自制冻干多项目肿瘤标志物质控品的评价

姜慧芬 张剑英 陈文虎

(浙江省肿瘤医院,浙江 杭州 310022)

肿瘤标志物(tumor marker,TM)用于肿瘤的辅助诊断、疗效观察、监测复发转移和判断预后等越来越受到临床重视[1],因此,TM 的快速准确检测有重要的临床价值。可靠且稳定的肿瘤标志物质控品是确保TM 检测质量的重要保证[2]。目前国内临床实验室TM 检测质控品存在着单一项目质控品操作繁琐、液态质控品稳定性较差、进口产品价格昂贵等诸多问题。鉴于上述情况,本研究中以正常人血清为基质,包含临床实验室常用的15个TM 检测项目冻干质控品[3],现将其评价研究报告如下。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂 AXSYM 全自动免疫分析系统及配套试剂(美国Abbott 公司),ARCHITECT i2000全自动免疫分析系统及配套试剂(美国Abbott 公司),罗氏2010 全自动免疫分析系统及配套试剂(德国Roche 公司),FA1104 电子分析天平(上海民桥精密科学仪器有限公司)。自制冻干多项目肿瘤标志物质控品批号为：20070201。

1.2 方法 (1)外观：肉眼观察自制冻干多项目肿瘤标志物质控品及其复溶后的物理性质;(2)瓶间差异评价：随机抽取20 瓶同批自制冻干质控品,平衡至室温,分别利用分析天平精确称量复溶前整瓶质量和复溶倒出质控血清后的空瓶质量(空瓶经去离子水洗涤并烘干后称量),前后称量的质量差即为冻干质控品的质量;(3)室内差异评价：随机抽取20 瓶同批自制冻干质控品,复溶并充分混匀,混合上述质控品,连续检测20次再进行统计学分析;(4)室间差异评价：本院及其它4 家三甲医院共5 家医院的实验室分别检测自制冻干质控品,再进行分析;(5)稳定性评价：置2～8℃中0、6、12 和18个月,分别随机抽取20 瓶自制质控品,复溶并混匀,当日连续检测20次,比较不同时间段自制冻干质控品各项目结果的变异情况;(6)破坏性试验：随机抽取自制冻干质控品各20 瓶分别于37℃存放7 天,取出后复溶并充分混匀,当日连续检测20次,得到各项目均值和批内变异值,并与未置37℃的自制冻干质控品的结果进行比较。

1.3 统计学处理 采用SPSS10.0 统计软件包处理数据,进行配对t 检验和两组独立样本t 检验。

2 结果

2.1 外观 本冻干质控品为乳酪色疏松体,复溶后澄明液体,无异物。

2.2 瓶间差异 1～20 号瓶自制质控品质量分别为：82.4mg、82.6mg、83.5mg、82.2mg、82.1mg、82.1mg、83.6mg、82.1mg、83.6 mg、82.1 mg、82.1mg、82.6mg、82.1mg、82.4mg、82.5mg、82.5mg、82.5mg、82.4mg、82.6mg、82.4mg,平均质量为82.52mg,差异系数为0.60%。

2.3 室内差异 自制冻干质控品15个项目的均值,批内OCV 值均小于5.0%,详见表1。

2.4 室间差异 本院及其它4 家三甲医院,共5家医院的实验室(分别以H1、H2、H3、H4、H5 表示)应用不同分析系统根据上述方法对不同的项目测定所得结果详见表2。本实验室与其它4 家三甲医院实验室自制冻干质控品的结果比较,差异无统计学意义(P＞0.05)。

2.5 稳定性 自制冻干质控品置2～8℃中6、12和18个月的测定结果与刚生产时(0月)的结果进行比较,除了CA125 6个月、FER 18个月2项外(均P＜0.01),其它差异均无统计学意义(均P＞0.05),详见表3。

表1 自制质控品15个项目的均值和批内OCV 值

表2 5 家不同实验室检测结果比较(±s)

表2 5 家不同实验室检测结果比较(±s)

注：A 为Abbott Architect 仪器检测;B 为Bayer 仪器检测;C 为Roche 仪器检测;D 为Abbott AXSYM 仪器检测;E 为Lumilo 仪器检测;-为该单位没有此项目检测

表3 自制冻干质控品于2～8℃置0、6、12 与18个月测定结果(n=20)

2.6 破坏性试验 自制冻干质控品置37℃存放7天结果稳定,与0 天结果比较差异均无统计学意义(均P＞0.05),详见表4。

表4 制冻干质控品于37℃置0、7 天结果(n=20)

3 讨论

实验室室内质控(interal quality control,IQC)是质量管理体系中的一个重要环节,做好IQC 是确保TM 检测质量的重要保证。质控品是开展室内质控工作的物质前提,其性能特征包括一般性状、瓶间差异、稳定性等,与IQC 运行有效性密切相关[4],根据物理性状分类,质控品主要有冻干质控品和液体质控品。冻干质控品避免了液体质控品稳定性差、容易变质、不易保存等缺点。

目前国内尚无商品化生产自制冻干多项目TM质控品。本研究以日常工作中检测出的TM 高浓度血清为基础,将其调整至合适浓度,并以正常人血清为基质,经精密分装和真空冷冻干燥,自制了冻干多项目TM 质控品,该冻干质控品外观为乳酪色疏松体,复溶后澄明液体,无异物;净重相对变异系数为0.60%,瓶间分装均一;自制冻干质控品15个项目的批内OCV 值均小于5.0%,变异程度小;本实验室与其它4 家三甲医院实验室由于开展的检测项目不尽相同,由于条件所限,作者对自制质控品的部分项目进行检测并比较,采用相同商品化进口质控品进行质控,各项目检测结果差异无统计学意义(P＞0.05),能满足不同实验室日常质控要求;长期稳定性试验中将质控品于2～8℃中置0、6、12 和18个月,除CA125 6个月、FER 18个月2项与0个月有差异外(考虑可能由于仪器、操作等因素引起),其余结果比较差异无统计学意义(均P＞0.05),说明质控品在2～8℃放置18个月基本稳定,更长的保质期有待进一步研究;破坏性试验结果表明自制质控品在37℃存放1周结果稳定,已能满足日常工作需要,延长使用时间尚需进一步实验验证。

综上所述,自制冻干多项目TM 质控品可靠且稳定性好,能满足日常室内质控的要求,且有原料来源丰富,能够制备足够多的同一批号产品;价格低廉,能有效地降低医疗成本;使用方便,一个质控样本就能达到对其不同检测项目的监控,克服了单项目质控品操作繁琐的弊端。因此该质控品更适合我国国情,有利于扎实且有效地开展实验室质控,提高TM 检测质量。

[1]Meany D L,Sokoll L J,Chan D W.Early detection of cancer：immunoassays for plasma tumor markers,Expert OpinMed Diagn,2009,3(6)：597

[2]BenAyedM,BenHadj Hmida Y,Kassis M,et al.Quality control in tumor marker values：methlogy,results and potential problems.Tunis Med,2001,79(6-7)：341

[3]陈文虎,张剑英,张毅敏,等.多项目复合肿瘤标志物冻干质控品的制备.肿瘤学杂志,2009,15(6)：559

[4]冯仁丰.临床检验质量管理技术基础.2 版.上海：上海科学技术文献出版社,2007：229