鹿茸益肾胶囊治疗肾阳虚证阳痿的药效学研究

张宗保

（济宁市皮肤病防治院，山东济宁 272100）

鹿茸益肾胶囊治疗肾阳虚证阳痿的药效学研究

张宗保

（济宁市皮肤病防治院，山东济宁 272100）

目的：研究鹿茸益肾胶囊治疗肾阳虚证阳痿的药效学机制。方法：观察鹿茸益肾胶囊对去势雄性大鼠阴茎勃起潜伏期的影响，对去势雄性大鼠附性器官和垂体、肾上腺、胸腺、脾脏质量系数的影响，对去势雄性大鼠性腺内分泌激素血清含量的影响，对氢化可的松致阳虚模型小鼠的影响。结果：鹿茸益肾胶囊能够提高去势雄性大鼠阴茎对刺激的兴奋性,显著缩短勃起潜伏期，提高去势雄性大鼠附性器官的质量系数；提高去势雄性大鼠垂体、肾上腺质量系数；降低去势雄性大鼠胸腺、脾脏质量系数；显著升高大鼠血清睾酮（T）、皮质醇（F）含量、显著降低血清促黄体生成素（LH）、促卵泡刺激素（FSH）含量；显著改善阳虚小鼠的阳虚症状，增强生命力。结论：鹿茸益肾胶囊具有温阳益肾的作用，可用于治疗肾阳虚证阳痿、性功能减退。.

鹿茸益肾胶囊；药效学；肾阳虚证；阳痿；动物模型

鹿茸益肾胶囊主要由鹿茸、淫羊藿、牛膝等七味中药提取精制而成，功能温阳益肾，主治肾阳虚证阳痿、性功能减退等；该产品属国内创新产品，已取得国家发明专利权（ZL200810016437.9）。依照《中药新药研究的技术要求》，对鹿茸益肾胶囊进行了与功能主治相关的药效学研究。

1 材料

1.1 动物

雄性Wistar大鼠，体质量（200±20）g；雄性昆明种小鼠，体质量（20±2）g，以上动物均由山东鲁抗医药股份有限公司实验动物中心提供，清洁级动物，合格证号SCXK（鲁）20080002。用普通饲料喂养，动物房温度19～24℃、湿度40%～60%。

1.2 药物

鹿茸益肾胶囊由兖矿集团有限公司总医院制备，提取淫羊藿、牛膝、人参、黄芪和当归的有效部位，经真空浓缩、干燥、粉碎后与蜂王浆冻干粉及鹿茸微粉混匀，装入胶囊，即得；阳性对照药益肾兴阳胶囊由吉林市惠丰制药有限公司生产，功能益肾兴阳，主治肾阳亏虚引起的阳痿、性功能减退等；灌胃给药时，取药物以生理盐水制成适当浓度的混悬液。

1.3 仪器

Beckman Clinical System700型全自动生化分析仪（美国Beckman公司）；MD110-2型电子天平（上海天平仪器厂）；DC-15型恒温槽（温州奥利生物医学仪器厂）；系列ELISA试剂盒（上海江莱生物科技有限公司）。

2 方法与结果

2.1 对去势大鼠的影响

2.1.1 实验方法参[1-2]，取雄性Wistar大鼠60只，皮下注射乌拉坦（1.5 g/kg）麻醉，用75%乙醇消毒阴囊皮肤，摘除双侧睾丸，术后肌内注射青霉素钠4万U/kg，制备去势动物模型。去势术后第3天将去势大鼠随机分6组（n=10），鹿茸益肾胶囊高、中、低剂量组（3.2，1.6，0.8 g/kg）、益肾兴阳胶囊阳性对照组（1.5 g/kg）、去势模型组（等容积生理盐水）和正常对照组（不给药）。各给药组皆灌胃给药，每日1次，连续20日。给药20日后，将电刺激仪刺激电极放置于大鼠阴茎部位，给予4 mA、25 V的刺激，记录从刺激开始到阴茎勃起的时间（阴茎勃起潜伏期，s）；次日称定体质量，眼球后取血，分离血清，用于测定血清睾酮（T）、促黄体生成素（LH）、促卵泡刺激素（FSH）、皮质醇(F)含量；再杀取大鼠，将各组大鼠的包皮腺、精液囊-前列腺、提肛肌、垂体、肾上腺、胸腺、脾脏取出称重，分别计算各器官的质量系数（器官质量/体质量）。

采用SPSS13.0统计软件进行统计学数据分析，实验结果用±s表示，分类资料用χ2检验，组间两两比较用Tukey检验，显著性检验水平为α=0.05；数据不满足正态和方差齐则用非参数秩和检验（Kruskal-Wallis），组间两两比较用Mann-Whitney检验。

2.1.2 对去势雄性大鼠阴茎勃起潜伏期的影响结果见表1。去势模型组大鼠的阴茎勃起潜伏期较正常对照组显著延长（P＜0.01）；鹿茸益肾胶囊高、中、低剂量组大鼠的阴茎勃起潜伏期，同去势模型组比较均显著缩短（P＜0.05），同正常对照组比较无显著性差异（P＞0.05）；表明鹿茸益肾胶囊能显著促进性功能、改善性功能障碍。

表1 对去势大鼠阴茎勃起潜伏期的影响(±s)

表1 对去势大鼠阴茎勃起潜伏期的影响(±s)

注：与去势模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01

组别n阴茎勃起潜伏期(s)正常对照组1020.3±3.8**去势模型组1037.0±9.2阳性对照组1023.4±3.5*高剂量组1021.2±4.1**中剂量组1022.6±4.4**低剂量组1024.3±3.2

2.1.3 对去势雄性大鼠附性器官质量系数的影响结果见表2。去势模型组大鼠附性器官的质量系数较正常对照组均显著降低（P＜0.05）；鹿茸益肾胶囊给药组大鼠附性器官的质量系数，同去势模型组比较，高、中剂量组均显著增高（P＜0.05），低剂量组增高但不显著（P＞0.05）；表明鹿茸益肾胶囊有提升性功能的作用。

表2 对去势大鼠附性器官质量系数的影响(±s,μg/g体质量)

表2 对去势大鼠附性器官质量系数的影响(±s,μg/g体质量)

注：与去势模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01

组别n质量系数包皮腺精液囊-前列腺提肛肌正常对照组10337.4±42.0**603.7±123.1**505.2±45.1**去势模型组10208.0±26.8312.1±27.8215.5±29.4阳性对照组10269.6±26.7*392.2±48.7*235.5±21.4*高剂量组10294.3±29.5*434.5±53.9*292.4±23.2*中剂量组10281.2±24.6*418.9±46.3*278.3±20.7*低剂量组10251.3±31.2365.2±53.0253.3±15.8

2.1.4 对去势雄性大鼠垂体、肾上腺、胸腺、脾脏质量系数的影响结果见表3。同正常对照组比较，去势模型组大鼠垂体、肾上腺的质量系数降低但不显著（P＞0.05），胸腺的质量系数显著增高（P＜0.05），脾脏的质量系数增高但不显著（P＞0.05）；鹿茸益肾胶囊高、中、低剂量组同去势模型组比较，各剂量组垂体的质量系数均增高但不显著（P＞0.05），高、中剂量组肾上腺的质量系数显著增高（P＜0.05）、胸腺的质量系数显著降低（P＜0.05），高剂量脾脏的质量系数显著降低（P＜0.05）；表明鹿茸益肾胶囊能改善阳虚体质和免疫功能。

2.1.5 对去势雄性大鼠性腺内分泌激素血清含量的影响结果见表4。同正常对照组比较，去势模型组大鼠的血清T、F含量均显著降低（P＜0.05），血清LH、FSH含量均显著增高（P＜0.05）；鹿茸益肾胶囊高、中、低剂量组同去势模型组比较，各剂量组的血清T含量均显著增高（P＜0.05），高、中剂量组血清LH、FSH含量均显著降低（P＜0.05），高剂量组的血清F含量显著增高（P＜0.05）；表明鹿茸益肾胶囊能通过改善内分泌激素的血清含量而提升性功能。

2.2 对氢化可的松致阳虚小鼠的影响参考文献方法[2-3]，取雄性昆明种小鼠60只，随机分成6组（n=10），鹿茸益肾胶囊高、中、低剂量组（4.8，2.4，1.2 g/kg）、益肾兴阳胶囊阳性对照组（2.25 g/kg）、阳虚模型组（等容积生理盐水）和正常对照组（不给药）。各给药组皆灌胃给药，同时肌内注射氢化可的松0.5 mg/只，每日1次，连续给药7日。第7日给药后1 h，观察各组动物一般状况，测定动物体温、10 min自由活动次数及低温游泳存活时间，实验结果见表5。阳虚模型组小鼠体温下降（P＞0.05），活动次数及低温游泳存活时间均显著下降（P＜0.05）；鹿茸益肾胶囊高、中、低剂量组同阳虚模型组比较，各剂量组小鼠体温均升高（P＞0.05）、活动次数及低温游泳存活时间均延长（P＜0.05）；表明鹿茸益肾胶囊能改善阳虚症状、增强生命力。

表3 对去势大鼠垂体、肾上腺、胸腺、脾脏质量系数的影响(±s,μg/g体质量)

表3 对去势大鼠垂体、肾上腺、胸腺、脾脏质量系数的影响(±s,μg/g体质量)

注：与去势模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01

组别n质量系数垂体肾上腺胸腺脾脏正常对照组1034.6±2.7*132.7±18.5*1 958.3±206.6**2 532.2±164.7去势模型组1031.3±2.3120.0±21.92 922.1±314.62 875.3±249.4阳性对照组1032.9±2.7143.6±19.7*2 309.0±184.8*2 451.4±203.1高剂量组1035.1±2.2164.3±19.1*2 072.0±127.8*2 326.7±193.5*中剂量组1033.8±2.1155.4±20.3*2 241.1±171.8*2 407.9±206.0低剂量组1032.0±2.6142.6±24.32 615.8±203.52 537.2±212.6

表4 对去势大鼠性腺内分泌激素含量的影响(±s)

表4 对去势大鼠性腺内分泌激素含量的影响(±s)

注：与去势模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01

组别nT（nmol/L）LH（IU/L）FSH（IU/L）F（nmol/L）正常对照组103.43±0.83**0.96±0.40**1.59±0.44**36.42±5.45*去势模型组100.24±0.081.52±0.362.65±0.5228.87±4.93阳性对照组100.51±0.08*1.23±0.34*2.25±0.50*31.31±4.55*高剂量组100.59±0.12*1.14±0.22*2.01±0.45*36.29±4.39*中剂量组100.52±0.12*1.21±0.30*2.22±0.46*34.91±4.33*低剂量组100.43±0.11*1.32±0.432.29±0.5230.71±5.02

表5 对氢化可的松致阳虚小鼠的影响(±s)

表5 对氢化可的松致阳虚小鼠的影响(±s)

注：与阳虚模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01

组别n体温（℃）活动（次/min）存活（min）正常对照组1039.1±0.2625.3±1.12**11.02±1.08**阳虚模型组1037.5±0.1817.3±0.897.03±0.87阳性对照组1038.6±0.3423.7±1.03*10.06±1.02**高剂量组1039.0±0.3626.1±1.05**11.15±1.09**中剂量组1038.8±0.3524.6±1.04*10.41±1.07**低剂量组1038.2±0.3220.9±1.08*9.33±1.01*

3 讨论

中医学理论认为“人之根本在于肾，性之动力在于精”，要治愈肾阳虚证阳痿，必须既补先天之本（肾），又补后天之命（脾胃），“强肾而固精”，治则应温阳益肾[4]。鹿茸益肾胶囊基于上述治则组方，方以鹿茸壮肾阳、益精血，既能促进性功能、改善性功能障碍，又有增强免疫和强壮机体的作用，用作君药。淫羊藿补肾壮阳，具有提升性功能的作用，通过促进精液分泌，间接兴奋性欲而促进性功能；牛膝补肾填精壮阳，有较强促进蛋白质合成和mRNA合成的作用，以上两味助君药温阳益肾共为臣药。人参大补元气，可增强人的生命力、促进阴部血液循环而提高性欲；黄芪补中益气，能明显增强细胞免疫和非特异性免疫功能；当归强形体、补血活血，有明显增强免疫作用；蜂王浆冻干粉滋补强壮、健脑益智，含有免疫球蛋白和促性腺激素样物质，能明显提高人体免疫力，以上四味既能补后天之命（脾）以养先天之本（肾），又有欲助阳必先益气之意，共为佐药。牛膝尚能引诸药下行入肾以温阳益肾，兼作使药之用。上述七味中药配伍共达温阳益肾之功，能改善性功能障碍并提高人体免疫力。

作者曾进行临床综合疗效观察，鹿茸益肾胶囊治疗组纳入510例，临床痊愈260例（51.0%）、显效145例（28.4%）、有效55例（10.8%），总有效率为90.2%；益肾兴阳胶囊对照组纳入345例，临床痊愈142例（41.2%）、显效83例（24.0%）、有效53例（15.4%），总有效率为80.6%；两组临床痊愈率、显效率比较，治疗组优于对照组（P＜0.05），表明鹿茸益肾胶囊治疗肾阳虚证阳痿、性功能减退疗效显著。

肾阳虚证是中医学理论体系中重要的证候之一，是涉及机体多器官、多系统、多水平的整体反应[5]。药效学研究结果表明，鹿茸益肾胶囊能显著提高去势雄性大鼠阴茎对外部刺激的兴奋性、缩短阴茎勃起潜伏期，增高大鼠附性器官的质量系数，显著升高大鼠T、F含量，并促使垂体、肾上腺质量系数增高，调节胸腺、脾脏的质量系数，调节血清LH、FSH含量；显著改善阳虚小鼠的阳虚症状增强生命力。本实验研究结果与中医学理论及临床疗效观察结果相符，为鹿茸益肾胶囊临床用于治疗肾阳虚证阳痿、性功能减退提供了理论基础，表明鹿茸益肾胶囊具有温阳益肾的作用，通过促进性功能、改善性功能障碍和提高机体免疫力，能有效改善阳痿、性功能减退患者的阳痿不举、性欲减退、腰膝酸软、畏寒肢冷、精神萎靡、夜尿频多等，显著缓解肾阳虚症状甚至痊愈。

[1]何帮剑，肖鲁伟，童培建.肾阳虚证动物模型的研究进展[J].中国中医急症，2012，21（8）：95-96.

[2]张宗保.阳春肾舒胶囊的制备及药理学研究[D].济南：山东大学，2012.

[3]刘欣，张冰，刘小青，等.氢化可的松诱导大鼠类阳虚状态的动态观察[J].中华中医药杂志，2011，26（1）：126-128.

[4]李炜弘，严石林，汤朝晖，等.肾阳虚证辨证诊断标准的专家评价[J].辽宁中医杂志，2010，37（7）：15-17.

[5]陈栋炜，蒙一纯，方湘娟，等.肾阳虚证本质的现代医学研究进展和展望[J].现代中西医结合杂志，2005，14（23）：3175-3177.

Pharmacodynamic Study of Lurongyishen Capsules on the Treatment of Impotence with Kidney Yang Deficiency Syndrome

Zhang Zongbao（Dermatology Hospital of Jining City，Shandong Jining 272100，China）

Objective:To study the pharmacodynamic mechanism of lurongyishen capsules in the treatment of impotence with kidney yang deficiency syndrome.Methods:To observe the effects of lurongyishen capsules on penile erection latency in castrated male rats，the effects on the accessory sex organs，pituitary，adrenal，thymus and spleen weight coefficient of castrated male rats，the influence on their serum gonadal hormone content and the impact on hydrogen hydrocortisone induced yang deficiency model mice.Results:Lurongyishen capsules can improve the excitation of the penis to stimulation of castrated male rats and significantly shorten the erectile latency，improve the accessory sex organs，pituitary and adrenal weight coefficient，reduce the thymus and spleen weight coefficient，significantly increase rats’serum testosterone（T）and cortisol（F）levels，decrease serum luteinizing hormone（LH）and follicle-stimulating hormone（FSH）contents，improve yang deficiency syndrome and enhance the vitality of mice.Conclusion:Lurongyishen capsules have a function of reinforcing kidney，and can be used in the treatment of kidney yang deficiency impotence and sexual dysfunction.

Lurongyishen Capsules；Pharmacodynamics；Syndrome of Kidney Yang Deficiency；Impotence；Animal Model

10.3969/j.issn.1672-5433.2014.06.005

2014-03-28）

济宁市科技发展计划项目（[2010]第27号），山东省保健科学技术奖获奖项目

张宗保，男，硕士，副主任药师。研究方向：新制剂开发与应用研究。通讯作者E-mail：15092755086@163.com