灵芝室内袋栽孢子粉的收集方式比较*

曾振基 钟莹莹 周卫雄 刘 明 肖自添 何焕清**



灵芝室内袋栽孢子粉的收集方式比较*

曾振基1钟莹莹1周卫雄1刘 明2肖自添2何焕清2**

（1.梅州市微生物研究所，广东 梅州 514071；2.广东省农业科学院蔬菜研究所 广东省蔬菜新技术研究重点实验室，广州 510640）

灵芝；孢子粉；子实体；收集；产量；污染率

广东省梅州市开展室内灵芝袋栽20多年来，取得了很多很好的经验与成果。但随着规模扩大和复种指数增加，遇到了不少亟待解决的新问题，如灵芝孢子粉收集的最佳时间选择与收集时间的长短的确定等。在实际生产过程中，种植户反映灵芝孢子粉收集50～60天后还能产粉，也有反映仅收集25天左右就开始出现木霉等杂菌污染，严重影响灵芝孢子粉及子实体的产量和品质。本试验发现，采用二次收粉的方式，可有效解决以上问题，明显提高孢子粉产量和品质。

1 材料与方法

1.1 供试菌株 灵芝菌种“泰山赤芝”由广东省农业科学院蔬菜研究所食用菌研究室提供。

1.2 母种制作 按常规方法制备PDA培养基，配方：马铃薯200 g，葡萄糖20 g，琼脂20 g，水1 000 mL，pH自然（5～6）。培养基分装入18×180（mm）试管中，每管10 mL，121 ℃灭菌0.5 h，取出后摆斜面。在超净工作台上定量接入菌丝，25 ℃恒温培养。

1.3 原种制作 原种培养基配方为：玉米（不粉碎）99%，石膏1%，料/水比为1/1.2，含水量约60%，pH为8。制作方法：玉米粒精选后水洗，清水浸泡12～13 h，水煮至用手按开玉米粒感觉软而不糊为适，晾干至表面无水，加入石膏粉，混匀装袋。每袋料湿重500 g，121 ℃灭菌1.5 h，冷却后在超净工作台上定量接入母种菌丝，25 ℃恒温培养。

1.4 培养料配制、接种及培养 培养料配方：杂木屑78%，玉米粉6%，麸皮15%，石膏粉1%。

调配培养料时，先将杂木屑预湿堆制24 h，再将各种辅料充分拌匀后加入到杂木屑中，料/水比为1/1.2，最后用石灰水调节pH至8，最终含水量约60%。栽培袋为折径17×35（cm）、厚0.05 mm的聚丙烯袋，每袋装培养料干重计350 g，装好后采用常压灭菌，保持100 ℃ 16～18 h。灭菌后将菌包搬入经消毒的接种室，冷却至室温后接种。接种严格按照无菌操作规程进行。将菌包搬入培养室以墙式摆放，保持室内黑暗，在自然温度条件下培养。早、中、晚各通风1 h，培养过程发现污染的菌包及时清理出培养室。

大部分菌丝长满菌袋的时间为45天。此批试验灵芝菌袋为2012年12月生产。

1.5 子实体培养 2013年4月25日，灵芝菌袋菌丝已长满，此时气温回升，昼夜温差较小，用小刀在菌袋的扎口上方开一个十字形的小口，使灵芝子实体由十字形小口长出。开口后将菌袋均匀堆放，栽培室温度保持在22～28 ℃，空气相对湿度90%～95%，栽培室经常通风换气，保持空气清新。此段时间约为40～45天。

1.6 上架产粉 2013年6月5日至6日，灵芝子实体边缘的金黄色转为棕红色，将菌包清洗干净，选择长势相当的个体同时上架。灵芝孢子粉多层式收集，培养架采用杉木制作，规格为2 m（长）×1 m（宽）×2 m（高），分3层，层间距为60 cm。试验共设6个培养架，分别编号为A、B、C、D、E、F。每个培养架放灵芝370个，上架完毕后用白纸密封，6个架的灵芝采用相同方法进行管理，并按照下面的时间点收集孢子粉和子实体。

（1）A、B架于上架25天（2013年7月2日）收集孢子粉和子实体。记录A、B架污染袋数，孢子粉和子实体晒干后称重。

（2）C、D架于上架25天（2013年7月2日）收集孢子粉。收完粉后将灵芝菌袋放回架上，再次用白纸密封，让灵芝继续产粉。操作时须轻拿轻放，以免灵芝子实体脱落，影响第二次收粉的产量。收集的孢子粉晒干后称重，并记录污染袋数。架上的灵芝继续弹粉至2013年7月30日（上架55天），进行第二次收粉并收子实体，晒干称重。

（3）E、F架于上架55天（2013年7月30日）时收集灵芝孢子粉和子实体，晒干后称重，并记录污染袋数。

1.7 统计方法 灵芝菌袋污染率的差异比较采用卡方检验；孢子粉产量与子实体产量两组间的比较采用t检验。

2 结果与分析

2.1 菌袋污染率 对表1的数据进行卡方检验，结果为三种采收方式灵芝菌袋的污染率有显著差异（c2=9.35，P=0.009 3＜0.05 ），其中A、B组污染率最低，为0.68%；C、D组污染率居中，为0.95%；E、F组污染率最高，为2.03%。

2.2 孢子粉产量 从表2可以看出，C、D组单位孢子粉产量明显高于A、B组和E、F组，分别高24%和 10.7%。E、F组与A、B组的孢子粉产量也有明显差异。

2.3 子实体产量 从表3可以看出，C、D组子实体产量明显高于A、B组和E、F组，分别高11.23%和9.1%。E、F组与A、B组无明显差异。

表1 不同收粉方式灵芝菌袋的污染情况

表2 不同收粉方式灵芝孢子粉的产量比较

表3 不同收粉方式灵芝子实体的产量比较

3 小 结

传统栽培灵芝上架产粉周期为25～55天，25天后产粉量明显减少，但不会停止，产粉过程子实体继续生长。上架25天收第一次粉可使子实体和菌包内的菌丝接触到更多氧气，促进灵芝生长，既可有效解决菌棒的污染问题，又能明显提高后期孢子粉和子实体的产量。因此，二次收粉的方式值得大力推广。

（略）

广东省产学研项目（2012B091100077），广东省农业攻关项目（2012A020100010）

曾振基，高级农艺师，从事食用菌研究推广，E-mail: mzwsw88@163.com

，研究员，E-mail:hhq407@sina.com

S646

A

2095-0934（2014）03-149-02