Ets-1在宫颈腺癌组织中的表达及预后研究

高 荣

(尚义县医院 妇产科，河北 尚义 076750)

宫颈腺癌是宫颈腺上皮细胞发生的恶性肿瘤，较宫颈鳞状细胞癌少见，占子宫颈癌的5%～8%[1]。宫颈腺癌的发生是各种致病因素相互作用的结果，其主要体现在抑癌基因与癌基因的失衡。资料显示，transformation specific-1(Ets-1)基因是一种原癌基因[2]，其在多种肿瘤(如胃癌、肺癌和结直肠癌等[3-5])中呈过度表达，但是在宫颈腺癌组织中的表达情况未见相关报道。现将Ets-1在宫颈腺癌组织中的表达、其与临床病理因素的关系以及对患者预后的影响进行研究。

1 资料和方法

1.1临床资料 收集2006年3月至2008年2月在尚义县医院就诊的80例宫颈腺癌患者的资料，所有资料均经临床病理医师审核。患者年龄38～66(45.0±2.0)岁，其中≥45岁者41例、<45岁者39例。黏液腺癌75例、浆液性腺癌2例、子宫内膜型腺癌3例；肿瘤直径≥2 cm者66例、<2 cm者14例；TNM分期：Ⅰ～Ⅱ期33例、Ⅲ～Ⅳ期47例。淋巴结转移者55例、无转移者25例；癌组织远处转移者33例，无远处转移者47例。患者之前均未接受过放化疗治疗。电话随访5年，其中5例失访。同时从选取的80例患者中选出40例获取其距腺癌0.3 cm处的癌旁组织。

1.2试剂和方法 即用型Ets-1兔抗人单克隆抗体及配套试剂购自福州迈新生物技术有限公司。免疫组织化学法采用EnVisionTM两步法，具体操作步骤参照试剂盒说明书进行。阳性对照切片由福州迈新生物技术有限公司提供，阴性对照采用磷酸盐缓冲液代替一抗制作。

1.3结果判断 以细胞质和(或)细胞核出现黄色或黄褐色颗粒为阳性染色，根据着色范围及强度进行判断[5]。①选取5个高倍视野，计数阳性细胞所占的百分比、阳性细胞数<5%计0分、阳性细胞数5%～25%计1分、阳性细胞数26%～50%计2分、阳性细胞数>50%计3分；②按染色强度评分，不着色计0分、黄色计1分、棕黄色计2分、黄褐色计3分。两种评分相加：0～2分为“-”；3～4分为“+”；5～6分为“++”。

1.4统计学方法 应用SPSS 17.0统计软件分析处理相关数据，计数资料的比较采用χ2检验，采用Kaplan-Meier法进行生存分析，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1Ets-1蛋白在宫颈腺癌组织中的表达 Ets-1在宫颈腺癌组织中以细胞核着色，未见胞质着色(图1)，Ets-1在癌旁组织中的正常宫颈腺体呈阴性表达，未见胞核或胞质着色(图2)。在80例宫颈腺癌组织中，Ets-1呈阳者42例，阳性率为52.5%；在40例癌旁组织中阳性表达3例，阳性率7.5%，两者比较差异有统计学意义(χ2=23.04，P<0.05)(表1)。

表1 Ets-1蛋白在宫颈腺癌组织中的表达 (例，%)

图1 图2

图1Ets-1在宫颈腺癌组织中的阳性表达，着色定位于细胞核(免疫组织化学染色×100)图2Ets-1在癌旁组织中的阴性表达，胞核或胞质均未着色(免疫组织化学染色×100)

2.2Ets-1在宫颈腺癌组织的表达与临床参数的关系 Ets-1的表达与肿瘤大小、淋巴结转移、远处脏器转移、TNM分期有关(χ2=6.57，6.13，6.67，3.87，P<0.05)，与患者年龄、肿瘤组织学类型无关(χ2=1.23，0.23，P>0.05)(表2)。

表2 Ets-1的表达与宫颈腺癌临床病理因素的关系 (n=80)

2.3宫颈腺癌患者的生存分析 5年随访期间，80例宫颈腺癌患者中有5例失访(包括2例阳性、3例阴性)，失访率为6.25%。40例Ets-1表达阳性的患者中11例患者存活，生存率为27.50%；在35例Ets-1表达阴性的患者中有16例患者存活，生存率为45.71%，Ets-1蛋白阴性患者的生存率显著高于阳性患者，差异有统计学意义(χ2=4.18，P=0.04)(图3)。

图3 Ets-1在宫颈腺癌患者生存分析

3 讨 论

人类Ets-1基因位于染色体11q23上，编码相对分子质量为54×103的蛋白质，其结构域位于C端，结构域的两侧是具有负性调节Ets-1与DNA结合的两个抑制性结构域，中央为反式激活结构域。在正常的生理过程中，Ets-1参与了组织的发育，细胞的增殖分化、迁移、凋亡及新生血管的形成等[6-8]；在病理过程中，Ets-1不仅在肾小球硬化及间质纤维化进程中与基质金属蛋白酶3关系密切，并可能通过Ets-1诱导基质金属蛋白酶3蛋白的表达上调参与肾组织损伤及基质重塑过程[9]，而且其在多种恶性肿瘤中呈现过表达[10-13]。本研究显示，Ets-1在宫颈腺癌组织中的表达远远高于癌旁组织，表明Ets-1的高表达一定程度上诱导了宫颈腺癌的发生。Ets-1的表达与年龄、组织学类型无关，而与肿瘤大小、淋巴结转移、远处脏器转移、TNM分期有关，这与郑丽娟等[14]研究结果类似。淋巴结及远处脏器转移是患者病情严重的表现，而这种情况与Ets-1的高表达有关，说明Ets-1可通过某种机制或途径实现癌组织的浸润转移。有资料显示，Ets-1能诱导活化基质金属蛋白酶、尿激酶型血浆酶原激活因子等降解细胞外基质进而发生浸润转移[15]。可见，在宫颈腺癌发生及浸润转移的过程中，Ets-1的高表达不是单独事件，而是多种因素相互作用的结果。生存分析结果显示，Ets-1蛋白阴性患者生存率显著高于阳性患者，说明Ets-1表达越高，患者生存越差。因而推测，Ets-1可作为判断宫颈腺癌患者生存预后的指标。

总之，Ets-1在宫颈腺癌组织中呈现过表达，其表达水平越高，患者发生浸润转移的概率越大，其生存预后越差。因此，建议在评估宫颈腺癌患者生存预后方面，不仅要参考临床相关指标，也可检测组织中Ets-1的表达来间接推测。

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