中含有较多糖类物质，有较强的吸湿性，加入适量滑石粉以克服。③颗粒剂中常用的黏合剂有淀粉浆、纤维素衍生物等，本实验采用淀粉浆，浓度范围为5%~30%，并通过单因素筛选，确定选用浓度为10%淀粉浆；中药颗粒剂中经常用水或乙醇-水的混合液作为润湿剂进行制粒，通过单因素筛选确定采用70%乙醇-水溶液。④黏合剂加入时，应少量多次加入，应控制使软材达到以手握之可成团状，手指轻压时又可散裂而不成粉状为度。将软材挤压过筛，制得的颗粒应以无长条状、块状和过多的细粉为宜。通过对制得颗粒的质量检查，可认定该处方制成颗粒剂的制备工艺是合理的。

参考文献：

[1] 江苏新医学院．中药大辞典[M]．上海: 上海科学技术出版社, 1977：100.

[2] 杨晓雷，张建春．中药颗粒剂研究发展[J]．首都医药, 2005, 12(159):36-37.

[3] 崔福德，龙晓英．药剂学[M]．北京：人民卫生出版社, 2011： 248-250.

[4] 张雪辉，赵元芬，陈建民．甘草中总黄酮的含量测定[J]．中国中药杂志, 2001, 26(11): 746.

[5] 董怡，林恋竹，赵谋明．光果甘草叶总黄酮测定方法[J]．食品科学, 2013, 34(06): 195-198.

[责任编辑李武营]

Study on granule of orosta.chys fimbriatus

QIAO Peng, YUAN Qi, LI Jia, TIAN Xiaoxing, YANG Qiang, PU Xiao-hui*

(PharmaceuticalCollegeofHenanUniversity,Kaifeng,Henan475004,China)

Abstract:ObjectiveThe flavonoids in Orosta.chys fimbriatus were extracted for preparing of granules, and Setting up quality standards. MethodsThe flavonoids in Orosta.chys fimbriatus were extracted by different methods, which made oral granules by wet granulation, and checked the quality of the relevant project. ResultsRespectively, the average extract rate were 5.0%, 11.1%, the prepared granules has uniform size, good appearance, the indicators were in line with requirements. Conclusion The preparation technology of granules was simple and stability.

Key words:Orosta.chys fimbriatus; total flavonoids; continuous reflux extraction; ultrasonic method; granules; determination

*通讯作者：蒲晓辉(1980-)，男，河南开封市人，博士，副教授，硕士生导师，从事药物新剂型的研究工作。

作者简介：乔鹏(1991-)，男，河南开封市人，硕士研究生，从事药物新剂型的研究工作。

基金项目：河南省人才培养联合基金资助项目(U1304826)；河南大学自然科学基础研究项目(2010YB2R019)；河南大学2012年度大学生创新性试验计划项目(12NA013)。

收稿日期：2015-05-18

文章编号：1672-7606(2015)03-0171-04

中图分类号：R944.27

文献标识码：A