上海市成人静脉血淋巴细胞绝对值参考范围调查与探讨

刘曼娇，岳 波，唐大海，黄国其

淋巴细胞是构成机体免疫系统的主要细胞群，在机体免疫应答中起重要作用，淋巴细胞的数量和功能的变化与超敏反应、免疫缺陷病、自身免疫性疾病、持续性病毒感染、肿瘤等关系密切，因此研究淋巴细胞绝对值与相关疾病的关系具有重要意义。淋巴细胞绝对值是血常规中的一项参数，很多医院的正常参考范围都是直接引用《全国临床检验操作规程》第3版的标准，这样显然欠妥。笔者认为，该参考范围应用前需加以验证，有条件的临床实验室应根据自身不同检测系统建立各自人群特征的参考区间［1]。

1 对象与方法

1.1 对象 选取2012年3－11月来我院体检的上海地区各企事业单位职工(包括部队、传媒、医疗、工厂、公安系统等)作为研究对象，年龄18～60岁，所有选取对象经我院各项检查(肝功能、肾功能、血脂、血糖、B超、胸透、心电图等)排除异常者。检验结果以均数±3倍标准差±3s)标准进行剔除，统计有效人数共3 081人，其中男1 778人，女1303人;按年龄分组，18～39岁为青年组，40～60岁为中年组，其中男青年组988人，男中年组790人，女青年组732人，女中年组571人。

1.2 标本采集 检测对象空腹，坐位，由检验科人员使用真空管采血法采集。

1.3 仪器与试剂 日本Sysmex公司XT-1800i五分类全自动血液分析仪和配套原装试剂。

1.4 检测项目 白细胞计数(WBC)、淋巴细胞百分比(LY%)、淋巴细胞绝对值等24个项目。淋巴细胞绝对值采用激光流式细胞检测结合核酸荧光染色技术。

1.5 检测方法 Sysmex XT-1800i五分类全自动血液分析仪每半年由厂家进行1次校准，并进行校准验证。在校准有效期内参加上海市临床检验中心的室间质量评价，结果均合格，确保检测数据的准确度。每日标本检测前采用高、低2个浓度水平质控品进行室内质量控制，确保结果在控后才开始检测。

1.6 统计学处理 使用SPSS 13.0统计软件包对数据进行正态性检验，各组数据均符合正态性分布，统计各组均值)和标准差(s)，使用参数法x±1.96s确定95%可信区间(CI，即参考范围)，按照NCCLS指南，各组间比较采用Z检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 按性别分组 男女2组均符合正态分布，男性淋巴细胞绝对值分布见图1。男性为(2.18±0.59)×109/L，女性为(2.06±0.57)×109/L。采用Z 检验进行组间比较，男性高于女性，差异有统计学意义(P＜0.01)。由±1.96s分别得出 95%CI:男性为(1.02～3.35)×109/L，女性为(0.94 ～3.18)×109/L。

图1 男性淋巴细胞分布直方图

2.2 按年龄分组 各年龄组均符合正态分布，见表1。采用Z检验分别进行同性别组间比较，男青年组略高于男中年组，女青年组略高于女中年组，但差异均无统计学意义(P＞0.05)。

表1 上海市不同性别不同年龄组间淋巴细胞绝对值比较

2.3 95%CI 将本次调查的95%CI与其他文献和《全国临床检验操作规程》第3版比较，见表2。由于淋巴细胞绝对值符合正态分布，所以可以由x±1.96s算出95%CI，反过来，可以由95%CI推出均值和标准差。先计算出每个参考范围的均值和标准差，然后采用Z检验分别与本结果进行比较。除了南充地区女性和本地区的差异无统计学意义外，其他地区和本地区的差异都有统计学意义(P＜0.05)。由于操作规程中的参考范围来源的样本量未知，无法进行Z检验，故将本次调查的均值作为样本均数，操作规程的均值作为总体均数，采用t检验进行比较，差异有统计学意义(P＜0.01)。

表2 上海市成人淋巴细胞绝对值调查结果与其他文献比较(×109/L)

2.4 参考范围的验证 按照NCCLS指南，验证参考范围需要20例以上正常人群标本，假如受试者中不超过10%的观测值落在起始报告的界限之外，试剂生产厂商或其他实验室报告的95%参考限可以有效地应用于接收实验室。将本次调查新建立的淋巴细胞绝对值参考范围为参考范围Ⅰ，操作规程中的参考范围为参考范围Ⅱ，用本次调查的3 081例样本分别对2个参考范围进行验证，分别统计落在2个参考范围之外的百分比，见表3。结果显示两者都可以有效地应用于本实验室。

2.5 参考范围的应用 分别用2个参考范围对我院2012年5－9月住院患者的淋巴细胞绝对值结果进行判读统计，共13 675例，其中男9 107例，女4 568例，结果超出参考范围的视为阳性，分别统计2个参考范围各自判读的阳性率，见表4。参考范围Ⅰ判读的男性阳性率约为参考范围Ⅱ的1.52倍，参考范围Ⅰ判读的女性阳性率约为参考范围Ⅱ的1.52倍。

表3 2个参考范围的验证后差异比较

表4 2个参考范围判读13 675例标本的阳性率比较

3 讨论

本次调查显示，18～60岁之间的男性淋巴细胞绝对值高于女性，差异有统计学意义(P＜0.01)。同性别之间，青年组淋巴细胞绝对值略高于中年组，这种现象和国外文献报道的淋巴细胞绝对值有随年龄的增高而递减的趋势相吻合［7]。本次调查中同性别2个年龄组间的差异无统计学意义，可能是由于在18～60岁这个年龄段中，淋巴细胞绝对值受年龄的影响比较小，因此可以把青年组和中年组合并作为1个年龄组来设立参考范围。

由表2可以看出，上海地区淋巴细胞绝对值参考范围与大部分地区存在差异。因此，不同地区、不同实验室应该建立各自检测系统的参考区间［8]。国际临床化学与检验医学联合会(IFCC)建议，每个有条件的临床实验室应根据不同检测系统建立各自人群特征的参考区间［9]。本次调查初步建立了本实验室上海地区成人静脉血淋巴细胞绝对值的参考范围。

美国CLIA-88要求实验室验证厂家的参考区间是否适合实验室患者的群体［6]。观察2个参考范围的验证结果发现，两者都符合落在参考范围之外的观测值不超过10%的条件，即2个参考范围都可以有效地应用于本实验室，2个参考范围都可以在一定程度上减少假阳性。由表4可以看出，用参考范围Ⅰ判读淋巴细胞绝对值结果得到的阳性率约为参考范围Ⅱ的1.52倍，即参考范围Ⅰ比参考范围Ⅱ多检出了52%存在淋巴细胞绝对值异常的患者。但2个参考范围都符合NCCLS指南，都可以有效减少假阳性，但参考范围Ⅰ比参考范围Ⅱ提高了检测淋巴细胞绝对值异常的灵敏度，所以与操作规程比较，本次调查得到的淋巴细胞绝对值参考范围更适合本实验室。

本次调查新建立的参考范围提高了检测淋巴细胞绝对值异常的灵敏度，可以减少一部分患者的漏诊和误诊。某些淋巴系的血液病(比如浆细胞白血病、慢淋等)在早期出现外周血淋巴细胞绝对值的轻微升高时，用操作规程中的参考范围判读可能就是阴性，未能引起临床重视，导致延迟诊断或漏诊;而用新的淋巴细胞绝对值参考范围判读可能就是阳性，能够及时提醒临床进行相关方面的排查。在某些病毒感染的病例中，淋巴细胞绝对值升高不明显，用新参考范围判读是阳性，可以及时发现病毒感染，而用操作规程中的参考范围判断可能就是阴性，此时患者如果再伴随疼痛、紧张等因素导致WBC生理性升高，那么临床就很可能误诊为细菌感染。所以本次建立的新的淋巴细胞绝对值参考范围或许可以减少一些细菌感染的误诊，降低抗生素的误用。

［1] Monagle P，Barnes C，Ignjatovic V，et al.Developmental haemostasis:impact for clinical haemostsis laboratories［J] .Thromb Haemost，2006，95(2):362-372.

［2] 周欢，蔡鹏威，窦敏.福州市健康体检人群静脉血血细胞22项参数参考值调查［J] .检验医学与临床，2009，11(22):1904-1907.

［3] 崔永哲，谢明春，高广智.辽阳市宏伟区成人静脉血血细胞22项参数参考值调查［J] .中国误诊学杂志，2008，8(22):5540-5541.

［4] 林应标，郭满容，欧阳育琪，等.郴州地区健康承认静脉血血细胞分析参考范围调查［J] .实用预防医学，2010，17(2):235-237.

［5] 王波，李君安，熊元，等.南充地区健康成人静脉血血细胞参考范围调查［J] .国家检验医学杂志，2007，28(11):980-982.

［6] 叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程［M] .3版.南京:东南大学出版社，2006:69，1017.

［7] Sabine H，Michael B，Carla F，et al.Age-matched lymphocyte subpopulation reference values inchildhood and adolescence:application of exponential regression analysis［J] .Euro J Haematol，2008，80(6):532-539.

［8] 高原，杨剑敏，王欢，等.上海市区2408例健康儿童末梢血血常规参数的参考区间调查分析［J] .检验医学，2012，27(3):217-220.

［9] 曾洁，陈文祥，申子瑜.参考区间研究现状概述［J] .中华检验医学杂志，2010，33(6):570-573.