NFSF15基因多态性与克罗恩病易患性的Meta分析

邓银芝，张长江，贺建华△※

(恩施州中心医院 1消化内科， 2内科心血管病中心，湖北 恩施445000)

克罗恩病(Crohn disease,CD)是一种病因尚不十分明确的非特异性慢性胃肠道炎性肉芽肿疾病,目前认为其发病与环境、遗传、微生物及免疫等因素有关。CD的家族聚集现象和CD发病的种族差异性提示遗传因素在CD发病过程中起着至关重要的作用。NFSF15(tumor necrosis factor superfamily，member15)基因能编码包括肿瘤坏死因子超家族成员15(Tumor necrosis factor superfamily-15,TNFSF15,TL1A又名TNFSF15)与DR3炎性因子在内的多种细胞因子,鉴于炎症在CD发生、发展中的作用,国内外学者对NFSF15基因rs3810936位点多态性与CD易患性做了大量研究,但由于单个研究样本量小和地区差异,导致各研究结论不一。为解决这些分歧,本研究对已发表的相关研究进行Meta分析,以明确NFSF15基因rs3810936位点多态性与CD风险的相关性。

1 资料与方法

1.1纳入和排除标准

1.1.1纳入标准 ①涉及NFSF15基因多态性与CD易患性相关性的文献；②所有纳入研究均为公开发表的病例对照或巢式病例对照；③全文发表；④文献中数据完整,能直接或间接提供统计指标比值比(odds ratio,OR)及95%CI；⑤病例均为经确诊CD患者,其诊断符合诊断标准[1]或者内镜、组织、影像学综合检查结果。

1.1.2排除标准 ①研究未设立对照组；②具体数据描述不清；③重复报道；④CD相关的综述以及动物实验。

1.2检索策略 计算机检索英文数据库EMbase、PubMed以及中文数据库CBM、CNKI,检索时间均为1990年6月至2013年6月。英文检索式:“Crohn disease or CD or inflammatory bowel disease or IBD”AND“mutation OR variant OR polymorphism”AND“NFSF15 OR rs3810936”；中文检索式:“克罗恩病或CD”和“基因多态性或突变”和“NFSF15 OR rs3810936 ”。文种限中、英文,手工检索相关学术杂志。

1.3资料提取 由两位评价者独立根据纳入标准对文献进行筛选,通过讨论达成一致。两位评阅人独立完成对原始文献记录数据的收集。提取以下一般信息:第一作者姓名、出版年份、国家、病例组和对照组基因型分布及其频率(表1)。

1.4方法学质量评价 根据STREGA原则，对纳入研究进行质量评价[2]。文献质量指标包括：①样本量是否充分；②病例诊断是否清楚；③病例组和对照组匹配情况；④对照组基因型分布是否符合H-W遗传平衡定律；⑤基因检测方法是否合理；⑥数据是否充分。以上6项，每满足一项记为1分，其中总分≥3分者为质量可靠。

1.5统计学方法 应用Revman5.0软件进行Meta分析。采用χ2检验分析各研究结果间的异质性；各研究结果间的异质性检验采用Q检验和P统计量,P<0.05提示各研究间存在异质性,I2用来衡量异质性大小程度，若各研究结果间不存在异质性，合并采用固定效应模型计算OR；反之采用随机效应模型，合并效应OR，P<0.05为差异有统计学意义。敏感性分析为依次排除单个文献后重新进行Meta分析,观察合并效应是否改变,森林图对称性判断是否存在发表偏倚。

2 结 果

2.1文献检索结果 根据中英文检索式初检出文献134篇，经阅读文题和摘要初筛，纳入文献51篇，进一步查找和阅读全文复筛，最终纳入5篇文献，包括中文文献1篇和英文文献4篇[3-7]。所有纳入研究均为国内病例对照研究。共纳入患者3328例，其中CD患者1178例，对照人群1550例。TT、TC、CC基因型在病例组和对照组的分布分别为50.11%、41.45%、8.44%和35.81%、47.94%、16.26%。纳入的研究时间分布为2005～2010年,研究人群主要分布在日本、韩国、英国、中国(表1)。

2.2纳入研究质量评价 根据评分标准对文献评分，5篇文献评分分别为4,5,4,3,4分；均分为4分提示文献质量较好。

2.3Meta分析结果 NFSF15基因rs3810936多态性与CD易患性Meta分析结果显示，纯合子比较模型(CC vs TT):OR=0.34,95%CI0.17～0.72,P=0.004；杂合子比较模型(TC vs TT):OR=0.62,95%CI0.54～0.72,P<0.01；显性遗传模型(CC+TC vs TT):OR=2.18,95%CI1.19～4.02,P=0.01；隐性遗传模型(CC vs TC+TT):OR=0.46,95%CI0.25～0.84,P=0.01(图1～图4)。

表1 纳入研究的一般情况以及基因型分布

图1 NFSF15基因rs3810936位点多态性与CD易患性CC vs TT比较Meta分析

图2 NFSF15基因rs3810936位点多态性与CD易患性TC vs TT比较Meta分析〗

图3 NFSF15基因rs3810936位点多态性与CD易患性CC+TC vs TT比较Meta分析

2.4发表偏倚分析 四种基因模型的Meta分析漏斗图均对称，提示无发表偏倚存在(图5～图8)。

2.5敏感性分析 依次单独剔除1篇文献后,各基因模型Meta分析结果未见明显改变，提示Meta分析结果稳定。

图4 NFSF15基因rs3810936位点多态性与CD易患性CC vs TC+TT比较Meta分析

图5 CC vs TT比较漏斗图 图6 TC vs TT比较漏斗图 图7 CC+TC vs TT比较漏斗图 图8 CC vs TC+TT比较漏斗图

3 讨 论

CD是多因素共同作用导致的疾病,其发病机制主要与肠道菌群，异常免疫介导的组织损伤和遗传易患性有关。CD患者发病过程中肠膜细分泌干扰素γ、肿瘤坏死因子和白细胞介素2、白细胞介素18，这些促炎症细胞因子在肠道黏膜的炎症发生、发展中发挥重要作用[8-9]。

研究表明，CD患者肠道黏膜固有层T细胞表达NFSF15基因编码基因产物TL1A上调，且CD患者结肠炎性区的TL1A mRNA水平明显高于非炎性区，目前推断是通过促进肠黏膜固有层单核细胞分泌干扰素γ继而引起炎症[10]。由此可见，NFSF15在CD黏膜炎症的发病机制中发挥重要作用。

在发展中国家对CD的研究已成为消化内科医师关注的一个热点。激素和免疫抑制剂仍是CD内科治疗活动期的基础药物，但疗效不佳。因此，明确CD的病因，以期对因治疗是国内外消化医师迫切需要解决的问题。作为编码NFSF15的NFSF15基因自然引起人们的关注，本研究通过Meta分析显示，NFSF15基因rs3810936多态性与CD易患性有明显关联性。本研究通过Meta分析解决单个研究样本量小和地区差异等问题，但也存在以下不足：①本研究Meta分析只检索了国内外几个代表性数据库，检索语言仅为中文和英文，且只限于公开发表的文献，影响了纳入研究的全面性。②纳入研究的人群无法分清民族。③饮食和社会环境是影响CD易患性的重要因素,本研究纳入病例-健康对照组的研究往往忽略上述因素。由于存在以上的局限性，为进一步明确NFSF15基因rs3810936位点多态性与CD易患性的内在联系，尚需要开展更多样本量更大、设计更严谨、视角更宽的研究。

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