FISH检测纠正核型分析18—三体误报1例

李会平

(邢台市人民医院 检验二科，河北 邢台054001)

1 临床资料

患儿男，因出生后呼吸稍促2.5 h入院。患儿系第二胎第一产，足月儿，无诱因自然分娩，出生体重2 350 g。入院时查体：头顶部突出，前囟平坦，张力不高，口周无发青，口唇无发绀，高颚弓，无鼻翼，耳位低，颈部粗短，吸气性三凹征弱阳性，双手通贯掌，双手紧握，拇指内收，中指压在食指上，足趾背曲，四肢肌张力低，原始反应弱。

2 外周血染色体分析

无菌抽取患儿外周血常规进行G显带染色体核型分析，发现一衍生染色体，疑似18号衍生染色体der(18)(Y；18)(q11；q23)，核型暂定为46，X，+18，der(18)(Y；18)(q11；q23)。具体核型如图1。为查找该衍生染色体来源，建议患儿父母做染色体核型分析，父母双方均拒绝检测。为此对在染色体核型分析中留取的细胞悬液进行分子学水平18、X、Y染色体荧光原位杂交(FISH)检测。检测试剂采用北京金菩嘉医疗科技有限公司试剂盒，18号、X、Y染色体相应标记颜色为蓝色、绿色、红色，具体探针标记位置为：18号染色体(18p11.1-q11.1),X染色体(Xp11.1-q11.1),Y染色体(Yp11.1-q11.1)。FISH检测结果如图2。FISH结果显示一个红信号和一个绿色信号及两个蓝色信号，这三个不同颜色的信号分别是一个带有着丝粒的Y染色体和X染色体及两个均带有着丝粒的18号染色体，说明该患儿染色体核型分析图中的衍生染色体是Y染色体而不是18号染色体。按照原暂定核型46，X，+18，der(18)(Y；18)(q11；q23)，FISH结果应显示三个蓝色信号(即三个均含有着丝粒的18号染色体)和一个蓝色信号，说明我们所暂定的染色体核型分析是错误的，具体核型应该是46，XY，add(Y)(q12)，即两条正常的18号染色体、一条正常X染色体和一条未知来源附加物的Y染色体。

图1(a) 图1(b)

3 讨论

18—三体综合征是仅次于先天愚型的一种常见染色体三体综合征，主要临床表现为多发畸形，如早产，过期产，出生体重低，小于胎龄儿，头颅小，眼裂小，耳位低，小下颌，颚弓高，胸廓畸形，先天性心脏病以及手足异常等，通常表现为手指紧握，拇指压于食指，无名指和小指压于中指，或者食指叠压于中指上，小指压于无名指上，患儿大多于生后数周死亡[1]。该患儿具有典型的18—三体临床特征，并且其染色体核型中未知来源附加物的Y染色体酷似18号染色体q23位置附加外来物质，造成核型暂定为18三体的错误核型。后经分子学水平FISH检测后证实原暂定核型错误，说明传统的细胞遗传学水平核型分析技术也有一定的瑕疵，并不能百分之百确认，对于复杂的、难于确认的染色体需和分子学水平的FISH检测技术相互结合才能互补优缺、完成对染色体核型的准确分析。

染色体核型分析是传统的染色体疾病诊断技术，既可检测染色体数目异常，也可检测染色体结构异常，是临床筛查染色体疾病的传统有效方法。然而因其受到细胞培养周期的限制，不利于快速诊断，且操作技术要求高，影响试验因素多，有些染色体重排由于涉及的片断太小或具有相似的带型，一些微畸变、微缺失往往在常规染色体核型分析技术中不能够检出，造成诊断上的误差。染色体荧光原位杂交(FISH)技术是近年发展的针对特定染色体进行数目结构异常诊断的一种新方法，用于染色体疾病诊断具有快速，特异，定位准确等优点，该技术能识别微小染色体易位、缺失，确定附加染色体、标记染色体、衍生染色体的组成和来源[2-3]，是常规染色体核型分析的有利补充。FISH技术用于染色体疾病诊断也有一定的局限性，因为它对诊断染色体疾病的可靠性在很大程度上依赖于探针的特异性，受特异性探针的制约仅能提供有限的染色体信息，即用一种探针只能检测一种异常，不利于常规检测。对怀疑存在多种异常染色体需采用多个探针进行检测，造成成本增加，另外，FISH对相互易位等染色体结构异常检出有一定困难，这是由于断裂点的不可预见性很难制备适宜的探针，再次，目前用于染色体异常检测的商品化FISH探针多数属于着丝粒探针，该类探针不能对染色体结构进行检测[4]，易造成染色体结构异常漏诊。

该患者染色体核型分析暂定核型属于误报，经FISH纠正仍不能确定附加物质来源，是由于我实验室FISH探针针对点位的局限性，仅凭一两组探针无法完成对该Y染色体附加物的确认，该患者Y染色体上的附加物质来源进一步确认需对该患儿父母进行染色体核型分析。

总之，对于染色体核型分析复杂的，难于确定的染色体，应选择FISH进一步检测，可以防止错报、漏报。二者有机结合将大大提高染色体疾病诊断的准确性及误诊率，为临床提供更加准确可靠的诊断依据。

参考文献：

[1]张美和.检验与临床诊断儿科学分册[M].第1版．北京：人民军医出版社，2006：87-88.

[2]肖云山，张静引.荧光原位杂交检测在产前诊断中的临床价值[J].中国优生与遗传杂志,2010,18(3)：57.

[3]王 华，林 梅.产前染色体疾病诊断方法的研究进展[J].中华妇幼临床医学杂志，2011，7(4)：366.

[4]宋兰林,熊 丽,刘思平,等.FISH技术在快速诊断自然流产胚胎染色体数目异常中的应用[J].南方医科大学学报,2011,31(9)：1605.