猪瘟和伪狂犬活疫苗 几种免疫方式的免疫效果评价

林德锐 皇培刚 罗文琼 常晗蕾

摘要：为了评价猪瘟和伪狂犬活疫苗的免疫效果，采用猪瘟活疫苗（传代细胞源）和伪狂犬活疫苗（Bartha-K61株）对35～40日龄猪瘟和伪狂犬母源抗体阴性的健康仔猪分为4组，分别进行单独注射、分点同时注射与混合注射，观察各组注射后的副反应，并对不同时期的抗体用ELISA试验检测血清抗体效价来评价其免疫效果。试验结果表明，两种疫苗同时分点注射和混合注射，相互间的干扰很小，两种疫苗同时注射不影响各自免疫抗体的产生，原因可能是两疫苗共同刺激动物的免疫器官后有提高动物产生免疫抗体的作用[1]。

关键词：猪瘟；伪狂犬；注射；免疫效果；疫苗猪瘟和猪伪狂犬病是目前危害养猪业的主要传染病，给养猪业带来巨大的经济损失[2],特别是近几年，猪伪狂犬病在国内有扩大流行的势头，一旦猪瘟和伪狂犬病同时爆发，将给猪场带来毁灭性的打击。本试验用猪瘟活疫苗（传代细胞源）、伪狂犬活疫苗（Bartha-K61株）单独注射、分点同时注射和混合注射健康易感仔猪，了解抗体产生的时间和抗体水平，从而评价几种免疫方式的免疫效果差异。

1材料与方法

1.1材料

1.1.1 疫苗及稀释液

猪瘟活疫苗（传代细胞源）：云南生物制药有限公司生产，批号：2013021，病毒效价：18 000 RID/头份，生产日期：2013年7月15日。

伪狂犬活疫苗（Bartha-K61株）：云南生物制药有限公司生产，批号：2013001，病毒效价：106.0TCID50/头份，生产日期：2013年4月19日。

猪用活疫苗专用稀释液：云南生物制药有限公司生产，批号：20130516，生产日期：2013年5月16日。

1.1.2试验地点

昆明市嵩明杨林青石山猪场，猪场疫病预防控制较好，具备试验条件。

1.1.3试验动物

从90头35～40日龄仔猪中用猪瘟抗体ELISA检测试剂盒（IDEXX）及伪狂犬抗体ELISA检测试剂盒（IDEXX）检测，选择出52头猪瘟母源抗体、伪狂犬母源抗体均为阴性的健康仔猪。

1.1.4诊断试剂

猪瘟ELISA抗体检测试剂盒、猪伪狂犬ELISA抗体检测试剂盒购自北京爱德士生物科技有限公司。

1.2方法

1.2.1试验分组及接种

随机分为4个组，每组13头猪，颈部肌肉注射，分组及免疫剂量如下：

猪瘟活疫苗（传代细胞源）试验组：按1头份/mL浓度稀释疫苗给每头仔猪注射猪瘟活疫苗1 mL；

伪狂犬活疫苗（Bartha-K61株）试验组：按1 头份/mL浓度稀释疫苗给每头仔猪注射伪狂犬活疫苗1 mL；

猪瘟活疫苗（传代细胞源）+ 伪狂犬活疫苗（Bartha-K61株）分点同时注射试验组：按1头份/mL浓度分别稀释两种疫苗，在该组每头仔猪的不同部位分别注射猪瘟活疫苗和伪狂犬活疫苗1 mL；

猪瘟活疫苗（ST）+ 伪狂犬活疫苗（Bartha-K61株）混合注射试验组：按照0.5头份/mL浓度混合稀释猪瘟和伪狂犬活疫苗，给每头仔猪注射2 mL。

1.2.2二次免疫

首次免疫接种后35 d，以2头份/mL稀释疫苗，对每个试验组的6头(一半)猪按一免方法进行二免（二免免疫一半主要是想了解猪只在二免的情况下抗体的变化，并与一免进行对比；计算数值时，因二免每组免疫了6只仔猪，一免的猪只按剩下的7只计算，二免按6只计算）。

2试验结果

2.1免疫副反应

免疫后的仔猪进行免疫接种副反应观察，观察注射2 d内均无过敏反应、呕吐、抽搐、休克等症状。

2.2 免疫效果检测

在首次免疫接种后28 d、42 d、56 d、70 d，进行采血分离血清，分别采用IDEXX公司抗体检测试剂盒及相应方法分别检测猪瘟免疫抗体及伪狂犬病免疫抗体滴度，进行抗体阳性率、抗体滴度平均值，综合判断免疫效果。检测方法按试剂盒操作方法进行并判定，结果如下：

2.2.1单独注射猪瘟活疫苗（传代细胞源）猪瘟注射抗体检测结果（猪瘟抗体阻断率%）

2.2.2单独注射伪狂犬病活疫苗免疫抗体检测结果

2.2.3 猪瘟活疫苗（传代细胞源）+ 伪狂犬病活疫苗分点同时注射试验组检测结果

2.2.3.1猪瘟免疫抗体检测结果（猪瘟抗体阻断率%）

2.3.3.2伪狂犬病免疫抗体检测结果

2.3.4猪瘟活疫苗（传达细胞源）+伪狂犬病活疫苗混合注射试验组检测结果

2.3.4.1猪瘟免疫抗体检测结果（猪瘟抗体阻断率%）

2.3.4.2伪狂犬病免疫抗体检测结果

3分析与讨论

3.1对猪瘟免疫抗体的分析与讨论

3.1.1单独注射

由表1可以看出：一免28 d后抗体阻断率平均值为62.0%以上，阳性率为100%；

一免后35 d取其中一半（6头）进行二免。一免后42 d采血测抗体，一免抗体阻断率平均值为72.6%，阳性率为100%；二免后7 d抗体阻断率平均值为82.3%，阳性率为100%。一免后56 d采血测抗体，一免抗体阻断率平均值为76.2%，阳性率为100%；二免后21 d抗体阻断率平均值为84.50%，阳性率为100%。一免后70 d采血测抗体，一免抗体阻断率平均值为54.2%，阳性率为85.7%；二免后35 d抗体阻断率平均值为73.50%，阳性率为100%。

一免后42 d前抗体阳性率均为100%，但一免后56 d及一免后70 d测抗体时，一免阳性率仅为85.7%，而二免后7 d、21 d、35 d阳性率仍为100%。

由此看出，单独注射瘟活疫苗（传代细胞源）时，二免抗体明显好于一免，但到56 d时，一免抗体已开始下降，需进行二免。

3.1.2分点同时注射

由表3可以看出：

一免后28 d，抗体阻断率平均值为65.3%以上，阳性率为83.3%；

一免后35 d取其中一半（6头）进行二免。一免后42 d采血测抗体，一免抗体阻断率平均值为78.5%，阳性率为100%；二免后7 d抗体阻断率平均值为78.9%，阳性率为100%。一免后56 d采血测抗体，一免抗体阻断率平均值为80.5%，阳性率为100%；二免后21 d抗体阻断率平均值为82.1%，阳性率为100%。一免后70 d采血测抗体，一免抗体阻断率平均值为73.7%，阳性率为100%；二免后35 d抗体阻断率平均值为75.9%，阳性率为100%。

一免后42 d后抗体阳性率均为100%，一免和二免抗体阻断率差别不大。

3.1.3猪瘟活疫苗（传代细胞源）+伪狂犬病活疫苗混合注射

由表5可以看出：

一免后28 d后抗体阻断率平均值为58.6%以上，阳性率为100%；

一免后35 d取其中一半（6头）进行二免。一免后42 d采血测抗体，一免抗体阻断率平均值为77.1%，阳性率为100%；二免后7 d抗体阻断率平均值为79.4%，阳性率为100%。一免后56 d采血测抗体，一免抗体阻断率平均值为85.1%，阳性率为100%；二免后21 d抗体阻断率平均值为85.3%，阳性率为100%。一免后70 d采血测抗体，一免抗体阻断率平均值为71.7%，阳性率为100%；二免后35 d抗体阻断率平均值为73.2%，阳性率为100%。