Her-2和PTEN蛋白在胃腺癌中的表达及意义

李秀凤，苗 静，郭志岗

(临朐县人民医院病理科,山东 临朐 2626000)

随着人们生活水平的提高，胃癌在我国的发病率及病死率均有上升趋势。恶性肿瘤的发生、发展是多因子、多阶段、多因素的复杂过程，其中癌基因的激活与抑癌基因的低表达或失表达起到了重要的作用。本研究检测人类表皮生长因子受体2(human epidermalgrowth factor receptor-2,Her-2)、第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)在胃腺癌组织中的表达，旨在分析它们在胃腺癌发生、发展及预后中的作用，为胃腺癌的防治提供理论依据。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取临朐县人民医院2009年6月至2012年7月经手术常规病理证实的胃腺癌患者66例。其中男34例，女32例，年龄34～79(54.8±12.4)岁。66例常规病理切片均由两位病理科医师重新阅片，严格按照2006版世界卫生组织肿瘤分类及诊断标准系列[1]的标准判读，其中高、中分化癌23例，低分化癌43例；浸润黏膜层和肌层26例，浸润超过浆膜层(T3+T4)40例；淋巴结转移27例，无淋巴结转移39例。所有患者术前均未经放化疗等抗肿瘤措施，临床资料完整。25例对照组胃组织取自66例胃癌标本中的正常胃组织。

1.2试剂与方法 鼠抗人Her-2单克隆抗体(ZM-0065)、兔抗人PTEN单克隆抗体(ZA-0251)和生物素-链霉菌抗生素免疫组织化学试剂盒(SP-9001,SP-9002)及DAB显色剂(ZLI-9018)均购自北京中杉金桥生物公司。具体步骤严格按说明书进行，每例取原发癌灶组织和转移淋巴结，组织经10%甲醛固定，石蜡包埋，4 μm连续切片，分别进行链霉菌抗生素蛋白-过氧化物酶连接法(SP)染色，用0.1 mol/L磷酸缓冲液代替一抗作阴性对照。

1.3结果判断 光镜下观察，在排除非特异性染色的前提下，以细胞膜和细胞质中出现棕黄色物质者定为阳性细胞。按其染色有无及强弱程度划分为：阳性细胞<10%为阴性(-)，阳性细胞10%～25%为弱阳性(+)，阳性细胞26%～50%为中阳性(++)，阳性细胞>50%为强阳性(+++)。为简化计算，阳性表达包括+～+++。

1.4统计学方法 应用SPSS 13.0统计学软件对数据进行统计学分析，计数资料采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1胃癌组织中Her-2蛋白的表达 66例胃癌组织中Her-2表达的阳性率为60.6%，正常胃组织阳性率为4%(1/25)，胃癌组织中Her-2表达的阳性率显著高于正常胃组织(P<0.05)(表1)。Her-2在浸润浆膜层的阳性率显著高于浸润黏膜层肌层的阳性率(P<0.05)。在有淋巴结转移患者的阳性率也显著高于无淋巴结转移患者的阳性率(P<0.05)。在不同性别、年龄、肿瘤直径、分化程度中Her-2的阳性率，差异无统计学意义(表2)。

2.2胃癌组织中PTEN的表达 PTEN在66例胃癌组织中的表达阳性率显著低于在正常胃组织中表达阳性率(P<0.05)(表1)。PTEN在浸润浆膜层表达阳性率显著低于在浸润黏膜层肌层表达阳性率(P<0.05)。在无淋巴结转移的阳性率显著高于有淋巴结转移的阳性率(P<0.05)。在不同性别、年龄、肿瘤直径，分化程度中PTEN的阳性率差异无统计学意义(P>0.05)(表3)。

表1 Her-2和PTEN在胃癌和正常胃组织中的表达 [例(%)]

表2 Her-2在胃腺癌中的表达与临床病理关系 [例(%)]

表3 PTEN在胃腺癌中的表达与临床病理关系 [例(%)]

3 讨 论

Her-2基因又称原癌基因C-erbB-2，具有酪氨酸激酶的活性，其结构与表皮生长因子受体相似。Her-2基因蛋白的过度表达表明肿瘤的恶性程度高，患者预后差。但在不同恶性肿瘤中Her-2的表达率不同：有文献报道[2-4]Her-2在子宫内膜腺癌中的表达率为92%，在非小细胞肺癌中表达率为63.1%，在胃癌及贲门癌组织中表达只有6.73%。本研究显示在胃癌中Her-2的阳性表达率为60.6%，显著高于在正常胃组织中的阳性表达率4%，表明Her-2在胃癌中存在过度表达。

研究表明[5]，Her-2基因扩增与患者的生存期长短有关，而有学者[6]的研究结果与此相反。本研究表明，Her-2在胃癌中的阳性表达率与癌组织的浸润深度和淋巴结转移有关，组织浸润越深，有淋巴结转移，Her-2的阳性表达率越高，而与胃癌患者的年龄、性别、胃癌的分化程度无关。这与程建等[7]的研究结果大致吻合。因而可以把Her-2蛋白的表达水平作为评价胃癌患者预后的重要指标，Her-2基因也可作为胃癌靶向治疗的选择基因之一。

PTEN是迄今发现的第一个具有磷酸酶活性的抑癌基因，其与抑癌功能相关的结构域主要是氨基酸端的磷酸酶结构域和羧基端结构域。PTEN基因在人类多种恶性肿瘤(如恶性胶质瘤、前列腺癌、子宫内膜癌等)中存在突变。研究表明，PTEN在胃癌中的杂合性缺失频率比其突变率高[8-9]。

本研究发现，PTEN蛋白在胃癌中表达的阳性率显著低于正常胃组织，提示PTEN的缺失与胃癌的发生有关。本研究还证实，PTEN蛋白的阳性表达率与肿瘤浸润程度、淋巴结转移有关，浸润程度越深，PTEN蛋白表达率越低，有淋巴结转移组的PTEN蛋白表达率比无淋巴结转移组低，这与国内学者[10-11]研究相符合。说明PTEN基因的低表达或失表达促进了癌细胞的浸润和转移。因此，PTEN的表达情况可作为判断胃癌生物学行为的指标。

随着科学技术水平的发展，有关肿瘤癌基因和抑癌基因方面的研究已成为热点。本研究结果提示，Her-2与PTEN的非正常表达与胃癌的发生、发展及预后有关，但其通过何种机制如何影响，还有待进一步研究。通过对两者的研究，可为胃癌的预防、诊断和基因治疗提供依据。

[1] (美)哈米霍思(Hamilton SR)著，虞积耀译.消化系统肿瘤病理学和遗传学[M].北京:人民卫生出版社,2006:355-375.

[2] 易明福，魏晓梅.C-erbB-2 在非小细胞肺癌中表达的研究[J].临床肺科杂志，2008，13(4)：409-410.

[3] 朱正鹏，贾国凤，马健波.子宫内膜腺癌C-erbB-2 COX-2过度表达的相关性分析[J].中国肿瘤临床，2008，35(11):633-635.

[4] 凌斌勋，陈环球，徐新宇，等.C-erbB-2 在胃癌及贲门癌组织中表达的临床研究[J].实用临床医药杂志,2008,12(5):37-39.

[5] Tanner M,Hollmen M,Junttila TT,etal.Amplification of HER-2 in gastric carcinoma:association with Topoisomerasellalpha gene amplification,intestinal type,poorprognosis and sensitivity to trastuzumab[J].Ann Oncol,2005,16(2):273-278.

[6] Garcia I,Vizoso F,Martin A,etal.Clinical significance of the epidermal growth factor receptor and HER2 receptor in resectable gastic cancer[J].Ann Surg Oncol,2003,10(3):234-241.

[7] 程建,施启丰.胃癌中C-erbB-2、Ki-67的表达及其意义[J].南京医科大学学报:自然科学版，2011,30(11):1612-1614.

[8] Lima EM,Araujo JJ,Harada ML,etal.Molecular study of the tumor suppressor gene PTEN in gastric adenocarnoma in Brazil[J].Clin Exp Med,2005,5(3):129-132.

[9] Li JY，Zheng HC,Yang L,etal.Altered expression of PTEN gene and LOH of its epigenetic microsatellite in gastric carcinoma[J].Zhonghua Zhong Liu Za Zhi,2004,26(7):389-392.

[10] 王显艳，耿敬姝.抑癌基因PTEN在胃癌组织中的表达及意义[J].齐齐哈尔医学院学报,2007,28(3):280-281.

[11] 魏法才,陈启,杨道贵,等.胃癌组织中PTEN和VEGF的表达及其相关性[J].中华肿瘤防治杂志,2007,14(8):601-603.