稽留流产患者超声表现与其绒毛染色体异常的关系分析

杨 双，邓志敏，柳爱华

(深圳市宝安区人民医院，深圳518101)

稽留流产即过期流产，属于特殊的自然流产形式，是指胎儿或胚胎已经死亡，但仍在孕妇宫腔内滞留，未及时自然排出的现象［1］。本研究分析稽留流产患者的超声表现与其绒毛染色体异常的关系。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取深圳市宝安区人民医院于2012年1月～2013年3月收治的早期稽留流产患者356例，年龄22～41(32.4±5.2)岁;流产时怀孕时间42～86(71.6±7.9)d;怀孕期间305例有阴道出血(85.71%)，出血时间为 1 ～26(4.6±1.7)d;114例有下腹疼痛(32.02%)。

1.2 方法

1.2.1 B超检查 所有患者于怀孕6周时进行B超检查。若经B超检查未发现胎心，则在1周后进行复查;若已见胎心，且胚胎大小和停经周数相符，则2周后进行复查，直至10～12周。对超声检查中孕妇孕囊大小、胚芽长度、胚芽有无、卵黄囊有无及是否有胎心等进行记录。在超声检查中，曾有胎心搏动者为有胎心，记为甲组，共216例;超声检查无胎心搏动为无胎心，记为乙组，共140例。甲组怀孕时间(65.4±7.3)d，乙组(55.7±6.7)d，P ＜0.05;甲组停经时间(41.72±0.37)d，乙组(41.72±0.37)d，P ＞0.05。两组体外受精(IVF)者占比、35岁以上人群及有复发流产史例数、年龄等一般资料比较差异无统计学意义(P＞0.05)。

1.2.2 绒毛细胞培养与染色体核型分析 确定孕妇宫内胚胎停止发育后，告知患者，待患者签署同意书后行清宫术，在手术过程中，无菌吸管吸取绒毛，利用无菌生理盐水进行漂洗，送检。在显微镜下，选取10～20 mg优质绒毛组织，将之剪切成糊状，放入1 mL酶解液，37℃水浴箱中静置15 min;11 000 r/min离心5 min，清洗后以此速度再次离心5 min;弃上清液，将4 mL培养液加入其中并进行均匀吹打，接种在25cm2培养瓶中，5%CO2、37℃温箱中培养5～7 d。利用倒置显微镜进行观察，在发现克隆时换液并继续培养，在克隆数目达到标准后继续培养8～10 h。根据常规羊水细胞收获方式对绒毛染色体加以处理，利用固定液进行固定，离心并滴片，制为G显带染色体。在进行染色体核型分析时，对每份标本进行计数时，分30个分裂相，对3个核型进行分析，有嵌合体出现时计分裂相100个。对染色体分析结果进行拍照保存。

1.2.3 统计学方法 采用SPSS16.0统计软件。计数资料比较采用χ2检验。P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

356 例稽留流产患者均顺利完成绒毛染色体检测，甲组染色体核型检测结果正常83例、异常133例，其中结构异常11例、数目异常患者122例;在核型数目异常患者中，68例为三体异常结构。乙组染色体核型检测结果正常57例、异常83例，其中结构异常8例、数目异常患者75例;在核型数目异常患者中，46例为三体异常结构。甲组异常染色体发生率为62.41%(133/216)，乙组为59.29%(83/140)，P ＞0.05

3 讨论

稽留流产发病原因较为复杂，可能与内分泌异常［2］、生殖器解剖异常、免疫［3］或遗传等多方面因素有关。在早期自然流产中，稽留流产占比高达50%，且这一数值近年来呈不断增高趋势。根据文献报道，在早期自然流产中，胚胎发育异常是最常见原因，在所有致使早期自然流产原因中占比高达50%～60%［4］。当孕妇有过大精神压力，在遗传基因上存在缺陷，或者母体有不良习惯，受环境因素影响时，很可能会导致稽留流产现象。稽留流产不仅会给患者及其家庭造成极大痛苦，同时也会给患者身体造成严重创伤。自1961年Penrose等报道自然流产胚胎具有三倍体异常以来，随着人类细胞遗传学技术的提高，人们不断加深了对流产胚胎染色体异常的认识［5］。目前临床上更倾向于对多次自然流产的患者才行绒毛染色体分析。

在受精卵发育中会形成绒毛组织这一胚胎重要附属物。与胚胎细胞类似，绒毛细胞具有生物遗传性。同时，绒毛滋养层细胞分裂能力旺盛，在体外培养下可为研究细胞周期功能等提供所需细胞，因此在产前诊断中应用十分广泛［6］。在胚胎遗传因素所致缺陷中，稽留流产胚胎染色体异常是常见病因，有50%以上稽留流产是因染色体异常引起。在本次研究中，356例稽留流产患者经体外培养绒毛组织并对绒毛染色体核型进行分析，异常核型检出与文献报道一致。同时，在绒毛染色体核型分析中，染色体异常核型主要包括结构异常与数目异常，其中结构异常数目异常及三体异常占比均与文献一致。由此可知，三体是染色体数目异常中最常见现象，这是因为在减数分裂过程中，生殖细胞染色体不发生分离。在患者年龄不断增大的情况下，染色体三体发生几率会逐渐增高。临床实践证明，在患者胚胎停育时，有不同超声表现，主要为小胚胎、空孕囊、大卵黄、小孕囊等，一些超声表现和特定染色体有关。在本次研究中，分别对超声下有胎心或无胎心患者染色体异常情况进行对比，两组染色体异常发生率间差异无统计学意义［7］。

综上所述，染色体异常是诱导稽留流产的主要原因，对胚胎染色体异常情况进行研究，可为分析稽留流产形成原因及下次正常怀孕提供重要指导。

［1］Bell KA，Van Deerlin PG，Feinberg RF，et al.Diagnosis of aneuploidy in archival，paraffin-embedded pregnancy-loss tissues by comparativegenomic hybridization［J］.Fetil Steril，2001，75(2):374-379.

［2］Carp H，Toder V，Aviram A.Karyotype of the abortus in reourrent mis-carriag［J］.Fertil Steril，2001，75(4):678-682.

［3］刘桂莹.2种方法治疗稽留流产的临床观察［J］.医学信息，2013，26(2):229-229.

［4］冯艳萍，刘芳.IGF-Ⅱ在稽留流产患者绒毛组织中的表达［J］.河北医药，2013，35(5):732-733.

［5］肖青，秦爽，符芳，等.134例首次稽留流产患者的胎儿绒毛染色体分析［J］.中华临床医师杂志(电子版)，2012，6(3):205-206.

［6］雷琼，王琼，周灿权.不同分子遗传学方法用于自然流产绒毛细胞遗传分析的效果［J］.中华妇产科杂志，2009，44(4):253-256.

［7］田丽，王玉新，张石岭.绒毛染色体异常在胚胎停育中的细胞遗传学分析［J］.河北医药，2010，32(6):741-742.