竞争性透射免疫比浊法和高效液相色谱法分别测定糖尿病者糖化血红蛋白的结果分析

周保卫（陕西省宝鸡市第二人民医院检验科，陕西 宝鸡 721000）

糖化血红蛋白（HbA1c）是和机体血液内葡萄糖相结合的血红蛋白，在血液内葡萄糖浓度达到很高值时，人体内HbA1c含量随之上升。HbA1c检测方法一般为色谱法、电泳法、免疫法和化学法。色谱法主要包括离子交换层析法、高效液相色谱法（HPLC）和亲和法、免疫比浊法、RIA、EIA、胶乳免疫凝集法（LIAA）等[1-3]。选择1800例糖尿病患者，应用免疫比浊法与HPLC法对HbA1c进行检测，并对其结果予以对比，分析免疫比浊法测定HbA1c结果是否具有较高准确性及可靠性，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料：选择我院2011年1月～2013年1月1800例糖尿病患者，男910例，女890例，年龄28～79岁。同时选择1800例健康体检者作为对照组。两组一般资料比较差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法：所有患者均应用竞争性透射免疫比浊法和HPLC法检测HbA1c值，EDTA抗凝剂下以一次性毛细血管进行全血采集，参照仪器说明进行检测处理。每批标本在进行检测时需同时对两个质控品予以检测。对两种检测方法学予以对比并测定其偏差。分析精密度，批内精密度测定时可任意选取对照组和糖尿病组患者标本各1例，在1 d内同时间检测20次。批间精密度：上述所用两份标本均应用冰冻方式保存，每天检测3次，持续20 d，分别计算均值（M）和变异系数（CV）。

1.3 统计学处理：所有数据均应用SPSS 18.0软件进行统计处理，两种检测法差异以CV表示；组间HbA1C值以t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

将免疫比浊法测定值设为y，且将HPLC法所测定值设定为x，所得到的直线回归方程式为y=0.9898 x+0.06，r=0.9994，两者有着较明显相关性，见图1。选择分析范围中医学决定水平端点，低值为4.0%，中值为6.5%，高值为16.0%，低值、中值、高值预期偏差分别为2.36%、3.04%、3.28%，总误差为7.5%，在能够接受范围之内。精密度均值（M）与变异系数（CV）计算结果见表1。应用HPLC检测对照组和糖尿病组患者HbA1C，对照组M±SD检测为（5.13±0.21）%，糖尿病组为（11.86±1.24）%，t=11.428，糖尿病者明显上升，差异有统计学意义（P＜0.01）。HbA1C水平和并发症出现几率存在较为密切关系，HbA1C＜6.5者糖尿病并发症发生率为16.67%（36/96），6.5～9.0者45.00%（324/720），＞9.0者为68.75%（594/864），伴随HbA1C水平上升，糖尿病并发症出现几率增加（P＜0.01）。

图1 免疫比浊法与 HPLC法检测HbA1C线性回归分析

表1 重复性试验结果对比

3 讨论

糖化血红蛋白（HbA1C）因为是人体血液内红细胞血红蛋白和血糖相结合而出现产物，水平和血糖浓度具有正比关系，而且可以持续保存在120 d，所以临床中一般将其作为患者8～12周血糖控制指标。因为HbA1C和血糖具有平行性，其生成较为缓慢，而且性质具有较高稳定性，不会在短期内由于血糖波动而发生变化，所以目前HbA1C≥6.5%已成为糖尿病的一种诊断标准。但是也有很多研究者认为HbA1C水平在测定时存在较多问题，所以需根据患者实际情况进行确定，而且有资料显示，糖尿病HbA1C所具有的临界值水平因为患者的年龄或种族不同而受到一定的影响[4-5]。

HbA1C目前在临床中对糖尿病患者进行筛查及监测是较为有效的方法。而对其进行测定所应用的方法较为公认的是高效液相色谱（HPLC），此方法所得到的结果具有较高的稳定性、准确性，而且能够进行溯源和比对，通过标准化后对批内CV检测能够达到2%，而批间CV则为3.3%。

经本文研究发现，免疫比浊法对同一批标本进行检测，其结果批内CV 3.9%，批间CV 44.6%，和HPLC法存在较为明显的相关性（r=0.9994），此种方法在检测中并无法得到较为精确的数据结果，但是并不存在较大的相对预期偏差，和近几年研究报道保持一致性。此方法操作简便，无繁复步骤少，能够极快得到结果，临床应用价值较高。

[1] 居 漪.糖化血红蛋白检测技术和质量控制[J].检验医学,2010,25(11):914.

[2] 何英武.糖化血红蛋白测定的研究新进展[J].当代医学,2008,24(1):58.

[3] 邹 伟.免疫透射比浊法检测糖化血红蛋白的方法评价[J].临床和实验医学杂志,2010,9(7):527.

[4] 胡应秀,张红梅.免疫透射比浊法测定HbA1c的可靠性研究[J].吉林医学,2011,32(24):4969.

[5] 林红霞,区洪炎,陈文娟.指导规范自我监测血糖对血糖的干预[J].吉林医学,2010,31(5):6558.