含有基底细胞样表型三阴性乳腺癌的病理特点及其临床意义

管小青，袁 牧，顾书成，郑向欣，张旭旭，吴 骥，吴际生

随着乳腺癌的治疗进入分子分型时代，乳腺癌个体化、规范化的治疗使得5年生存率明显提高。但是，含基底细胞样表型(basal cell-like type, BCLT)的三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer, TNBC)的治疗仍非常棘手。我院2010年1月至2013年1月共收治TNBC 56例，其中含有BCLT的TNBC 36例，不含BCLT的TNBC 20例。现就此两类TNBC的病理及临床意义分析如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 56例TNBC乳腺癌患者均为女性。年龄23～63岁，中位年龄44.7岁。肿瘤大小：<2 cm 11例，2～5 cm 38例，>5 cm且有橘皮样改变7例。行改良根治术43例，保留乳房的乳腺癌根治术13例。有腋淋巴结转移的17例，其中转移数目1～3枚12例，≥4枚5例；有脉管系统癌栓的6例；按美国肿瘤联合会(AJCC)2002年版分期标准的TNM分期：Ⅰ期6例，Ⅱ期7例，Ⅲa期38例，Ⅲb期5例。病理组织学分级：Ⅰ级6例，Ⅱ级4例，Ⅲ级46例。病理类型：浸润性导管癌43例，浸润性小叶癌9例，浸润性微乳头状癌3例，髓样癌1例。

1.2 免疫组化检测方法 SP试剂盒及免疫组化染色一抗Ki67、p53、EGFR、CK5/6、CK17、CK14，免疫组化试剂盒均购自福建迈新生物科学技术有限公司。用已知阳性的乳腺癌切片作阳性对照，以PBS代替一抗作阴性对照。组织标本以10%甲醛固定24 h常规石蜡包埋，制作5 μm厚切片，按免疫组化操作规程进行。Ki67、p53定位于细胞核，EGFR定位于细胞膜，CK14、CK17、CK5/6定位于细胞膜和细胞质。结果的判定根据染色强度均采用半定量积分法[1]，即对每张切片的阳性细胞率及阳性细胞着色强度分别进行分级计分，根据阳性细胞显色深浅分级：不显色或显色不清为阴性(0分)；浅黄色为弱阳性(1分)；棕黄色为中度阳性(2分)；深褐色为强阳性。阳性细胞率以计数5个高倍视野细胞为准，平均每个视野内阳性细胞所占比例≤5 %为0分，6%～30 %为1分，31%～70 %为2分，>70%为3分。根据细胞染色深浅与阳性细胞率之和确定其表达强度，数值越大，说明表达越强。

1.3 统计学方法 应用SPSS13.0软件进行统计分析，计数资料采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 含BCLT的TNBC的判定 根据CK14、CK17、CK5/6、EGFR的免疫组化结果判定TNBC是否含BCLT，只要表达上述4种标志物中的至少一项为阳性，则认定为含BCLT。本组56例有上述基因至少一项表达的有36例(占64.29%)，其中，3例表达了4种，3例表达了3种，28例表达了2种，12例表达了1种；而无上述基因表达的有20例(占35.71%)。具体数据见表1。

表1 含BCLT的TNBC的结果判定(n/%)

2.2 含BCLT与不含BCLT的TNBC临床情况的对比 两组具体临床情况见表2。结果显示，含BCLT与不含BCLT的相比，患者年龄轻、绝经前期比例高、淋巴结转移率高、病期晚、分化程度差，均P<0.05。

表2 BCLT与不含BCLT TNBC临床情况的比较(n)

2.3 含BCLT和不含BCLT TNBC的Ki67及p53表达情况的比较 含BCLT的TNBC患者中，Ki67及p53的表达率均明显高于不含BCLT TNBC的表达率，均P<0.05。具体数据见表3。

表3 含BCLT和不含BCLT TNBC的Ki67和p53表达情况的比较(n)

2.4 含BCLT和不含BCLT TNBC的病理形态学比较 具体数据见表4。结果显示不含BCLT的TNBC患者与含BCLT的TNBC患者相比，差异无统计学意义。

表4 含BCLT和不含BCLT TNBC的形态学比较(n)

3 讨论

TNBC是一类异质性疾病，50%～90% 的TNBC为基底细胞样型，其余的有Luminal A、Luminal B型，Her-2过表达型等[2]。Lehmann等[3]报道经mRNA表达谱的聚类分析，可鉴定出7个亚型的TNBC：Basa-like 1、Basal-like 2、间质型、间质干细胞型、免疫调控型、雄激素受体型以及不可分类型，该研究非常清晰的展示了TNBC的异质性。本研究表明，56例的TNBC患者中，含有BCLT型的36例，占64.28 %，与Rakha等[4]的报道基本相似。

BCLT的TNBC的定义为：只要TNBC患者行CK14、CK17、CK5/6、EGFR等免疫组织化学检查，其中一项为阳性者均视为含BCLT。本组56例CK14、CK17、CK5/6、EGFR的表达率分别为94.44 %、22.22 %、97.22 %、63.89 %，其中CK14和CK5/6表达率均>90 %，说明CK14和CK5/6可以作为BCLT的TNBC的主要标记物。有文献报道CK5/6是最能反映含BCLT TNBC的标记物，其结合EGFR可完成对BCLT的TNBC进行免疫组织化学筛选[5]。本组资料显示，含BCLT与不含BCLT TNBC患者相比较，年龄轻、绝经前期比例高、淋巴结转移率高、病期晚、癌细胞分化程度差、恶性度高，这与近期的研究报道基本一致[6-7]。此外，本组资料显示，含BCLT的TNBC患者中Ki67、p53表达率明显高于不含BCLT TNBC的患者，差异有统计学意义。Ki67是一种存在于增殖细胞中的核抗原，是目前应用最广泛的增殖细胞标志之一。研究表明Ki67免疫的反应与细胞周期密切相关，在G1、S、G2、M期均表达，故认为Ki67是有效评估肿瘤细胞增殖活性的重要标记物[8]，目前有研究表明多种恶性实体肿瘤中Ki67的表达率远高于正常组织，与多种恶性肿瘤的发展、转移、预后有关[9]。故Ki67表达的高低对研究肿瘤的生物学行为、判断其危害性具有重要意义。p53位于17号染色体短臂上，野生型p53基因能抑制细胞转化，并能抑制癌基因的活动，而突变型p53基因可引起细胞的转化和癌变，使细胞无限增生，p53基因突变可能是乳腺癌病情进展恶化的重要因素。本组资料显示不含BCLT的TNBC癌组织中p53、Ki67的阳性表达率分别为65.00%、75.00%；在含有BCLT的TNBC癌组织中p53、Ki67的阳性表达率分别为91.67 %、97.22 %。以上结果说明，TNBC患者p53、Ki67的阳性表达率要明显高于非TNBC患者，而含有BCLT的TNBC患者 p53、Ki67的阳性表达率要明显高于不含BCLT的TNBC患者。

综上所述，含有BCLT的TNBC患者在其症状体征、病理学特点、免疫表型、诊断和治疗等都具有其特殊性。含有BCLT的TNBC预后较差，其组织学级别高、常规辅助治疗不敏感，患者病死率也较高。如何通过基因治疗等手段来改变此类患者的CK14、CK17、CK5/6、EGFR、p53、Ki67等的表达水平，降低含有BCLT的TNBC的恶性程度，仍然需要临床上进一步的探讨和研究。

参考文献：

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